TESIS FICOTOXINAS MARINAS EVA FONFRIA
TESIS FICOTOXINAS MARINAS EVA FONFRIA TESIS FICOTOXINAS MARINAS EVA FONFRIA
4. DISCUSIÓN GENERAL 77 Discusión general La detección y cuantificación de ficotoxinas en moluscos destinados al consumo humano a través de métodos rápidos, sensibles, específicos y fiables es un elemento clave para la prevención de intoxicaciones y la reducción de las pérdidas económicas en el sector acuícola derivadas de la detección de falsos positivos (muestras negativas que el método utilizado para la determinación de toxinas detecta como positivas). En la Unión Europea, así como en la mayoría de países donde existe regulación para la presencia de ficotoxinas en moluscos comestibles, el método oficial de referencia para determinar estos compuestos (a excepción del grupo del ácido domoico) es el bioensayo en ratón. Esta técnica consiste en la inyección intraperitoneal de una muestra previamente extraída (con disolventes adecuados en función de las características hidrofílicas o lipofílicas de las moléculas a determinar) a un conjunto de ratones de peso establecido y en la posterior evaluación de la sintomatología producida y/o el tiempo de supervivencia de los animales. Aunque este método garantiza la protección de la salud pública, presenta una serie de problemas y limitaciones de carácter técnico, ético y legal, inherentes a su realización. Para paliar estas deficiencias, en las últimas décadas se han desarrollado varios métodos de detección para los distintos grupos de toxinas, pero muy pocos han sido reconocidos oficialmente como métodos alternativos a los respectivos bioensayos [10, 11]. En esta tesis se presentan tres métodos de detección y cuantificación de ficotoxinas mediante el uso de la polarización de fluorescencia y los biosensores basados en la resonancia del plasmón superficial. Aunque el principio físico de estas técnicas es distinto, ambas permiten la detección y monitorización de uniones moleculares en tiempo real. En comparación con los bioensayos, las técnicas utilizadas en esta tesis proporcionan dos ventajas importantes: no usan animales (evitando problemas éticos y legales) y son específicas (se trabaja directamente con la molécula con la que interactúan las toxinas, bien sea un anticuerpo o su diana natural, evitando interferencias con otros compuestos). Respecto a otros métodos de detección de ficotoxinas, como el HPLC,
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- Page 127 and 128: 89 Bibliografía D., Rommel, S. A.,
- Page 129 and 130: 91 Bibliografía [78] Lee, J. S., I
- Page 131 and 132: 93 Bibliografía [98] Satake, M., T
- Page 133 and 134: 95 Bibliografía toxins: pharmacolo
- Page 135 and 136: 97 Bibliografía [137] Gribble, K.
- Page 137 and 138: 99 Bibliografía [156] Harris, D. C
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4. DISCUSIÓN GENERAL<br />
77<br />
Discusión general<br />
La detección y cuantificación de ficotoxinas en moluscos destinados al consumo<br />
humano a través de métodos rápidos, sensibles, específicos y fiables es un elemento<br />
clave para la prevención de intoxicaciones y la reducción de las pérdidas económicas<br />
en el sector acuícola derivadas de la detección de falsos positivos (muestras<br />
negativas que el método utilizado para la determinación de toxinas detecta como<br />
positivas).<br />
En la Unión Europea, así como en la mayoría de países donde existe regulación para<br />
la presencia de ficotoxinas en moluscos comestibles, el método oficial de referencia<br />
para determinar estos compuestos (a excepción del grupo del ácido domoico) es el<br />
bioensayo en ratón. Esta técnica consiste en la inyección intraperitoneal de una<br />
muestra previamente extraída (con disolventes adecuados en función de las<br />
características hidrofílicas o lipofílicas de las moléculas a determinar) a un conjunto<br />
de ratones de peso establecido y en la posterior evaluación de la sintomatología<br />
producida y/o el tiempo de supervivencia de los animales. Aunque este método<br />
garantiza la protección de la salud pública, presenta una serie de problemas y<br />
limitaciones de carácter técnico, ético y legal, inherentes a su realización. Para paliar<br />
estas deficiencias, en las últimas décadas se han desarrollado varios métodos de<br />
detección para los distintos grupos de toxinas, pero muy pocos han sido reconocidos<br />
oficialmente como métodos alternativos a los respectivos bioensayos [10, 11].<br />
En esta tesis se presentan tres métodos de detección y cuantificación de ficotoxinas<br />
mediante el uso de la polarización de fluorescencia y los biosensores basados en la<br />
resonancia del plasmón superficial. Aunque el principio físico de estas técnicas es<br />
distinto, ambas permiten la detección y monitorización de uniones moleculares en<br />
tiempo real.<br />
En comparación con los bioensayos, las técnicas utilizadas en esta tesis proporcionan<br />
dos ventajas importantes: no usan animales (evitando problemas éticos y legales) y<br />
son específicas (se trabaja directamente con la molécula con la que interactúan las<br />
toxinas, bien sea un anticuerpo o su diana natural, evitando interferencias con otros<br />
compuestos). Respecto a otros métodos de detección de ficotoxinas, como el HPLC,