TESIS FICOTOXINAS MARINAS EVA FONFRIA

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Discusión general
cruzada con los análogos GTX1/4, dcNEO y neoSTX. Sin embargo, esta
característica, común en muchos anticuerpos anti-PSP [40-42, 187, 188], no lo
excluye de ser un buen método de criba, ya que los episodios tóxicos de estas toxinas
son muy heterogéneos, presentándose muchas toxinas a la vez.
En el caso de la yessotoxina sí es posible utilizar una diana celular (la PDE 1), y
aunque la afinidad entre ambas moléculas sólo permite la cuantificación en el rango
µM, es suficiente para su detección dentro de los límites europeos (1 mg YTX/kg de
molusco).
Referente a las características individuales de la polarización de fluorescencia,
destacan principalmente su homogeneidad (la interacción entre las moléculas tiene
lugar realmente en solución), su rapidez (el tiempo de lectura de una placa de 96
pocillos es menor a 10 minutos) y sensibilidad (su límite de detección se sitúa en el
rango sub-nanomolar). La principal desventaja reside en el marcaje fluorescente de
uno de los componentes del ensayo. Habitualmente las reacciones de marcaje se
producen en los radicales más reactivos de la molécula, que a su vez suelen ser los
radicales por donde la molécula reacciona con otros compuestos, haciendo a veces
incompatible el marcaje con la interacción.
En el método desarrollado para la detección de gymnodiminas y espirólidos, la
molécula fluorescente es la α-bungarotoxina (marcada fluorescentmente de forma
comercial) por lo que ni el receptor nicotínico ni las toxinas se encuentran
modificados, lo que permite su unión de forma libre. En este ensayo, la
gymnodimina-A y el 13-desmetil espirólido C pueden detectarse en el rango nM, lo
que se traduce en un rango de µg/kg de molusco (utilizando el protocolo de
extracción apropiado), adecuado tanto para garantizar la salud de los consumidores
en caso de una futura regulación [63, 143] como para su detección en caso de falsos
positivos.
De forma conjunta, aunque ninguno de los tres métodos de detección descritos en
esta tesis puede sustituir de manera total a los bioensayos, sí pueden utilizarse como
métodos de criba o de descarte/confirmación en caso de falsos positivos, reduciendo