REF 43 621 / 43 629 Gélose chromID™ Salmonella ... - bioMerieux

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REF 43 621 / 43 629 12044 E - fr - 2007/09 Gélose chromID Salmonella (SM2) Milieu chromogène pour l’isolement sélectif et la différenciation du genre Salmonella Gélose chromID TM Salmonella est la nouvelle dénomination de la Gélose SM ® ID 2. INTRODUCTION ET OBJET DU TEST La gélose chromID TM Salmonella est un milieu d'isolement sélectif et de différenciation destiné à la recherche des Salmonella à partir de prélèvements d’origine humaine (selles, prélèvements rectaux) et de produits alimentaires selon les normes NF EN ISO 6579 (8) et NF V 08-052 (7). La gélose chromID TM Salmonella est basée sur un principe de détection différent de celui de la gélose SM ® ID (Réf. 43 291). Elle permet en plus la recherche des Salmonella lactose (+) et a une spécificité de coloration supérieure. PRINCIPE La gélose chromID TM Salmonella est constituée d’une base nutritive associant différentes peptones et 3 substrats chromogènes permettant : • la croissance de l’ensemble des Salmonella. • la révélation des activités enzymatiques correspondantes. La différenciation des Salmonella, y compris des Salmonella lactose (+), repose sur le principe suivant : coloration spontanée rose pâle à mauve des colonies productrices d’estérase. Les autres souches bactériennes développent des colonies de couleurs différentes. Le mélange sélectif permet d’inhiber la plupart des bactéries Gram (+) et les levures. PRÉSENTATION Milieux prêts à l’emploi REF 43 621 Coffret de 2 x 10 boîtes (90 mm) REF 43 629 Coffret de 10 x 10 boîtes (90 mm) SM2 * * imprimé sur chaque boîte COMPOSITION Formule théorique. Ce milieu peut être ajusté et/ou supplémenté en fonction des critères de performances imposés: Peptones (porcin ou bovin).............................................................6,25 g Tris .................................................................................................0,16 g Lactose (bovin) ....................................................................................6 g Sels biliaires (bovin ou ovin) .............................................................1,5 g Mélange chromogène.....................................................................9,63 g NaCl ....................................................................................................5 g Mélange sélectif..............................................................................0,03 g Agar...................................................................................................14 g Eau purifiée ..........................................................................................1 l pH 7,3 MATERIEL NECESSAIRE MAIS NON FOURNI • Etuve bactériologique. bioMérieux ® SA Français - 1 IVD REACTIFS COMPLEMENTAIRES • Bouillon Sélénite F (Réf. 42 099). • Bouillon Rappaport (Réf. 42 091). • Bouillon Rappaport-Vassiliadis (Réf. 42 043). • Bouillon Sélénite Cystine (Réf. 42 052). • Bouillon Rappaport-Vassiliadis Soja (Réf. 42 110). • Bouillon Muller-Kauffmann au tétrathionate et novobiocine (Réf. 42 114). • VIDAS ® ICS (Réf. 30 435) PRECAUTIONS D’UTILISATION • Pour diagnostic in vitro et pour contrôle microbiologique. • Pour usage professionnel uniquement. • Ce coffret contient des composants d'origine animale. La maîtrise de l'origine et/ou de l'état sanitaire des animaux ne pouvant garantir de façon absolue que ces produits ne contiennent aucun agent pathogène transmissible, il est recommandé de les manipuler avec les précautions d'usage relatives aux produits potentiellement infectieux (ne pas ingérer ; ne pas inhaler). • Les prélèvements, cultures bactériennes et produits ensemencés doivent être considérés comme potentiellement infectieux et doivent être manipulés de façon appropriée. Les techniques aseptiques et les précautions usuelles de manipulation pour le groupe bactérien étudié doivent être respectées tout au long de la manipulation; se référer à "CLSI ® M29-A, Protection of Laboratory Workers from occupationally Acquired Infections; Approved Guideline – Révision en vigueur". Pour informations complémentaires sur les précautions de manipulation, se référer à "Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories – CDC/NIH - Dernière édition ", ou à la réglementation en vigueur dans le pays d'utilisation. • Les milieux de culture ne doivent pas être utilisés comme matériau ou composant de fabrication. • Ne pas utiliser les réactifs après la date de péremption. • Ne pas utiliser les réactifs dont l’emballage est détérioré. • Ne pas utiliser des boîtes contaminées ou exsudées. • L'interprétation des résultats du test doit être faite en tenant compte du contexte clinique, de l'origine du prélèvement, des aspects macro et microscopiques et éventuellement des résultats d'autres tests. • L’utilisation du milieu peut être délicate pour des personnes ayant des difficultés d’appréciation des couleurs. • Les performances présentées ont été obtenues avec la méthodologie indiquée dans cette notice. Toute déviation de méthodologie peut modifier les résultats. CONDITIONS DE STOCKAGE • Les boîtes se conservent entre 2°C et 8°C dans leur coffret jusqu’à la date de péremption. • La durée de conservation des boîtes hors du coffret, en sachet cellophane, est de 2 semaines à 2-8°C. • Conserver à l’abri de la lumière.

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> / <strong>43</strong> <strong>629</strong> 12044 E - fr - 2007/09<br />

<strong>Gélose</strong> chromID <strong>Salmonella</strong> (SM2)<br />

Milieu chromogène pour l’isolement sélectif et la différenciation du genre <strong>Salmonella</strong><br />

<strong>Gélose</strong> chromID TM <strong>Salmonella</strong> est la nouvelle dénomination de la <strong>Gélose</strong> SM ® ID 2.<br />

INTRODUCTION ET OBJET DU TEST<br />

La gélose chromID TM <strong>Salmonella</strong> est un milieu d'isolement<br />

sélectif et de différenciation destiné à la recherche des<br />

<strong>Salmonella</strong> à partir de prélèvements d’origine humaine<br />

(selles, prélèvements rectaux) et de produits alimentaires<br />

selon les normes NF EN ISO 6579 (8) et NF V 08-052 (7).<br />

La gélose chromID TM <strong>Salmonella</strong> est basée sur un<br />

principe de détection différent de celui de la gélose SM ®<br />

ID<br />

(Réf. <strong>43</strong> 291). Elle permet en plus la recherche des<br />

<strong>Salmonella</strong> lactose (+) et a une spécificité de coloration<br />

supérieure.<br />

PRINCIPE<br />

La gélose chromID TM <strong>Salmonella</strong> est constituée d’une<br />

base nutritive associant différentes peptones et 3<br />

substrats chromogènes permettant :<br />

• la croissance de l’ensemble des <strong>Salmonella</strong>.<br />

• la révélation des activités enzymatiques<br />

correspondantes.<br />

La différenciation des <strong>Salmonella</strong>, y compris des<br />

<strong>Salmonella</strong> lactose (+), repose sur le principe suivant :<br />

coloration spontanée rose pâle à mauve des colonies<br />

productrices d’estérase.<br />

Les autres souches bactériennes développent des<br />

colonies de couleurs différentes.<br />

Le mélange sélectif permet d’inhiber la plupart des<br />

bactéries Gram (+) et les levures.<br />

PRÉSENTATION<br />

Milieux prêts à l’emploi<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> Coffret de 2 x 10 boîtes (90 mm)<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>629</strong> Coffret de 10 x 10 boîtes (90 mm)<br />

SM2 *<br />

* imprimé sur chaque boîte<br />

COMPOSITION<br />

Formule théorique.<br />

Ce milieu peut être ajusté et/ou supplémenté en fonction des critères<br />

de performances imposés:<br />

Peptones (porcin ou bovin).............................................................6,25 g<br />

Tris .................................................................................................0,16 g<br />

Lactose (bovin) ....................................................................................6 g<br />

Sels biliaires (bovin ou ovin) .............................................................1,5 g<br />

Mélange chromogène.....................................................................9,63 g<br />

NaCl ....................................................................................................5 g<br />

Mélange sélectif..............................................................................0,03 g<br />

Agar...................................................................................................14 g<br />

Eau purifiée ..........................................................................................1 l<br />

pH 7,3<br />

MATERIEL NECESSAIRE MAIS NON FOURNI<br />

• Etuve bactériologique.<br />

bioMérieux ® SA Français - 1<br />

IVD<br />

REACTIFS COMPLEMENTAIRES<br />

• Bouillon Sélénite F (Réf. 42 099).<br />

• Bouillon Rappaport (Réf. 42 091).<br />

• Bouillon Rappaport-Vassiliadis (Réf. 42 0<strong>43</strong>).<br />

• Bouillon Sélénite Cystine (Réf. 42 052).<br />

• Bouillon Rappaport-Vassiliadis Soja (Réf. 42 110).<br />

• Bouillon Muller-Kauffmann au tétrathionate et<br />

novobiocine (Réf. 42 114).<br />

• VIDAS ® ICS (Réf. 30 <strong>43</strong>5)<br />

PRECAUTIONS D’UTILISATION<br />

• Pour diagnostic in vitro et pour contrôle<br />

microbiologique.<br />

• Pour usage professionnel uniquement.<br />

• Ce coffret contient des composants d'origine animale.<br />

La maîtrise de l'origine et/ou de l'état sanitaire des<br />

animaux ne pouvant garantir de façon absolue que ces<br />

produits ne contiennent aucun agent pathogène<br />

transmissible, il est recommandé de les manipuler avec<br />

les précautions d'usage relatives aux produits<br />

potentiellement infectieux (ne pas ingérer ; ne pas<br />

inhaler).<br />

• Les prélèvements, cultures bactériennes et produits<br />

ensemencés doivent être considérés comme<br />

potentiellement infectieux et doivent être manipulés de<br />

façon appropriée. Les techniques aseptiques et les<br />

précautions usuelles de manipulation pour le groupe<br />

bactérien étudié doivent être respectées tout au long de<br />

la manipulation; se référer à "CLSI ® M29-A, Protection<br />

of Laboratory Workers from occupationally Acquired<br />

Infections; Approved Guideline – Révision en vigueur".<br />

Pour informations complémentaires sur les précautions<br />

de manipulation, se référer à "Biosafety in<br />

Microbiological and Biomedical Laboratories – CDC/NIH<br />

- Dernière édition ", ou à la réglementation en vigueur<br />

dans le pays d'utilisation.<br />

• Les milieux de culture ne doivent pas être utilisés<br />

comme matériau ou composant de fabrication.<br />

• Ne pas utiliser les réactifs après la date de péremption.<br />

• Ne pas utiliser les réactifs dont l’emballage est<br />

détérioré.<br />

• Ne pas utiliser des boîtes contaminées ou exsudées.<br />

• L'interprétation des résultats du test doit être faite en<br />

tenant compte du contexte clinique, de l'origine du<br />

prélèvement, des aspects macro et microscopiques et<br />

éventuellement des résultats d'autres tests.<br />

• L’utilisation du milieu peut être délicate pour des<br />

personnes ayant des difficultés d’appréciation des<br />

couleurs.<br />

• Les performances présentées ont été obtenues avec la<br />

méthodologie indiquée dans cette notice. Toute<br />

déviation de méthodologie peut modifier les résultats.<br />

CONDITIONS DE STOCKAGE<br />

• Les boîtes se conservent entre 2°C et 8°C dans leur<br />

coffret jusqu’à la date de péremption.<br />

• La durée de conservation des boîtes hors du coffret, en<br />

sachet cellophane, est de 2 semaines à 2-8°C.<br />

• Conserver à l’abri de la lumière.


<strong>Gélose</strong> chromID <strong>Salmonella</strong> (SM2) 12044 E - fr - 2007/09<br />

ECHANTILLONS<br />

Utilisation en bactériologie médicale :<br />

Le milieu est directement ensemencé à partir de selles<br />

(liquides ou en suspension en eau physiologique stérile),<br />

de prélèvements rectaux ou d’un bouillon<br />

d’enrichissement.<br />

Il convient de respecter les bonnes pratiques en terme de<br />

prélèvements et de transport.<br />

Utilisation en bactériologie alimentaire :<br />

Suivre les recommandations des normes en vigueur pour<br />

la réalisation des prélèvements et la préparation des<br />

échantillons.<br />

MODE OPERATOIRE<br />

Utilisation en bactériologie médicale :<br />

La recherche de <strong>Salmonella</strong> grâce à la gélose chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong> peut se faire suivant le schéma habituel de la<br />

coproculture :<br />

1. Laisser les boîtes revenir à température ambiante.<br />

2. Ensemencer la gélose chromID TM <strong>Salmonella</strong><br />

directement à partir des échantillons ou après<br />

enrichissement en bouillon Rappaport ou Sélénite F.<br />

3. Incuber à l’étuve, couvercle en bas, à 37°C en<br />

aérobiose. Le choix de la température d’incubation est<br />

de la responsabilité de l’utilisateur en fonction de<br />

l’application et des normes en vigueur. Les cultures<br />

sont examinées après 18 à 24 heures d’incubation.<br />

Dans certains cas, il peut être nécessaire de prolonger<br />

l’incubation.<br />

Utilisation en bactériologie alimentaire :<br />

Ce milieu est adapté à l’application simplifiée du protocole<br />

normalisé NF EN ISO 6579 (8) et NF V 08-052 (7) pour la<br />

recherche des <strong>Salmonella</strong> dans les produits<br />

alimentaires.<br />

Selon la norme NF EN ISO 6579 (8), l’isolement sur<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> est réalisé parallèlement à une<br />

gélose XLD après pré-enrichissement en eau peptonée<br />

tamponnée puis enrichissement en bouillons Rappaport-<br />

Vassiliadis Soja et Muller-Kauffmann au tétrathionate et<br />

novobiocine.<br />

1. Laisser les boîtes revenir à température ambiante.<br />

2. Ensemencer chacun des 2 bouillons d’enrichissement<br />

sur 2 boîtes distinctes.<br />

3. Incuber à l’étuve, couvercle en bas, entre 35 et 37°C<br />

en aérobiose.<br />

Les cultures sont examinées généralement après 18 à<br />

24 heures d’incubation.<br />

La gélose chromID TM <strong>Salmonella</strong> est également<br />

compatible avec l’utilisation du test VIDAS Immuno-<br />

Concentration <strong>Salmonella</strong> (VIDAS ® ICS).<br />

LECTURE ET INTERPRETATION<br />

• Après incubation, observer la croissance bactérienne.<br />

• Noter la présence de colonies caractéristiques de<br />

<strong>Salmonella</strong> : colonies rose pâle à mauve.<br />

• L’identification du ou des micro-organismes isolés doit<br />

être poursuivie par des tests biochimiques et/ou<br />

immunologiques (6).<br />

bioMérieux ® SA Français - 2<br />

CONTROLE DE QUALITE<br />

Protocole :<br />

La fertilité du milieu peut être testée vis-à-vis de la souche<br />

suivante :<br />

• <strong>Salmonella</strong> Typhimurium ATCC ® Résultats attendus :<br />

14028<br />

Souche Résultats à 33-37°C<br />

<strong>Salmonella</strong> Typhimurium<br />

ATCC ® Croissance en Colonies<br />

14028<br />

24 heures roses à<br />

mauve<br />

Remarque :<br />

Il est de la responsabilité de l'utilisateur de prendre en<br />

compte la nature de l'application et la législation locale en<br />

vigueur pour la mise en oeuvre du contrôle de qualité<br />

(fréquence, nombre de souches, température<br />

d'incubation... ).<br />

LIMITES DU TEST<br />

• Lors de la croissance de certains micro-organismes, des<br />

précipités blancs peuvent être observés. Ces précipités<br />

ne présentent pas l’aspect caractéristique des colonies<br />

de <strong>Salmonella</strong>.<br />

• Certains sérotypes de <strong>Salmonella</strong> (en particulier<br />

<strong>Salmonella</strong> Dublin, <strong>Salmonella</strong> Abortusovis, <strong>Salmonella</strong><br />

Gallinarum) peuvent présenter une coloration faible ou<br />

tardive.<br />

• Certains bacilles Gram (-) autres que <strong>Salmonella</strong><br />

peuvent présenter des colonies caractéristiques. Il est<br />

donc nécessaire de réaliser une identification complète<br />

par des tests complémentaires.<br />

• Certaines selles peuvent contenir des estérases libres<br />

susceptibles de provoquer l’apparition d’une coloration<br />

rose à mauve de la gélose au point d’inoculation.<br />

• Selon la sensibilité des souches aux agents sélectifs,<br />

certaines bactéries Gram (+) ou certaines levures<br />

peuvent se développer sur ce milieu.<br />

• Le développement est fonction des exigences propres à<br />

chaque micro-organisme. Il est donc possible que<br />

certaines souches de <strong>Salmonella</strong> ayant des exigences<br />

spécifiques ne se développent pas.<br />

• En fonction des prélèvements analysés, il est<br />

recommandé d’associer la gélose chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong> avec des milieux complémentaires destinés<br />

à la coproculture (par exemple géloses Campylosel,<br />

Yersinia, Clostridium difficile …).<br />

• En microbiologie alimentaire, il est recommandé<br />

d’associer la gélose chromID TM <strong>Salmonella</strong> avec un des<br />

milieux recommandés par la norme de référence.<br />

• La gélose chromID TM <strong>Salmonella</strong> a été évaluée sur les<br />

principales matrices alimentaires et sur un grand<br />

nombre de souches bactériennes. Compte tenu de la<br />

diversité des produits alimentaires, des procédés de<br />

fabrication et de la flore microbienne, il peut être<br />

nécessaire de vérifier que la gélose chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong> est bien adaptée à la spécificité des produits<br />

à tester.


<strong>Gélose</strong> chromID <strong>Salmonella</strong> (SM2) 12044 E - fr - 2007/09<br />

PERFORMANCES<br />

Validation sur prélèvements :<br />

La gélose chromID TM <strong>Salmonella</strong> a été comparée à la<br />

gélose SM ® ID et à un autre milieu chromogène.<br />

260 prélèvements d’origine humaine (selles et écouvillons<br />

rectaux) ont été analysés dont :<br />

• 231 naturellement contaminés ou non en salmonelles.<br />

• 29 selles négatives artificiellement contaminées en<br />

salmonelles.<br />

Les prélèvements de selles ont été ensemencés<br />

directement sur les milieux et après enrichissement en<br />

bouillon Sélénite F.<br />

Les prélèvements rectaux ont été ensemencés<br />

uniquement après enrichissement en bouillon Sélénite F.<br />

Les performances ont été évaluées après 24 heures<br />

d’incubation à 37°C.<br />

Fertilité et sensibilité de détection de <strong>Salmonella</strong><br />

Parmi les 260 prélèvements étudiés, 40 ont présenté des<br />

cultures positives en salmonelles sur au moins un des 3<br />

milieux (identification confirmée).<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID2<br />

SM ® ID Autre milieu<br />

Sensibilité de<br />

détection de<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

39/40<br />

(98%)<br />

36/40<br />

(90%)<br />

28/40<br />

(70%)<br />

Spécificité de coloration<br />

Parmi les colonies caractéristiques observées sur chacun<br />

des milieux, la proportion de colonies confirmées<br />

<strong>Salmonella</strong> est la suivante :<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong>=<br />

SM ® ID2<br />

SM ® ID Autre milieu<br />

Spécificité de la<br />

coloration<br />

39/42<br />

(93 %)<br />

36/50<br />

(72 %)<br />

28/29<br />

(97 %)<br />

Détection des souches des <strong>Salmonella</strong> lactose (+) :<br />

La gélose chromID TM <strong>Salmonella</strong> a été comparée à la<br />

gélose SM ® ID.<br />

9 cultures pures de <strong>Salmonella</strong> Lactose (+) ont été<br />

réalisées. 7 souches ont présenté des colonies<br />

caractéristiques sur la gélose chromID TM <strong>Salmonella</strong> alors<br />

qu’aucune n’était caractéristique sur la gélose SM ® ID.<br />

ELIMINATION DES DECHETS<br />

Eliminer les réactifs utilisés et non utilisés ainsi que les<br />

matériels à usage unique contaminés en suivant les<br />

procédures relatives aux produits infectieux ou<br />

potentiellement infectieux. Il incombe à chaque laboratoire<br />

de gérer les déchets et les effluents qu'il produit selon leur<br />

nature et leur dangerosité, et d'en assurer (ou faire<br />

assurer) le traitement et l'élimination selon les<br />

réglementations applicables.<br />

ATCC est une marque utilisée, déposée et/ou enregistrée appartenant à American Type Culture Collection.<br />

CLSI est une marque utilisée, déposée et/ou enregistrée appartenant à Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.<br />

bioMérieux ® SA<br />

au capital de 12 029 370 €<br />

673 620 399 RCS LYON<br />

<strong>REF</strong>ERENCES BIBLIOGRAPHIQUES<br />

1. AGBAN A., OUNANIAN M., LUU-DUC C. et al. – Synthèse<br />

de substrats indigogéniques. Mise en évidence de l’activité<br />

estérasique des <strong>Salmonella</strong>. – Eur. J. Med. Chem., 1990, vol.<br />

25, p. 697-699.<br />

2. DELORME S., SENTA-LOYS A., SAUVONNET V. et al. –<br />

SM ID 2, a new chromogenic medium for isolation, detection<br />

and presomptive identification of <strong>Salmonella</strong>: comparison<br />

with SM ID, Hektoen and four commercially available<br />

chromogenic media. – Poster 933, Glasgow 2003, 13 th<br />

ECCMID.<br />

3. MANAFI M., WILLINGER B. – Comparison of three rapid<br />

methods for identification of <strong>Salmonella</strong> spp. – Lett. Appl.<br />

Microbiol., 1994, vol. 19, p. 328-331.<br />

4. PIGNATO S., GIAMMANCO G., GIAMMANCO G. –<br />

Rambach agar and SM-ID medium sensitivity for presumptive<br />

identification of <strong>Salmonella</strong> subspecies I-VI. – J. Med.<br />

Microbiol., 1995, vol. <strong>43</strong> , p. 68-71.<br />

5. RUIZ J., NUMEZ M.L., DIAZ J et al. – Comparison of five<br />

plating media for isolation of <strong>Salmonella</strong> species from human<br />

stools. – J. Clin. Microbiol., 1996, vol. 34, p. 686-688.<br />

6. SENTA-LOYS A., SAUVONNET V., ROGER-DALBERT C. –<br />

Impact of SM ID 2, a new chromogenic medium, on<br />

identification and susceptibility results. – Poster n° 642, Paris<br />

2003, 23 rd RICAI.<br />

7. Microbiologie des aliments. - Recherche des <strong>Salmonella</strong>.<br />

Méthode de routine. - NF V 08-052 - Mai 97 – AFNOR –<br />

ISSN 0335-3931.<br />

8. Microbiologie des aliments. Directives générales pour la<br />

recherche des <strong>Salmonella</strong>. – NF EN ISO 6579, Décembre<br />

2002, ISSN 0335-3931.<br />

TABLE DES SYMBOLES<br />

Symbole Signification<br />

ou <strong>REF</strong><br />

69280 Marcy-l'Etoile / France<br />

Tél. 33 (0)4 78 87 20 00<br />

Fax 33 (0)4 78 87 20 90<br />

http://www.biomerieux.com<br />

Référence du catalogue<br />

Dispositif médical de diagnostic in<br />

vitro<br />

Fabricant<br />

Limites de température<br />

Utiliser jusque<br />

Code du lot<br />

Consulter les instructions<br />

d'utilisation<br />

Contenu suffisant pour "n" tests<br />

Conserver à l’abri de la lumière<br />

Imprimé en France<br />

bioMérieux, le logo bleu VIDAS, SM et chromID sont des marques utilisées, déposées et/ou enregistrées appartenant à<br />

bioMérieux SA ou à l’une de ses filiales.


<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong>/ <strong>43</strong> <strong>629</strong> 12044 E - en - 2007/09<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> Agar (SM2)<br />

Chromogenic medium for the selective isolation and differentiation of the genus <strong>Salmonella</strong><br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> is the new name of SM ® ID 2 agar.<br />

SUMMARY AND EXPLANATION<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar is a selective isolation and<br />

differentiation medium for the detection of <strong>Salmonella</strong> in<br />

human specimens (stools, rectal specimens) and food<br />

products according to standards NF EN ISO 6579 (8) and<br />

NF V 08-052 (7).<br />

The detection principle for chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar is<br />

different to that of SM ® ID agar (Ref. <strong>43</strong> 291). In addition,<br />

it enables the detection of lactose (+) <strong>Salmonella</strong>, with<br />

higher specificity of coloration.<br />

PRINCIPLE<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar consists of a nutritive base<br />

combining different peptones and 3 chromogenic<br />

substrates which enable:<br />

• the growth of all <strong>Salmonella</strong>.<br />

• the detection of activities of specific enzymes.<br />

The differentiation of <strong>Salmonella</strong>, including lactose (+)<br />

<strong>Salmonella</strong>, is based on the following principle:<br />

spontaneous pale pink to mauve coloration of strains<br />

producing esterase.<br />

Other bacterial strains produce colonies that are different<br />

colors.<br />

The selective mixture inhibits most Gram (+) bacteria and<br />

yeasts.<br />

CONTENT OF THE KIT<br />

Ready-to-use medium<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> Pack of 2 x 10 plates (90 mm)<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>629</strong> Pack of 10 x 10 plates (90 mm)<br />

SM2 *<br />

* Printed on each plate<br />

COMPOSITION<br />

Theoretical formula.<br />

This medium can be adjusted and/or supplemented according to the<br />

performance criteria required:<br />

Peptones (porcine or bovine)..........................................................6.25 g<br />

Tris .................................................................................................0.16 g<br />

Lactose (bovine) ..................................................................................6 g<br />

Bile salts (bovine or ovine)................................................................1.5 g<br />

Chromogenic mixture......................................................................9.63 g<br />

NaCl ....................................................................................................5 g<br />

Selective mixture ............................................................................0.03 g<br />

Agar...................................................................................................14 g<br />

Purified water........................................................................................1 l<br />

pH 7.3<br />

MATERIAL REQUIRED BUT NOT PROVIDED<br />

• Bacteriology incubator.<br />

bioMérieux ® SA English - 1<br />

IVD<br />

POSSIBLE ADDITIONAL REAGENTS<br />

• Selenite F broth (Ref. 42 099).<br />

• Rappaport broth (Ref. 42 091).<br />

• Rappaport-Vassiliadis broth (Ref. 42 0<strong>43</strong>).<br />

• Selenite Cystine broth (Ref. 42 052).<br />

• Rappaport-Vassiliadis Soy broth (Ref. 42 110).<br />

• Muller-Kauffmann broth with tetrathionate and<br />

novobiocin (Ref. 42 114).<br />

• VIDAS ® ICS (Ref. 30 <strong>43</strong>5)<br />

WARNINGS AND PRECAUTIONS<br />

• For in vitro diagnostic use and microbiological<br />

control only.<br />

• For professional use only.<br />

• This kit contains products of animal origin. Certified<br />

knowledge of the origin and/or sanitary state of the<br />

animals does not totally guarantee the absence of<br />

transmissible pathogenic agents. It is therefore<br />

recommended that these products be treated as<br />

potentially infectious, and handled observing the usual<br />

safety precautions (do not ingest or inhale).<br />

• All specimens, microbial cultures and inoculated<br />

products should be considered infectious and handled<br />

appropriately. Aseptic technique and usual precautions<br />

for handling the bacterial group studied should be<br />

observed throughout this procedure. Refer to "CLSI ®<br />

M29-A, Protection of Laboratory Workers From<br />

occupationally Acquired Infections; Approved Guideline<br />

– Current Revision". For further information on handling<br />

precautions, refer to "Biosafety in Microbiological and<br />

Biomedical Laboratories – CDC/NIH - Latest edition", or<br />

the current regulations in the country of use.<br />

• Culture media should not be used as manufacturing<br />

material or components.<br />

• Do not use reagents past the expiry date.<br />

• Do not use reagents if the packaging is damaged.<br />

• Do not use contaminated plates, or plates that exude<br />

moisture.<br />

• Interpretation of the test results should be made taking<br />

into consideration the patient's history, the source of the<br />

specimen, macro and microscopic morphology and, if<br />

necessary, the results of any other tests performed.<br />

• Use of the medium may be difficult for people who have<br />

problems recognizing colors.<br />

• The performance data were obtained using the<br />

procedure indicated in this package insert. Any change<br />

or modification in the procedure may affect the results.<br />

STORAGE CONDITIONS<br />

• Store the plates in their box at 2°C-8°C until the<br />

expiry date.<br />

• If not in the box, plates can be stored for 2 weeks at 2-<br />

8°C in the cellophane sachet.<br />

• Protect from light.


chromID <strong>Salmonella</strong> Agar (SM2) 12044 E - en - 2007/09<br />

SPECIMENS<br />

For use in medical bacteriology<br />

The medium is inoculated directly using stools (liquid<br />

stools or a suspension of stools in sterile physiological<br />

saline), rectal specimens or an enrichment broth.<br />

Good laboratory practices for collection and transport<br />

should be respected.<br />

For use in food bacteriology<br />

Follow the recommendations in the current standards to<br />

perform specimen collection and preparation.<br />

INSTRUCTIONS FOR USE<br />

For use in medical bacteriology:<br />

The detection of <strong>Salmonella</strong> using chromID TM <strong>Salmonella</strong><br />

agar may be performed according to the usual fecal<br />

culture protocol:<br />

1. Allow plates to come to room temperature.<br />

2. Inoculate the chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar directly from<br />

the specimens or after enrichment using Rappaport or<br />

Selenite F broth.<br />

3. Incubate with the cover bottom side at 37°C in aerobic<br />

conditions. The user is responsible for choosing the<br />

appropriate temperature for the intended use, in<br />

accordance with current standards. The cultures are<br />

examined after 18-24 hours of incubation. In certain<br />

cases it may be necessary to prolong incubation.<br />

For use in food bacteriology:<br />

This medium is suited to the simplified application of the<br />

standardized protocol NF EN ISO 6579 (8) and NF-V 08-<br />

52 (7) for the detection of <strong>Salmonella</strong> in food products.<br />

According to the NF EN ISO 6579 standard (8), isolation<br />

on chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar should be performed in<br />

parallel with XLD agar after pre-enrichment in buffered<br />

peptone water, followed by enrichment in Rappaport-<br />

Vassiliadis Soy broth and Muller-Kauffmann broth with<br />

tetrathionate and novobiocin.<br />

1. Allow plates to come to room temperature.<br />

2. Inoculate each of the 2 enrichment broths on 2<br />

separate plates.<br />

3. Incubate with the cover bottom side at 35-37°C in<br />

aerobic conditions.<br />

The cultures are generally examined after 18-24 hours<br />

of incubation.<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar is also compatible for use<br />

with the VIDAS Immuno-Concentration <strong>Salmonella</strong> assay<br />

(VIDAS ®ICS).<br />

READING AND INTERPRETATION<br />

• After incubation, observe the bacterial growth.<br />

• Record the presence of characteristic colonies of<br />

<strong>Salmonella</strong> : pale pink to mauve colonies<br />

• Identification of the microorganism(s) isolated must be<br />

followed by biochemical and/or immunological tests (6).<br />

QUALITY CONTROL<br />

Protocol:<br />

The nutrient capacity of the medium can be tested using<br />

the following strain:<br />

• <strong>Salmonella</strong> Typhimurium ATCC ® 14028<br />

bioMérieux ® SA English - 2<br />

Range of expected results:<br />

Strain Results at 33-37°C<br />

<strong>Salmonella</strong> Typhimurium<br />

ATCC ® Growth within Pink to<br />

14028<br />

24 hours mauve<br />

colonies<br />

Note:<br />

It is the responsibility of the user to perform Quality<br />

Control taking into consideration the intended use of the<br />

medium, and in accordance with any local applicable<br />

regulations (frequency, number of strains, incubation<br />

temperature…).<br />

LIMITATIONS OF THE METHOD<br />

• White precipitates may be observed when certain<br />

microorganisms grow. These precipitates do not have<br />

the characteristic appearance of <strong>Salmonella</strong> colonies.<br />

• Some <strong>Salmonella</strong> serovars (in particular<br />

<strong>Salmonella</strong> Dublin, <strong>Salmonella</strong> Abortusovis, <strong>Salmonella</strong><br />

Gallinarum) may produce a weak coloration or be slow<br />

to produce a coloration.<br />

• Certain Gram (-) bacilli other than <strong>Salmonella</strong> may<br />

product characteristic colonies. Complete identification<br />

must therefore be performed using additional tests.<br />

• Certain stool specimens may contain free esterases<br />

which are likely to produce a pink to mauve coloration of<br />

the medium at the inoculation point.<br />

• Depending on the sensitivity of strains to selective<br />

agents, certain Gram (+) bacteria or yeasts may grow on<br />

this medium.<br />

• Growth depends on the requirements of each individual<br />

microorganism. It is therefore possible that certain<br />

strains of <strong>Salmonella</strong>, which have specific requirements,<br />

may not develop.<br />

• Depending on the specimens analyzed, it is<br />

recommended to use chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar in<br />

conjunction with additional media intended for fecal<br />

culture (e.g. Campylosel, Yersinia, Clostridium difficile<br />

agars, etc.).<br />

• In food microbiology, it is recommended to use<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar in conjunction with media<br />

recommended by the reference standard.<br />

• chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar has been evaluated on the<br />

main food matrices and on a large number of bacterial<br />

strains. Given the wide variety of food products,<br />

manufacturing processes and microbial flora, it may be<br />

necessary to check that chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar is<br />

properly suited to the specific nature of the products<br />

tested.<br />

PERFORMANCE<br />

Validation using specimens<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar was compared with SM® ID<br />

agar and another chromogenic medium.<br />

260 human specimens (stools and rectal specimens) were<br />

tested, including:<br />

• 231 specimens which were naturally contaminated or<br />

not contaminated with salmonella.<br />

• 29 negative stool specimens which were artificially<br />

contaminated with salmonella.<br />

The stool specimens were inoculated directly on the<br />

media and after enrichment in Selenite F broth.<br />

Rectal specimens were inoculated only after enrichment<br />

in Selenite F broth.<br />

Performance was evaluated after 24 hours of incubation<br />

at 37°C.


chromID <strong>Salmonella</strong> Agar (SM2) 12044 E - en - 2007/09<br />

Nutrient capacity and sensitivity of <strong>Salmonella</strong> detection<br />

Forty of the 260 specimens studied produced positive<br />

salmonella cultures on at least one of the 3 media<br />

(identification confirmed).<br />

Sensitivity of<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

detection<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

=SM ® ID 2<br />

39/40<br />

(98%)<br />

SM ® ID Other medium<br />

36/40<br />

(90%)<br />

28/40<br />

(70%)<br />

Specificity of coloration<br />

Among the characteristic colonies observed on each of<br />

the media, the proportion of colonies confirmed as<br />

<strong>Salmonella</strong> is the following:<br />

Specificity of<br />

coloration<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

=SM ® ID 2<br />

39/42<br />

(93%)<br />

Detection of lactose (+) <strong>Salmonella</strong>:<br />

SM ® ID Other medium<br />

36/50<br />

(72%)<br />

28/29<br />

(97%)<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar was compared to SM ® ID<br />

agar.<br />

Nine pure lactose (+) <strong>Salmonella</strong> cultures were achieved.<br />

Seven strains produced characteristic colonies on<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> agar, whereas no colonies were<br />

characteristic on SM ® ID agar.<br />

WASTE DISPOSAL<br />

Dispose of used or unused reagents as well as any other<br />

contaminated disposable materials following procedures<br />

for infectious or potentially infectious products. It is the<br />

responsibility of each laboratory to handle waste and<br />

effluents produced according to their nature and degree of<br />

hazardousness and to treat and dispose of them (or have<br />

them treated and disposed of) in accordance with any<br />

applicable regulations.<br />

LITERATURE <strong>REF</strong>ERENCES<br />

1. AGBAN A., OUNANIAN M., LUU-DUC C. et al. – Synthèse<br />

de substrats indigogéniques. Mise en évidence de l’activité<br />

estérasique des <strong>Salmonella</strong>. – Eur. J. Med. Chem., 1990, vol.<br />

25, p. 697-699.<br />

2. DELORME S., SENTA-LOYS A., SAUVONNET V. et al. –<br />

SM ID 2, a new chromogenic medium for isolation, detection<br />

and presomptive identification of <strong>Salmonella</strong>: comparison<br />

with SM ID, Hektoen and four commercially available<br />

chromogenic media. – Poster 933, Glasgow 2003, 13th<br />

ECCMID.<br />

3. MANAFI M., WILLINGER B. – Comparison of three rapid<br />

methods for identification of <strong>Salmonella</strong> spp. – Lett. Appl.<br />

Microbiol., 1994, vol. 19, p. 328-331.<br />

4. PIGNATO S., GIAMMANCO G., GIAMMANCO G. –<br />

Rambach agar and SM-ID medium sensitivity for presumptive<br />

identification of <strong>Salmonella</strong> subspecies I-VI. – J. Med.<br />

Microbiol., 1995, vol. <strong>43</strong> , p. 68-71.<br />

5. RUIZ J., NUMEZ M.L., DIAZ J and al. – Comparison of five<br />

plating media for isolation of <strong>Salmonella</strong> species from human<br />

stools. – J. Clin. Microbiol., 1996, vol. 34, p. 686-688.<br />

ATCC is a used, pending and/or registered trademark belonging to American Type Culture Collection.<br />

CLSI is a used, pending and/or registered trademark of Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.<br />

bioMérieux ® SA<br />

au capital de 12 029 370 €<br />

673 620 399 RCS LYON<br />

6. SENTA-LOYS A., SAUVONNET V., ROGER-DALBERT C. –<br />

Impact of SM ID 2, a new chromogenic medium, on<br />

identification and susceptibility results. – Poster n° 642, Paris<br />

2003, 23rd RICAI.<br />

7. Microbiologie des aliments. - Recherche des <strong>Salmonella</strong>.<br />

Méthode de routine. - NF V 08-052 - Mai 97 – AFNOR –<br />

ISSN 0335-3931.<br />

8. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Horizontal<br />

method for the detection of <strong>Salmonella</strong>. – NF EN ISO 6579,<br />

December 2002, ISSN 0335-3931.<br />

INDEX OF SYMBOLS<br />

Symbol Meaning<br />

or <strong>REF</strong><br />

Catalogue number<br />

69280 Marcy-l'Etoile / France<br />

Tel. 33 (0)4 78 87 20 00<br />

Fax 33 (0)4 78 87 20 90<br />

http://www.biomerieux.com<br />

In Vitro Diagnostic Medical Device<br />

Manufacturer<br />

Temperature limitation<br />

Use by<br />

Batch code<br />

Consult Instructions for Use<br />

Contains sufficient for tests<br />

Protect from light<br />

WARRANTY<br />

bioMérieux disclaims all warranties, express or implied,<br />

including any implied warranties of MERCHANTABILITY<br />

AND FITNESS FOR A PARTICULAR USE. bioMérieux<br />

shall not be liable for any incidental or consequential<br />

damages. IN NO EVENT SHALL BIOMERIEUX’S<br />

LIABLITY TO CUSTOMER UNDER ANY CLAIM<br />

EXCEED A <strong>REF</strong>UND OF THE AMOUNT PAID TO<br />

BIOMERIEUX FOR THE PRODUCT OR SERVICE<br />

WHICH IS THE SUBJECT OF THE CLAIM.<br />

Printed inFrance<br />

bioMérieux, the blue logo VIDAS, SM and chromID are used, pending and/or registered trademarks belonging to<br />

bioMérieux SA or one of its subsidiaries.


<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> / <strong>43</strong> <strong>629</strong> 12044 E - de - 2007/09<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> Agar (SM2)<br />

Chromogenes Medium zur selektiven Isolierung und Differenzierung von Salmonellen<br />

IVD<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar ist die neue Bezeichnung für den SM ® ID 2 Agar.<br />

EINFÜHRUNG UND PRODUKTERKLÄRUNG<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar ist ein Selektivmedium zur<br />

Differenzierung und zum Nachweis von Salmonellen aus<br />

klinischem Untersuchungsmaterial (Stuhl,<br />

Rektumabstriche) und Lebensmitteln gemäß den Normen<br />

NF EN ISO 6579 (8) und NF V 08-052 (7).<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar basiert auf einem anderen<br />

Nachweisprinzip als SM ® ID Agar (Best.Nr. <strong>43</strong> 291).<br />

Dieses Medium ermöglicht zusätzlich den Nachweis von<br />

Laktose-positiven Salmonellen und hat eine höhere<br />

Farbspezifität.<br />

PRINZIP<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar besteht aus einer<br />

Nährstoffbasis mit verschiedenen Peptonen und 3<br />

chromogenen Substraten. Sie ermöglichen:<br />

• das Wachstum aller Salmonellen.<br />

• den Nachweis entsprechender Enzymaktivitäten.<br />

Die Differenzierung von Salmonellen, einschließlich<br />

Laktose-positiver Salmonellen, basiert auf folgendem<br />

Prinzip: spontane hellrosa bis blasslila Färbung von<br />

Esterase-positiven Kolonien.<br />

Andere Bakterienstämme bilden andersfarbige Kolonien.<br />

Durch die Selektivmischung werden die meisten<br />

grampositiven Keime und Hefen gehemmt.<br />

PACKUNGSGRÖSSE<br />

Gebrauchsfertige Medien<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> Packung mit 2 x 10 Platten (90 mm)<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>629</strong> Packung mit 10 x 10 Platten (90 mm)<br />

SM2*<br />

* auf jeder Platte aufgedruckt<br />

ZUSAMMENSETZUNG<br />

Theoretische Zusammensetzung.<br />

Dieses Medium kann in Abhängigkeit von den erforderlichen<br />

Leistungskriterien angepasst und/oder supplementiert werden:<br />

Peptone (Schwein oder Rind).........................................................6,25 g<br />

Tris .................................................................................................0,16 g<br />

Laktose (Rind) .....................................................................................6 g<br />

Gallensalze (Rind oder Schaf) ..........................................................1,5 g<br />

Chromogene Mischung...................................................................9,63 g<br />

NaCl ....................................................................................................5 g<br />

Selektivmischung............................................................................0,03 g<br />

Agar...................................................................................................14 g<br />

Gereinigtes Wasser ..............................................................................1 l<br />

pH 7,3<br />

ZUSÄTZLCH ERFORDERLICHE MATERIALIEN<br />

• Brutschrank für die Mikrobiologie.<br />

bioMérieux ® SA Deutsch - 1<br />

ERGÄNZENDE REAGENZIEN<br />

• Selenit F Bouillon (Best. Nr. 42 099).<br />

• Rappaport Bouillon (Best. Nr. 42 091).<br />

• Rappaport-Vassiliadis Bouillon (Best. Nr. 42 0<strong>43</strong>).<br />

• Selenit Cystin Bouillon (Best. Nr. 42 052).<br />

• Rappaport-Vassiliadis Soja Bouillon (Best. Nr. 42 110).<br />

• Müller-Kauffmann Bouillon mit Tetrathionat und<br />

Novobiocin (Best. Nr. 42 114).<br />

• VIDAS ® ICS (Best. Nr. 30 <strong>43</strong>5)<br />

VORSICHTSMASSNAHMEN<br />

• Für die in vitro Diagnostik und die mikrobiologische<br />

Kontrolle.<br />

• Nur für die Verwendung durch Fachkundige<br />

bestimmt.<br />

• Dieser Kit enthält Bestandteile tierischen Ursprungs. Da<br />

durch die Kontrolle der Herkunft und/oder des<br />

Gesundheitszustandes der Tiere nicht völlig gewährleistet<br />

werden kann, dass diese Produkte keine<br />

übertragbaren pathogenen Agenzien enthalten, ist es<br />

empfehlenswert, diese als potenziell infektiös zu<br />

betrachten und unter Beachtung entsprechender<br />

Vorsichtsmaßnahmen zu behandeln (nicht einnehmen,<br />

nicht einatmen).<br />

• Die Proben, Mikroorganismen und beimpften Produkte<br />

müssen als potenziell infektiös betrachtet und unter<br />

Beachtung geeigneter Vorsichtsmaßnahmen sachgemäß<br />

behandelt werden. Während der gesamten<br />

Testdurchführung müssen aseptische Arbeitsbedingungen<br />

und entsprechende Vorsichtsmaßnahmen für<br />

die zu untersuchende Keimgruppe eingehalten werden,<br />

siehe „CLSI ® M29-A, Protection of Laboratory Workers<br />

from Occupationally Acquired Infections, Approved<br />

Guideline – aktuelle Revision“. Weitere diesbezügliche<br />

Informationen finden Sie in „Biosafety in Microbiological<br />

and Biomedical Laboratories, CDC/NIH – Letzte<br />

Ausgabe" oder in den jeweils gültigen Richtlinien.<br />

• Die Kulturmedien dürfen nicht als Materialien oder<br />

Bestandteile für die Herstellung verwendet werden.<br />

• Die Platten nach Ablauf des Verfallsdatums nicht mehr<br />

verwenden.<br />

• Platten mit beschädigter Verpackung nicht verwenden.<br />

• Kontaminierte oder eingetrocknete Platten nicht<br />

verwenden.<br />

• Bei der Interpretation der Ergebnisse müssen der<br />

klinische Hintergrund, die Probenherkunft, Kolonie- und<br />

mikroskopische Morphologie sowie gegebenenfalls die<br />

Ergebnisse anderer Tests berücksichtigt werden.<br />

• Der Gebrauch des Mediums ist für Personen mit<br />

Problemen bei der Farbwahrnehmung möglicherweise<br />

schwierig.<br />

• Die angegebene Performance wurde gemäß dem<br />

Verfahren der vorliegenden Arbeitsanleitung ermittelt.<br />

Jede Abweichung von diesem Verfahren kann die<br />

Ergebnisse beeinflussen.<br />

LAGERUNGSBEDINGUNGEN<br />

• Die Platten sind in ihrem Originalkarton bei 2-8°C<br />

bis zum Verfallsdatum haltbar.<br />

• Außerhalb des Originalkartons beträgt die Haltbarkeit<br />

der Platten im Zellophanbeutel 2 Wochen bei 2-8°C.<br />

• Lichtgeschützt lagern.


chromID <strong>Salmonella</strong> Agar (SM2) 12044 E - de - 2007/09<br />

PROBEN<br />

Gebrauch in der medizinischen Mikrobiologie:<br />

Das Medium wird direkt mit flüssigem Stuhl, einer<br />

Stuhlsuspension (in steriler physiologischer Kochsalzlösung),<br />

Rektumabstrichen oder einer Anreicherungsbouillon<br />

beimpft.<br />

Bei der Gewinnung und dem Transport der Proben sollten<br />

die GLP-Richtlinien beachtet werden.<br />

Gebrauch in der Lebensmittel-Mikrobiologie:<br />

Beachten Sie bei der Gewinnung und Aufarbeitung der<br />

Proben die Empfehlungen der gültigen Normen.<br />

GEBRAUCH<br />

Gebrauch in der medizinischen Mikrobiologie:<br />

Der Nachweis von Salmonellen im Stuhl mit dem<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar kann gemäß dem für<br />

Stuhlproben üblichen Verfahren durchgeführt werden:<br />

1. Die Platten auf Raumtemperatur bringen.<br />

2. Überimpfen Sie die Proben direkt oder nach<br />

Anreicherung in Rappaport oder Selenit F Bouillon auf<br />

den chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar.<br />

3. Inkubieren Sie im Brutschrank mit dem Deckel nach<br />

unten bei 37°C unter aeroben Bedingungen. Es liegt in<br />

der Verantwortung des Anwenders, die geeignete<br />

Inkubationstemperatur in Abhängigkeit von dem<br />

Verwendungszweck und in Übereinstimmung mit den<br />

gültigen Normen zu wählen. Die Kulturen werden nach<br />

18 - 24 h Inkubation abgelesen. In einigen Fällen<br />

muss die Inkubation verlängert werden.<br />

Gebrauch in der Lebensmittel-Mikrobiologie:<br />

Dieses Medium eignet sich für eine vereinfachte<br />

Anwendung der Standardverfahren NF EN ISO 6579 (8)<br />

und NF V 08-052 (7) zum Nachweis von Salmonellen in<br />

Lebensmitteln.<br />

Gemäß der Norm NF EN ISO 6579 (8) erfolgt die<br />

Isolierung auf chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar parallel zu<br />

einem XLD Agar nach Voranreicherung in gepuffertem<br />

Peptonwasser mit nachheriger Anreicherung in<br />

Rappaport-Vassiliadis Soja und Müller-Kauffmann<br />

Bouillon mit Tetrathionat und Novobiocin.<br />

1. Die Platten auf Raumtemperatur bringen.<br />

2. Überimpfen Sie beide Anreicherungsbouillons auf<br />

2 verschiedene Platten.<br />

3. Inkubieren Sie im Brutschrank mit dem Deckel nach<br />

unten bei 35 bis 37°C unter aeroben Bedingungen.<br />

Die Kulturen werden im Allgemeinen nach 18 bis<br />

24 h Inkubation abgelesen.<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar ist mit dem VIDAS Immuno-<br />

Concentration <strong>Salmonella</strong> (VIDAS ® ICS) kompatibel.<br />

ABLESUNG UND INTERPRETATION<br />

• Nach der Inkubation das Keimwachstum beurteilen.<br />

• Notieren Sie die Anwesenheit charakteristischer<br />

Kolonien: <strong>Salmonella</strong>-Kolonien sind hellrosa bis<br />

blasslila-farben.<br />

• Die Identifizierung der isolierten Keime muss biochemisch<br />

und/oder immunologisch durchgeführt werden<br />

(6).<br />

bioMérieux ® SA Deutsch - 2<br />

QUALITÄTSKONTROLLE<br />

Verfahren:<br />

Die Wachstumseigenschaften des Mediums können mit<br />

folgendem Stamm getestet werden:<br />

• <strong>Salmonella</strong> Typhimurium ATCC ® Erwartete Ergebnisse:<br />

14028<br />

Stamm Ergebnisse bei 33-37°C<br />

<strong>Salmonella</strong> Typhimurium<br />

ATCC ® 14028<br />

Wachstum<br />

innerhalb<br />

rosa bis<br />

blasslila-<br />

24 h farbene<br />

Kolonien<br />

Anmerkung:<br />

Es liegt in der Verantwortung des Anwenders, den<br />

Verwendungszweck des Mediums und die jeweils gültigen<br />

Bestimmungen bei der Durchführung der Qualitätskontrolle<br />

(Frequenz, Anzahl der Stämme,<br />

Inkubationstemperatur...) zu berücksichtigen.<br />

LIMITIERUNGEN<br />

• Beim Wachstum einiger Mikroorganismen können weiße<br />

Niederschläge gebildet werden. Diese haben jedoch<br />

nicht das charakteristische Aussehen von <strong>Salmonella</strong><br />

Kolonien.<br />

• Einige <strong>Salmonella</strong>-Serotypen (vor allem <strong>Salmonella</strong><br />

Dublin, <strong>Salmonella</strong> Abortusovis, <strong>Salmonella</strong> Gallinarum)<br />

können eine schwache oder verzögert auftretende<br />

Färbung zeigen.<br />

• Einige gramnegative nicht <strong>Salmonella</strong> Stämme können<br />

charakteristische Kolonien zeigen. Es muss deshalb<br />

eine vollständige Identifizierung mit weiteren Tests<br />

durchgeführt werden.<br />

• Einige Stühle können freie Esterasen enthalten, die an<br />

der Beimpfungsstelle eine rosa bis blasslila Färbung des<br />

Agars hervorrufen können.<br />

• Einige grampositive Keime oder Hefen können je nach<br />

Sensitivität der Stämme gegenüber den selektiven<br />

Agenzien auf diesem Medium wachsen.<br />

• Das Wachstum hängt von den Wachstumsansprüchen<br />

des jeweiligen Keimes ab. Es ist deshalb möglich, dass<br />

einige Salmonellen mit besonderen Wachstumsansprüchen<br />

nicht wachsen.<br />

• Je nach Untersuchungsmaterial ist es empfehlenswert,<br />

den chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar zusammen mit<br />

weiteren Medien für die Stuhlkultur (z.B. Campylosel,<br />

Yersinia, Clostridium difficile Agar…) zu verwenden.<br />

• In der Lebensmittel-Mikrobiologie ist es empfehlenswert,<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar zusammen mit einem in der<br />

Referenznorm empfohlenen Medium zu verwenden.<br />

• chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar wurde für die wichtigsten<br />

Lebensmittel-matrizes und zahlreiche Bakterienstämme<br />

evaluiert. Aufgrund der Variabilität der Lebensmittel, der<br />

Herstellungsverfahren und der Bakterienflora muss<br />

gegebenenfalls geprüft werden, ob chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong> Agar für die Spezifität der jeweiligen<br />

Untersuchungsmaterialien geeignet ist.


chromID <strong>Salmonella</strong> Agar (SM2) 12044 E - de - 2007/09<br />

PERFORMANCE<br />

Validierung mit Untersuchungsmaterialien:<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar wurde mit dem SM ® ID Agar<br />

und einem anderen chromogenen Medium verglichen.<br />

260 Proben humanen Ursprungs (Stuhl und Rektumabstriche)<br />

wurden analysiert, davon:<br />

• 231 Proben mit natürlicher <strong>Salmonella</strong>-Kontamination<br />

oder nicht kontaminierte Proben.<br />

• 29 negative Stuhlproben, die künstlich mit Salmonellen<br />

kontaminiert wurden.<br />

Die Stuhlproben wurden direkt und nach Anreicherung in<br />

Selenit F Bouillon auf die Medien überimpft.<br />

Die Rektumabstriche wurden nur nach Anreicherung in<br />

Selenit F Bouillon überimpft.<br />

Die Leistungsdaten wurden nach 24 h Inkubation bei 37°C<br />

evaluiert.<br />

Wachstumseigenschaften und Sensitivität des<br />

<strong>Salmonella</strong>-Nachweises<br />

40 der 260 getesteten Proben bildeten auf mindestens<br />

einem der 3 Medien <strong>Salmonella</strong>-Kolonien (Identifizierung<br />

bestätigt).<br />

Sensitivität für den<br />

Nachweis von<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

39/40<br />

(98%)<br />

SM ® ID anderes<br />

Medium<br />

36/40<br />

(90%)<br />

28/40<br />

(70%)<br />

Spezifität der Färbung<br />

Von den auf jedem Medium beobachteten charakteristischen<br />

Kolonien beträgt der Anteil an <strong>Salmonella</strong>:<br />

Spezifität der<br />

Färbung<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

39/42<br />

(93 %)<br />

SM ® ID anderes<br />

Medium<br />

36/50<br />

(72 %)<br />

28/29<br />

(97 %)<br />

Nachweis Laktose-positiver Salmonellen:<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar wurde mit SM ® ID Agar<br />

verglichen.<br />

Es wurden 9 Reinkulturen Laktose-positiver <strong>Salmonella</strong>-<br />

Stämme untersucht. 7 Stämme bildeten charakteristische<br />

Kolonien auf chromID TM <strong>Salmonella</strong> Agar, während SM ®<br />

ID Agar keine charakteristischen Kolonien zeigte.<br />

BESEITIGUNG DER ABFÄLLE<br />

Entsorgen Sie alle gebrauchten und nicht gebrauchten<br />

Reagenzien sowie kontaminierte Einwegmaterialien<br />

gemäß den für infektiöse oder potenziell infektiöse<br />

Materialien geltenden Bestimmungen. Es liegt in der<br />

Verantwortung jedes Labors, die entstandenen Fest- und<br />

Flüssigabfälle gemäß der jeweiligen Risikogruppe zu<br />

behandeln und deren Entsorgung in Übereinstimmung mit<br />

den gültigen gesetzlichen Bestimmungen sicherzustellen.<br />

ATCC ist eine verwendete, angemeldete und/oder eingetragene Marke von American Type Culture Collection.<br />

CLSI ist eine verwendete, angemeldete und/oder eingetragene Marke von Clinical and Laboratory Standards Institute Inc<br />

bioMérieux ® SA<br />

au capital de 12 029 370 €<br />

673 620 399 RCS LYON<br />

LITERATUR<br />

1. AGBAN A., OUNANIAN M., LUU-DUC C. et al. – Synthèse<br />

de substrats indigogéniques. Mise en évidence de l’activité<br />

estérasique des <strong>Salmonella</strong>. – Eur. J. Med. Chem., 1990, vol.<br />

25, p. 697-699.<br />

2. DELORME S., SENTA-LOYS A., SAUVONNET V. et al. –<br />

SM ID 2, a new chromogenic medium for isolation, detection<br />

and presomptive identification of <strong>Salmonella</strong>: comparison<br />

with SM ID, Hektoen and four commercially available<br />

chromogenic media. – Poster 933, Glasgow 2003, 13 th<br />

ECCMID.<br />

3. MANAFI M., WILLINGER B. – Comparison of three rapid<br />

methods for identification of <strong>Salmonella</strong> spp. – Lett. Appl.<br />

Microbiol., 1994, vol. 19, p. 328-331.<br />

4. PIGNATO S., GIAMMANCO G., GIAMMANCO G. –<br />

Rambach agar and SM-ID medium sensitivity for presumptive<br />

identification of <strong>Salmonella</strong> subspecies I-VI. – J. Med.<br />

Microbiol., 1995, vol. <strong>43</strong> , p. 68-71.<br />

5. RUIZ J., NUMEZ M.L., DIAZ J et al. – Comparison of five<br />

plating media for isolation of <strong>Salmonella</strong> species from human<br />

stools. – J. Clin. Microbiol., 1996, vol. 34, p. 686-688.<br />

6. SENTA-LOYS A., SAUVONNET V., ROGER-DALBERT C. –<br />

Impact of SM ID 2, a new chromogenic medium, on<br />

identification and susceptibility results. – Poster n° 642, Paris<br />

2003, 23 rd RICAI.<br />

7. Microbiologie des aliments. - Recherche des <strong>Salmonella</strong>.<br />

Méthode de routine. - NF V 08-052 - Mai 97 – AFNOR –<br />

ISSN 0335-3931.<br />

8. Microbiologie des aliments. Directives générales pour la<br />

recherche des <strong>Salmonella</strong>. – NF EN ISO 6579, Décembre<br />

2002, ISSN 0335-3931.<br />

SYMBOLE<br />

Symbol Bedeutung<br />

oder <strong>REF</strong> Bestellnummer<br />

69280 Marcy-l'Etoile / France<br />

Tel. 33 (0)4 78 87 20 00<br />

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In Vitro Diagnostikum<br />

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Verwendbar bis<br />

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Gebrauchsanweisung beachten<br />

Inhalt ausreichend für <br />

Prüfungen<br />

Lichtgeschützt lagern<br />

Gedruckt in Frankreich<br />

bioMérieux, das blaue Logo,VIDAS, SM und chromID sind verwendete, angemeldete und/oder eingetragene Marken<br />

von bioMérieux SA oder einer ihrer Niederlassungen.


<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> / <strong>43</strong> <strong>629</strong> 12044 E - es - 2007/09<br />

Medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> (SM2)<br />

Medio cromogénico para el aislamiento selectivo y la diferenciación del género <strong>Salmonella</strong><br />

Medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> es el nombre nuevo del medio SM ID2.<br />

INTRODUCCION Y OBJETO DEL ENSAYO<br />

El medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> es un medio de<br />

aislamiento selectivo y de diferenciación destinado a la<br />

detección de <strong>Salmonella</strong> a partir de muestras de origen<br />

humano (heces, muestras rectales) y de productos<br />

alimentarios según las normas NF EN ISO 6579 (8) y NF<br />

V 08-052 (7).<br />

El medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> está basado en un<br />

principio de detección diferente al del medio SM ® ID (Ref.<br />

<strong>43</strong> 291). Permite una mejor detección de <strong>Salmonella</strong><br />

lactosa (+) y tiene una especificidad de color superior.<br />

PRINCIPIO<br />

El medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> está constituido por una<br />

base nutritiva que asocia diferentes peptonas y 3<br />

substratos cromogénicos que permiten:<br />

• el crecimiento del conjunto de las <strong>Salmonella</strong>.<br />

• el revelado de las actividades enzimáticas<br />

correspondientes.<br />

La diferenciación de las <strong>Salmonella</strong>, incluida las<br />

<strong>Salmonella</strong> lactosa (+), se basa en el siguiente principio:<br />

coloración espontánea de rosa pálido a malva de las<br />

colonias productoras de esterasa.<br />

Las otras cepas bacterianas desarrollan colonias de<br />

diferentes colores.<br />

La mezcla selectiva permite inhibir la mayoría de las<br />

bacterias Gram (+) y las levaduras.<br />

PRESENTACION<br />

Medios listos al empleo<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> Envase de 2 x 10 placas (90 mm)<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>629</strong> Envase de 10 x 10 placas (90 mm)<br />

SM2 *<br />

* impreso en cada placa<br />

COMPOSICION<br />

Fórmula teórica .<br />

Este medio puede ajustarse y/o suplementarse en función de los<br />

criterios de prestaciones requeridas:<br />

Peptonas (porcina o bovina)...........................................................6,25 g<br />

Tris .................................................................................................0,16 g<br />

Lactosa (bovina) ..................................................................................6 g<br />

Sales biliares (bovina u ovina) ..........................................................1,5 g<br />

Mezcla cromógena .........................................................................9,63 g<br />

NaCl ....................................................................................................5 g<br />

Mezcla selectiva .............................................................................0,03 g<br />

Agar...................................................................................................14 g<br />

Agua purificada.....................................................................................1 l<br />

pH 7,3<br />

MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO<br />

• Estufa bacteriológica.<br />

REACTIVOS COMPLEMENTARIOS<br />

• Caldo Selenite F (Ref. 42 099).<br />

• Caldo Rappaport (Ref. 42 091).<br />

• Caldo Rappaport-Vassiliadis (Ref. 42 0<strong>43</strong>).<br />

• Caldo Selenite Cistina (Ref. 42 052).<br />

• Caldo Rappaport-Vassiliadis Soja (Ref. 42 110).<br />

• Caldo Muller-Kauffmann con tetrationato y novobiocina<br />

(Ref. 42 114).<br />

• VIDAS ® ICS (Ref. 30 <strong>43</strong>5)<br />

bioMérieux ® SA Español - 1<br />

IVD<br />

PRECAUCIONES DE UTILIZACION<br />

• Para diagnóstico in vitro y para control<br />

microbiológico.<br />

• Para uso profesional únicamente.<br />

• Este equipo contiene componentes de origen animal. El<br />

certificado de origen y/o el estado sanitario de los<br />

animales no puede garantizar de forma absoluta que<br />

estos productos no contienen ningún agente patógeno<br />

transmisible, se recomienda manipularlos con las<br />

precauciones relativas de los productos potencialmente<br />

infecciosos (no ingerir, no inhalar).<br />

• Las muestras, cultivos bacterianos y productos<br />

inoculados deben ser considerados como<br />

potencialmente infecciosos y deben ser manipulados de<br />

forma apropiada. Deben respetarse las técnicas de<br />

asepsia y las precauciones usuales de manipulación<br />

para el grupo bacteriano estudiado a lo largo de todo el<br />

proceso de manipulación; consultar en "CLSI ® M29-A,<br />

Protection of Laboratory Workers from Instrument<br />

Biohazards and Infectious Disease Transmitted by<br />

Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved Guideline –<br />

Revisión en vigor". Para obtener informaciones<br />

complementarias sobre las precauciones de<br />

manipulación, consultar: "Biosafety in Microbiological<br />

and Biomedical Laboratories – CDC/NIH – Última<br />

edición)", o la reglamentación en vigor en el país de<br />

utilización.<br />

• Los medios de cultivo no deben ser utilizados como<br />

material o componente de fabricación.<br />

• No utilizar los reactivos después de la fecha de<br />

caducidad.<br />

• No utilizar los reactivos cuyo envase esté deteriorado.<br />

• No utilizar placas contaminadas o exudadas.<br />

• La interpretación de los resultados de la prueba debe<br />

hacerse teniendo en cuenta el contexto clínico, los<br />

aspectos macro y microscópicos, y eventualmente los<br />

resultados de otras pruebas.<br />

• La utilización del medio puede ser delicada para<br />

personas con dificultades en la apreciación de los<br />

colores.<br />

• Las prestaciones presentadas han sido obtenidas con la<br />

metodología indicada en esta ficha técnica. Toda<br />

desviación en la metodología puede modificar los<br />

resultados.<br />

CONDICIONES DE CONSERVACION<br />

• Las placas se conservan entre 2°C y 8°C en su<br />

envase hasta la fecha de caducidad.<br />

• La duración de conservación de las placas fuera del<br />

envase, en bolsa de celofán, es de 2 semanas a 2-8°C.<br />

• Conservar protegido de la luz.<br />

MUESTRAS<br />

Utilización en bacteriología clínica :<br />

El medio se siembra directamente a partir de heces<br />

(líquidas o en suspensión de suero fisiológico estéril), de<br />

muestras rectales o de un caldo de enriquecimiento.<br />

Conviene respetar las correctas prácticas en relación con<br />

la toma de muestra y de transporte.


Medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> (SM2) 12044 E - es - 2007/09<br />

Utilización en bacteriología alimentaria:<br />

Seguir las recomendaciones de las normas en vigor para<br />

la realización de la recogida de muestras y la preparación<br />

de las mismas.<br />

TECNICA<br />

Utilización en bacteriología clínica :<br />

La detección de <strong>Salmonella</strong> gracias al medio chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong> puede hacerse siguiendo el esquema habitual<br />

del coprocultivo:<br />

1. Dejar que las placas alcancen la temperatura<br />

ambiente.<br />

2. Inocular el medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> directamente<br />

a partir de muestras o después de enriquecimiento en<br />

caldo Rappaport o Selenite F.<br />

3. Incubar en la estufa, con la tapa hacia abajo, a 37°C<br />

en aerobiosis. La selección de la temperatura de<br />

incubación es responsabilidad del usuario en función<br />

de la aplicación y de las normas en vigor. Los cultivos<br />

se examinan después de 18 a 24 horas de incubación.<br />

En ciertos casos, puede ser necesario prolongar la<br />

incubación.<br />

Utilización en bacteriología alimentaria :<br />

Este medio está conforme con la adaptación simplificada<br />

del protocolo normalizado NF EN ISO 6579 (8) y NF V 08-<br />

052 (7) para la detección de <strong>Salmonella</strong> en productos<br />

alimentarios.<br />

Según la norma NF EN ISO 6579 (8), el aislamiento en<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> se realiza paralelamente con un<br />

medio XLD después de pre-enriquecimiento en agua<br />

peptonada tamponada seguido de un enriquecimiento en<br />

caldos Rappaport-Vassiliadis Soja y Muller-Kauffmann<br />

con tetrationato y novobiocina.<br />

1. Dejar que las placas alcancen la temperatura<br />

ambiente.<br />

2. Inocular cada uno de los 2 caldos de enriquecimiento<br />

en 2 placas distintas.<br />

3. Incubar en estufa, con la tapa hacia abajo, entre 35 y<br />

37°C en aerobiosis.<br />

Los cultivos se examinan generalmente después de<br />

18 a 24 horas de incubación.<br />

El medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> es igualmente compatible<br />

con la utilización de la determinación VIDAS Immuno-<br />

Concentration <strong>Salmonella</strong> (VIDAS ® ICS).<br />

LECTURA E INTERPRETACION<br />

• Después de incubar, observar el crecimiento bacteriano.<br />

• Observar la presencia de colonias características de<br />

<strong>Salmonella</strong>: colonias de rosa pálido a malva.<br />

• La identificación del o de los microorganismos aislados<br />

debe continuarse por pruebas bioquímicas y/o<br />

inmunológicas (6).<br />

CONTROL DE CALIDAD<br />

Protocolo :<br />

La fertilidad del medio puede ser analizada frente a la<br />

siguiente cepa:<br />

• <strong>Salmonella</strong> Typhimurium ATCC ® 14028<br />

bioMérieux ® SA Español - 2<br />

Resultados esperados :<br />

Cepa Resultados a 33-37°C<br />

<strong>Salmonella</strong> Typhimurium<br />

ATCC ® Crecimiento en Colonias<br />

14028<br />

24 horas rosas a<br />

malva<br />

Advertencia :<br />

Es responsabilidad del usuario tener en cuenta la<br />

naturaleza de la aplicación y la legislación local en vigor<br />

para poner en marcha el control de calidad (frecuencia,<br />

número de cepas, temperatura de incubación…).<br />

LIMITES DE LA PRUEBA<br />

• Durante el crecimiento de algunos microorganismos,<br />

pueden observarse precipitados blancos. Estos<br />

precipitados no presentan el aspecto característico de<br />

las colonias de <strong>Salmonella</strong>.<br />

• Algunos serotipos de <strong>Salmonella</strong> (en particular<br />

<strong>Salmonella</strong> dublin, <strong>Salmonella</strong> abortusovis, <strong>Salmonella</strong><br />

gallinarum) pueden presentar un color débil o más<br />

tardío.<br />

• Algunos bacilos Gram (-) distintos a <strong>Salmonella</strong> pueden<br />

presentar colonias características. Es por tanto<br />

necesario realizar una identificación completa por<br />

pruebas complementarias.<br />

• Algunas heces pueden contener esterasas libres<br />

susceptibles de provocar la aparición de un color rosa a<br />

malva en el punto de inoculación.<br />

• Según la sensibilidad de las cepas a los agentes<br />

selectivos, algunas bacterias Gram (+) o algunas<br />

levaduras pueden desarrollarse en este medio.<br />

• El desarrollo está en función de las exigencias propias<br />

para cada microorganismo. Es por tanto posible que<br />

algunas cepas de <strong>Salmonella</strong> con exigencias<br />

específicas no se desarrollen.<br />

• En función de las muestras analizadas, se recomienda<br />

asociar el medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> con medios<br />

complementarios destinados a los coprocultivos (por<br />

ejemplo medio Campylosel, Yersinia, Clostridium<br />

difficile…).<br />

• En microbiología alimentaria, se recomienda asociar el<br />

medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> con un de los medios<br />

recomendados por la norma de referencia.<br />

• El medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> ha sido evaluado con<br />

las principales matrices alimentarias y con un gran<br />

número de cepas bacterianas. Dada la diversidad de los<br />

productos alimentarios, los procesos de fabricación y de<br />

la flora microbiana, puede ser necesario verificar si el<br />

medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> se adapta<br />

específicamente a los productos a analizar.<br />

PRESTACIONES TECNICAS<br />

Validación con las muestras:<br />

El medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> ha sido comparado con el<br />

medio SM ® ID y con otro medio cromogénico.<br />

260 muestras de origen humano (heces y escobillones<br />

rectales) han sido analizadas:<br />

• 231 muestras contaminadas naturalmente<br />

contaminadas o sin contaminar con <strong>Salmonella</strong>).<br />

• 29 heces negativas artificialmente contaminadas con<br />

<strong>Salmonella</strong>.


Medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> (SM2) 12044 E - es - 2007/09<br />

Las muestras de heces han sido inoculadas directamente<br />

en los medios y después enriquecidas en caldo<br />

Selenite F.<br />

Las muestras rectales han sido inoculadas únicamente<br />

después de enriquecimiento en caldo Selenite F.<br />

Las prestaciones han sido evaluadas después de<br />

48 horas de incubación a 37°C.<br />

Fertilidad y sensibilidad de detección de <strong>Salmonella</strong><br />

Entre las 260 muestras estudiadas, 40 han presentado<br />

cultivos positivos en salmonelas al menos en uno de los 3<br />

medios (identificación confirmada).<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

SM ® ID Otro medio<br />

Sensibilidad de<br />

detección de<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

39/40<br />

(98%)<br />

36/40<br />

(90%)<br />

28/40<br />

(70%)<br />

Especificidad del color<br />

Entre las colonias características observadas en cada<br />

uno de los medios, la proporción de las colonias<br />

confirmadas <strong>Salmonella</strong> es la siguiente:<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

SM ® ID Otro medio<br />

Especificidad del<br />

color<br />

39/42<br />

(93 %)<br />

36/50<br />

(72 %)<br />

28/29<br />

(97 %)<br />

Detección de las cepas de <strong>Salmonella</strong> lactosa (+):<br />

El medio chromID TM <strong>Salmonella</strong> ha sido comparado con<br />

el medio SM ® ID.<br />

Fueron realizados 9 cultivos puros de <strong>Salmonella</strong><br />

Lactosa (+). 7 cepas han presentado colonias<br />

características en el medio chromID TM <strong>Salmonella</strong><br />

mientras que en el medio SM ® ID ninguna fue<br />

característica.<br />

ELIMINACION DE RESIDUOS<br />

Eliminar los reactivos utilizados y no utilizados, así como<br />

los materiales de un solo uso contaminados siguiendo los<br />

procedimientos relacionados con los productos<br />

infecciosos o potencialmente infecciosos.<br />

Es responsabilidad de cada laboratorio gestionar los<br />

residuos y efluentes que produzca según su naturaleza y<br />

su peligrosidad, garantizando (o haciendo garantizar) el<br />

tratamiento y eliminación según las reglamentaciones<br />

aplicables.<br />

<strong>REF</strong>ERENCIAS BIBLIOGRAFICAS<br />

1. AGBAN A., OUNANIAN M., LUU-DUC C. et al. – Synthèse<br />

de substrats indigogéniques. Mise en évidence de l’activité<br />

estérasique des <strong>Salmonella</strong>. – Eur. J. Med. Chem., 1990, vol.<br />

25, p. 697-699.<br />

ATCC es una marca utilizada, depositada y/o registrada perteneciente a American Type Culture Collection.<br />

CLSI es una marca utilizada, depositada y/o registrada perteneciente a Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.<br />

bioMérieux ® SA<br />

au capital de 12 029 370 €<br />

673 620 399 RCS LYON<br />

2. DELORME S., SENTA-LOYS A., SAUVONNET V. et al. –<br />

SM ID 2, a new chromogenic medium for isolation, detection<br />

and presomptive identification of <strong>Salmonella</strong>: comparison<br />

with SM ID, Hektoen and four commercially available<br />

chromogenic media. – Poster 933, Glasgow 2003, 13 th<br />

ECCMID.<br />

3. MANAFI M., WILLINGER B. – Comparison of three rapid<br />

methods for identification of <strong>Salmonella</strong> spp. – Lett. Appl.<br />

Microbiol., 1994, vol. 19, p. 328-331.<br />

4. PIGNATO S., GIAMMANCO G., GIAMMANCO G. –<br />

Rambach agar and SM-ID medium sensitivity for presumptive<br />

identification of <strong>Salmonella</strong> subspecies I-VI. – J. Med.<br />

Microbiol., 1995, vol. <strong>43</strong> , p. 68-71.<br />

5. RUIZ J., NUMEZ M.L., DIAZ J et al. – Comparison of five<br />

plating media for isolation of <strong>Salmonella</strong> species from human<br />

stools. – J. Clin. Microbiol., 1996, vol. 34, p. 686-688.<br />

6. SENTA-LOYS A., SAUVONNET V., ROGER-DALBERT C. –<br />

Impact of SM ID 2, a new chromogenic medium, on<br />

identification and susceptibility results. – Poster n° 642, Paris<br />

2003, 23 rd RICAI.<br />

7. Microbiologie des aliments. - Recherche des <strong>Salmonella</strong>.<br />

Méthode de routine. - NF V 08-052 - Mai 97 – AFNOR –<br />

ISSN 0335-3931.<br />

8. Microbiologie des aliments. Directives générales pour la<br />

recherche des <strong>Salmonella</strong>. – NF EN ISO 6579, Décembre<br />

2002, ISSN 0335-3931.<br />

TABLA DE SIMBOLOS<br />

Símbolo Significado<br />

o <strong>REF</strong><br />

Número de catálogo<br />

69280 Marcy-l'Etoile / France<br />

Tél. 33 (0)4 78 87 20 00<br />

Fax 33 (0)4 78 87 20 90<br />

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Producto sanitario para diagnóstico<br />

in vitro<br />

Fabricante<br />

Limite de temperatura<br />

Fecha de caducidad<br />

Codigo de lote<br />

Consulte las instrucciones de uso<br />

Contenido suficiente para <br />

ensayos<br />

Conservar protegido de la luz<br />

Impreso en Francia<br />

bioMérieux, el logo azul y VIDAS y SM y chromID son marcas utilizadas, depositadas y/o registradas pertenecientes a<br />

bioMérieux SA o a cada una de sus filiales.


<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> / <strong>43</strong> <strong>629</strong> 12044 E - it - 2007/09<br />

Agar chromID <strong>Salmonella</strong> (SM2)<br />

Terreno cromogeno per l’isolamento selettivo e la differenziazione del genere <strong>Salmonella</strong><br />

Agar chromID TM <strong>Salmonella</strong> è il nuovo nome dell’Agar SM ® ID 2.<br />

INTRODUZIONE E OBIETTIVO DEL TEST<br />

L’agar chromID TM <strong>Salmonella</strong> è un terreno per<br />

l’isolamento selettivo e la differenziazione destinato alla<br />

ricerca delle <strong>Salmonella</strong> a partire da campioni clinici (feci,<br />

prelievi rettali) e da prodotti alimentari secondo le norme<br />

NF EN ISO 6579 (8) e NF V 08-052 (7).<br />

L’agar chromID TM <strong>Salmonella</strong> si basa su un principio<br />

diverso da quello dell’agar SM ID (Cod. <strong>43</strong> 291). Permette<br />

in più la ricerca delle <strong>Salmonella</strong> lattosio (+) ed ha una<br />

maggior specificità di colorazione.<br />

PRINCIPIO<br />

L’agar chromID TM <strong>Salmonella</strong>, costituito da una base<br />

nutritiva che associa diversi peptoni e 3 substrati<br />

cromogeni, permette :<br />

• la crescita di tutte le <strong>Salmonella</strong>.<br />

• la rivelazione delle attività enzimatiche corrispondenti.<br />

La differenziazione delle <strong>Salmonella</strong>, comprese le<br />

<strong>Salmonella</strong> lattosio (+), si basa sul principio seguente :<br />

colorazione spontanea dal rosa pallido al malva delle<br />

colonie produttrici di esterasi.<br />

Gli altri ceppi batterici sviluppano colonie di colori<br />

differenti.<br />

La miscela selettiva permette di inibire la maggior parte<br />

dei batteri Gram (+) e dei lieviti.<br />

PRESENTAZIONE<br />

Terreni pronti per l’uso<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> Confezione da 2 x 10 piastre (90 mm)<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>629</strong> Confezione da 10 x 10 piastre (90 mm)<br />

SM2 *<br />

* codice stampato su ogni piastra<br />

COMPOSIZIONE<br />

Formula teorica .<br />

Questo terreno può essere aggiustato e/o addizionato in funzione<br />

dei criteri di performance richiesti:<br />

Peptoni (bovini o suini) ...................................................................6,25 g<br />

Tris .................................................................................................0,16 g<br />

Lattosio (bovino) ..................................................................................6 g<br />

Sali biliari (bovini o ovini) ..................................................................1,5 g<br />

Miscela cromogena.........................................................................9,63 g<br />

NaCl ....................................................................................................5 g<br />

Miscela selettiva .............................................................................0,03 g<br />

Agar...................................................................................................14 g<br />

Acqua purificata....................................................................................1 l<br />

pH 7,3<br />

MATERIALE NECESSARIO MA NON FORNITO<br />

• Termostato.<br />

bioMérieux ® SA Italiano - 1<br />

IVD<br />

REATTIVI COMPLEMENTARI<br />

• Brodo Selenite F (Cod. 42 099).<br />

• Brodo Rappaport (Cod. 42 091).<br />

• Brodo Rappaport-Vassiliadis (Cod. 42 0<strong>43</strong>).<br />

• Brodo Selenite Cistina (Cod. 42 052).<br />

• Brodo Rappaport-Vassiliadis Soia (Cod. 42 110).<br />

• Brodo Muller-Kauffmann con tetrationato e novobiocina<br />

(Cod. 42 114).<br />

• VIDAS ® ICS (Cod. 30 <strong>43</strong>5)<br />

AVVERTENZE E PRECAUZIONI<br />

• Per diagnostica in vitro e per controllo<br />

microbiologico.<br />

• Esclusivamente per uso professionale.<br />

• Questa confezione contiene dei componenti di origine<br />

animale. Poiché i controlli sull’origine e/o sullo stato<br />

sanitario degli animali non possono garantire in maniera<br />

assoluta che questi prodotti non contengano nessun<br />

agente patogeno trasmissibile, si raccomanda di<br />

manipolarli con le precauzioni d’uso relative ai prodotti<br />

potenzialmente infettivi (non ingerire, non inalare).<br />

• I campioni, le colture batteriche ed i prodotti seminati<br />

devono essere considerati come potenzialmente infettivi<br />

e devono essere manipolati in maniera appropriata. Le<br />

tecniche di asepsi e le precauzioni d’uso per il gruppo<br />

batterico studiato devono essere rispettate durante tutta<br />

la manipolazione; fare riferimento a "CLSI ® M29-A,<br />

Protection of Laboratory Workers From occupationally<br />

Acquired Infections; Approved Guideline - Revisione in<br />

vigore". Per ulteriori informazioni sulle precauzioni di<br />

manipolazione, consultare "Biosafety in Microbiological<br />

and Biomedical Laboratories – CDC/NIH - Ultima<br />

edizione", oppure fare riferimento alla normativa vigente<br />

nel Paese.<br />

• I terreni di coltura non devono essere utilizzati come<br />

materiale o componenti di fabbricazione.<br />

• Non utilizzare i reattivi dopo la data di scadenza.<br />

• Non utilizzare i reattivi il cui imballaggio sia deteriorato.<br />

• Non utilizzare piastre contaminate o trasudanti umidità.<br />

• L’interpretazione dei risultati del test deve essere fatta<br />

tenendo conto del contesto clinico, dell’origine del<br />

prelievo, degli aspetti macro e microscopici e,<br />

eventualmente, dei risultati di altri test.<br />

• L’utilizzazione del terreno potrebbe essere difficoltosa<br />

per persone con problemi nella percezione dei colori.<br />

• Le performance riportate di seguito sono state ottenute<br />

seguendo il procedimento indicato in questa scheda<br />

tecnica. Qualsiasi deviazione dal procedimento indicato<br />

può alterare i risultati.<br />

CONDIZIONI DI CONSERVAZIONE<br />

• Le piastre si conservano a 2-8°C, nella loro<br />

confezione, fino alla data di scadenza.<br />

• Fuori della confezione di cartone, le piastre si<br />

conservano 2 settimane a 2-8°C nel loro sacchetto di<br />

cellophane.<br />

• Conservare al riparo dalla luce.


Agar chromID <strong>Salmonella</strong> (SM2) 12044 E - it - 2007/09<br />

CAMPIONI<br />

Impiego in batteriologia clinica :<br />

Il terreno viene inoculato direttamente con feci (liquide o<br />

con una sospensione delle feci in soluzione fisiologica<br />

sterile), con i prelievi rettali o dopo un arricchimento in<br />

brodo.<br />

Per il prelievo ed il trasporto dei campioni si devono<br />

rispettare le norme di buona pratica di laboratorio.<br />

Impiego in batteriologia alimentare :<br />

Seguire le raccomandazioni delle norme vigenti per<br />

l’esecuzione dei prelievi e la preparazione dei campioni.<br />

PROCEDIMENTO<br />

Impiego in batteriologia clinica :<br />

La ricerca delle <strong>Salmonella</strong> con l’agar chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong> può essere eseguita secondo lo schema<br />

abituale delle coprocolture :<br />

1. Riportare le piastre a temperatura ambiente.<br />

2. I campioni vanno seminati sull’agar chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong> direttamente o dopo un arricchimento in<br />

brodo Rappaport od in brodo Selenite F.<br />

3. Incubare la piastra in termostato, a 37°C, in aerobiosi.<br />

La scelta della temperatura di incubazione è<br />

responsabilità dell’operatore in funzione dell’uso e in<br />

accordo con le norme vigenti. Le colture vanno<br />

esaminate dopo 18-24 ore di incubazione. In alcuni<br />

casi può essere necessario prolungare l’incubazione.<br />

Impiego in batteriologia alimentare :<br />

Questo terreno è adatto all’applicazione semplificata del<br />

protocollo normalizzato NF EN ISO 6579 (8) e<br />

NF V 08-052 (7) per la ricerca delle <strong>Salmonella</strong> nei<br />

prodotti alimentari.<br />

Secondo la norma NF EN ISO 6579 (8), l’isolamento<br />

sull’agar chromID TM <strong>Salmonella</strong> viene eseguito in parallelo<br />

all’agar XLD dopo un pre-arricchimento in acqua<br />

peptonata ed un arricchimento nei brodi Rappaport-<br />

Vassiliadis Soia e Muller-Kauffmann con tetrationato e<br />

novobiocina.<br />

1. Riportare le piastre a temperatura ambiente.<br />

2. Seminare ciascuno dei due brodi di arricchimento in 2<br />

piastre distinte.<br />

3. Incubare le piastre in termostato, a 35-37°C in<br />

aerobiosi, con il coperchio rivolto verso il basso.<br />

Le colture vengono generalmente esaminate dopo<br />

18-24 ore di incubazione.<br />

L’agar chromID TM <strong>Salmonella</strong> è compatibile anche con<br />

l’uso del test VIDAS Immuno-Concentration <strong>Salmonella</strong><br />

(VIDAS ® ICS).<br />

LETTURA E INTERPRETAZIONE<br />

• Dopo l’incubazione, osservare la crescita batterica.<br />

• Annotare la presenza di colonie caratteristiche di<br />

<strong>Salmonella</strong>: colonie dal rosa pallido al malva.<br />

• L’identificazione del/dei microrganismo/i isolato/i<br />

deve/ono essere eseguita utilizzando test biochimici e/o<br />

immunologici (6).<br />

bioMérieux ® SA Italiano - 2<br />

CONTROLLO DI QUALITÀ<br />

Protocollo :<br />

La fertilità del terreno può essere saggiata nei confronti<br />

del seguente ceppo :<br />

• <strong>Salmonella</strong> Typhimurium ATCC ® Risultati attesi :<br />

14028<br />

Ceppo Risultati a 33-37°C<br />

<strong>Salmonella</strong> Typhimurium<br />

ATCC ® Crescita in Colonie da<br />

14028<br />

24 ore rosa a malva<br />

Nota:<br />

E’ responsabilità dell’utilizzatore tenere conto della natura<br />

dell’applicazione ed assicurarsi che il controllo di qualità<br />

corrisponda a quanto previsto dalla legislazione locale<br />

vigente (frequenza, numero di ceppi, temperatura<br />

d’incubazione...).<br />

LIMITI DEL METODO<br />

• Durante la crescita di alcuni microrganismi, si possono<br />

osservare dei precipitati bianchi. Questi precipitati non<br />

hanno l’aspetto caratteristico delle colonie di<br />

<strong>Salmonella</strong>.<br />

• Alcuni sierotipi di <strong>Salmonella</strong> (in particolare <strong>Salmonella</strong><br />

Dublin, <strong>Salmonella</strong> Abortusovis, <strong>Salmonella</strong> Gallinarum)<br />

possono presentare una colorazione debole o tardiva.<br />

• Alcuni bacilli Gram (-) diversi dalle <strong>Salmonella</strong> possono<br />

sviluppare delle colonie caratteristiche. E’ dunque<br />

necessario eseguire una colorazione completa con test<br />

complementari.<br />

• Alcuni campioni fecali possono contenere delle esterasi<br />

libere, che potrebbero provocare la comparsa di una<br />

colorazione dal rosa al malva nel punto di inoculo.<br />

• A seconda della sensibilità dei ceppi agli agenti selettivi,<br />

certi batteri Gram (+) o alcuni lieviti possono svilupparsi<br />

su questo terreno.<br />

• La crescita dipende dalle esigenze particolari di ciascun<br />

microrganismo. E’ quindi possibile che alcuni ceppi di<br />

<strong>Salmonella</strong> con specifiche esigenze non siano in grado<br />

di svilupparsi.<br />

• In base ai campioni analizzati, si raccomanda di usare<br />

l’agar chromID TM <strong>Salmonella</strong> in associazione a terreni<br />

complementari destinati alle coprocolture (per esempio<br />

gli agar Campylosel, Yersinia, Clostridium difficile …).<br />

• In batteriologia alimentare, è raccomandato di associare<br />

all’agar chromID TM <strong>Salmonella</strong> uni dei terreni<br />

raccomandati dalla norma di riferimento.<br />

• L’agar chromID TM <strong>Salmonella</strong> è stato valutato sulle<br />

principali matrici alimentari e su un gran numero di ceppi<br />

batterici. Data la grande variabilità dei prodotti<br />

alimentari, dei processi di lavorazione e della flora<br />

microbica, potrebbe essere necessario verificare che<br />

l’agar chromID TM <strong>Salmonella</strong> sia realmente idoneo alla<br />

specifica applicazione.<br />

PERFORMANCE<br />

Validazione eseguita utilizzando prelievi :<br />

L’agar chromID TM <strong>Salmonella</strong> è stato comparato all’agar<br />

SM ® ID e ad un altro terreno cromogeno.<br />

Sono stati analizzati 260 prelievi di origine umana (feci e<br />

tamponi rettali) tra cui :<br />

• 231 naturalmente contaminati o non contaminati da<br />

salmonelle.<br />

• 29 campioni di feci negative artificialmente contaminate<br />

con salmonelle.


Agar chromID <strong>Salmonella</strong> (SM2) 12044 E - it - 2007/09<br />

I campioni fecali sono stati seminati sui terreni<br />

direttamente e dopo arricchimento in brodo Selenite F.<br />

I tamponi rettali sono stati seminati solo dopo<br />

arricchimento in brodo Selenite F.<br />

Le performance sono state valutate dopo 24 ore di<br />

incubazione a 37°C.<br />

Fertilità e sensibilità di rivelazione delle <strong>Salmonella</strong><br />

Tra i 260 prelievi studiati, 40 hanno presentate delle<br />

colture positive per le <strong>Salmonella</strong> su almeno 1 dei 3<br />

terreni (identificazione confermata).<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

SM ® ID Altro terreno<br />

Sensibilità di<br />

rivelazione delle<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

39/40<br />

(98%)<br />

36/40<br />

(90%)<br />

28/40<br />

(70%)<br />

Specificità della colorazione<br />

Tra le colonie caratteristiche osservate su ciascuno dei<br />

terreni, la proporzione delle colonie confermate come<br />

<strong>Salmonella</strong> è la seguente :<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

SM ® ID Altro terreno<br />

Specificità della<br />

colorazione<br />

39/42<br />

(93 %)<br />

36/50<br />

(72 %)<br />

28/29<br />

(97 %)<br />

Ricerca dei ceppi di <strong>Salmonella</strong> lattosio (+) :<br />

L’agar chromID TM <strong>Salmonella</strong> è stato comparato all’agar<br />

SM ® ID.<br />

Sono state preparate 9 colture pure di <strong>Salmonella</strong> Lattosio<br />

(+). 7 ceppi hanno sviluppato sull’agar chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong> delle colonie caratteristiche, mentre nessuna<br />

colonia cresciuta sull’agar SM ® ID era caratteristica.<br />

SMALTIMENTO DEI RIFIUTI<br />

Smaltire i reattivi utilizzati o non utilizzati ed i materiali<br />

monouso contaminati seguendo le procedure relative ai<br />

prodotti infettivi o potenzialmente infettivi.<br />

E’ responsabilità di ogni laboratorio gestire i rifiuti e gli<br />

effluenti prodotti a seconda della loro natura e della loro<br />

pericolosità ed assicurarne (o farne assicurare) il<br />

trattamento e lo smaltimento conformemente alla<br />

legislazione vigente.<br />

RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI<br />

1. AGBAN A., OUNANIAN M., LUU-DUC C. et al. – Synthèse<br />

de substrats indigogéniques. Mise en évidence de l’activité<br />

estérasique des <strong>Salmonella</strong>. – Eur. J. Med. Chem., 1990, vol.<br />

25, p. 697-699.<br />

2. DELORME S., SENTA-LOYS A., SAUVONNET V. et al. –<br />

SM ID 2, a new chromogenic medium for isolation, detection<br />

and presomptive identification of <strong>Salmonella</strong>: comparison<br />

with SM ID, Hektoen and four commercially available<br />

chromogenic media. – Poster 933, Glasgow 2003, 13 th<br />

ECCMID.<br />

ATCC è un marchio utilizzato, depositato e/o registrato di proprietà di American Type Culture Collection.<br />

CLSI è un marchio utilizzato, depositato e/o registrato di proprietà di Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.<br />

bioMérieux ® SA<br />

au capital de 12 029 370 €<br />

673 620 399 RCS LYON<br />

3. MANAFI M., WILLINGER B. – Comparison of three rapid<br />

methods for identification of <strong>Salmonella</strong> spp. – Lett. Appl.<br />

Microbiol., 1994, vol. 19, p. 328-331.<br />

4. PIGNATO S., GIAMMANCO G., GIAMMANCO G. –<br />

Rambach agar and SM-ID medium sensitivity for presumptive<br />

identification of <strong>Salmonella</strong> subspecies I-VI. – J. Med.<br />

Microbiol., 1995, vol. <strong>43</strong> , p. 68-71.<br />

5. RUIZ J., NUMEZ M.L., DIAZ J et al. – Comparison of five<br />

plating media for isolation of <strong>Salmonella</strong> species from human<br />

stools. – J. Clin. Microbiol., 1996, vol. 34, p. 686-688.<br />

6. SENTA-LOYS A., SAUVONNET V., ROGER-DALBERT C. –<br />

Impact of SM ID 2, a new chromogenic medium, on<br />

identification and susceptibility results. – Poster n° 642, Paris<br />

2003, 23 rd RICAI.<br />

7. Microbiologie des aliments. - Recherche des <strong>Salmonella</strong>.<br />

Méthode de routine. - NF V 08-052 - Mai 97 – AFNOR –<br />

ISSN 0335-3931.<br />

8. Microbiologie des aliments. Directives générales pour la<br />

recherche des <strong>Salmonella</strong>. – NF EN ISO 6579, Décembre<br />

2002, ISSN 0335-3931.<br />

TABELLA DEI SIMBOLI<br />

Simbolo Significato<br />

o <strong>REF</strong><br />

Numero di catalogo<br />

69280 Marcy-l'Etoile / France<br />

Tél. 33 (0)4 78 87 20 00<br />

Fax 33 (0)4 78 87 20 90<br />

http://www.biomerieux.com<br />

Dispositivo medico-diagnostico in<br />

vitro<br />

Fabbricante<br />

Limiti di temperatura<br />

Utilizzare entro<br />

Codice del lotto<br />

Consultare le istruzioni per l'uso<br />

Contenuto sufficiente per "n" saggi<br />

Conservare al riparo della luce<br />

Stampato in Francia<br />

bioMérieux, il logo blu e VIDAS e SM e chromID sono marchi utilizzati, depositati e/o registrati di proprietà di bioMérieux<br />

SA o di una delle sue filiali.


<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> / <strong>43</strong> <strong>629</strong> 12044 E - pt - 2007/09<br />

Gelose chromID <strong>Salmonella</strong> (SM2)<br />

Meio cromogénico para o isolamento selectivo e a diferenciação do género <strong>Salmonella</strong><br />

Gelose chromID <strong>Salmonella</strong> é a nova denominação da gelose SM ® ID 2.<br />

INTRODUÇÃO E OBJECTIVO DO TESTE<br />

A gelose chromID TM <strong>Salmonella</strong> é um meio de isolamento<br />

selectivo e de diferenciação destinado à pesquisa das<br />

<strong>Salmonella</strong> a partir de colheitas/coletas de origem<br />

humana (fezes, colheitas/coletas rectais) e de produtos<br />

alimentares de acordo com as normas NF EN ISO 6579<br />

(8) e NF V 08-052 (7).<br />

A gelose chromID TM <strong>Salmonella</strong> baseia-se num princípio<br />

de detecção diferente do da gelose SM ® ID (Ref. <strong>43</strong> 291).<br />

Também permite a pesquisa das <strong>Salmonella</strong> lactose (+) e<br />

tem uma especificidade de coloração superior.<br />

PRINCÍPIO<br />

A gelose chromID TM <strong>Salmonella</strong> é constituída por uma<br />

base nutritiva associando diferentes peptonas e 3<br />

substratos cromogénicos que permitem :<br />

• o crescimento do conjunto das <strong>Salmonella</strong>.<br />

• a revelação das actividades enzimáticas<br />

correspondentes.<br />

A diferenciação das <strong>Salmonella</strong>, incluindo <strong>Salmonella</strong><br />

lactose (+), baseia-se no princípio seguinte : coloração<br />

espontânea rosa pálido a roxo das colónias produtoras de<br />

esterase.<br />

As outras estirpes/cepas bacterianas desenvolvem<br />

colónias de cores diferentes.<br />

A mistura selectiva permite inibir a maior parte das<br />

bactérias Gram (+) e das leveduras.<br />

APRESENTAÇÃO<br />

Meios prontos a usar<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> Embalagem de 2 x 10 placas (90 mm)<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>629</strong> Embalagem de 10 x 10 placas (90 mm)<br />

SM2 *<br />

* impresso em cada placa<br />

COMPOSIÇÃO<br />

Fórmula teórica .<br />

Este meio pode ser ajustado e/ou suplementado em função dos<br />

critérios de qualidade impostos:<br />

Peptonas (porcino ou bovino) .........................................................6,25 g<br />

Tris .................................................................................................0,16 g<br />

Lactose (bovino) ..................................................................................6 g<br />

Sais biliares (bovino ou ovino) ..........................................................1,5 g<br />

Mistura cromogénica ......................................................................9,63 g<br />

NaCl ....................................................................................................5 g<br />

Mistura selectiva.............................................................................0,03 g<br />

Agar...................................................................................................14 g<br />

Água destilada……………………………………………………….. .........1 l<br />

pH 7,3<br />

MATERIAL NECESSÁRIO MAS NÃO FORNECIDO<br />

• Estufa bacteriológica.<br />

bioMérieux ® SA Português - 1<br />

IVD<br />

REAGENTES SUPLEMENTARES<br />

• Caldo Selenito F (Ref. 42 099).<br />

• Caldo Rappaport (Ref. 42 091).<br />

• Caldo Rappaport-Vassiliadis (Ref. 42 0<strong>43</strong>).<br />

• Caldo Selenito Cistina (Ref. 42 052).<br />

• Caldo Rappaport-Vassiliadis Soja (Ref. 42 110).<br />

• Caldo Muller-Kauffmann com tetrationato e novobiocina<br />

(Ref. 42 114).<br />

• VIDAS ® ICS (Ref. 30 <strong>43</strong>5)<br />

PRECAUÇÕES DE UTILIZAÇÃO<br />

• Para diagnóstico in vitro e para controlo<br />

microbiológico<br />

• Unicamente para uso profissional<br />

• Este dispositivo contém componentes de origem animal.<br />

O controlo da origem e/ou do estado sanitário dos<br />

animais não pode garantir de maneira absoluta que<br />

estes produtos não contenham nenhum agente<br />

patogénico transmissível, é recomendado manipulá-los<br />

com as precauções de utilização relativas aos produtos<br />

potencialmente infecciosos (não ingerir; não inalar).<br />

• As amostras, culturas bacterianas e produtos semeados<br />

devem ser considerados potencialmente infecciosos e<br />

manipulados de maneira apropriada. As técnicas<br />

assépticas e as precauções habituais de manipulação<br />

para o grupo bacteriano estudado devem ser<br />

respeitadas durante toda a manipulação; consultar o<br />

"CLSI ® M29-A, Protection of Laboratory Workers from<br />

Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline<br />

– Última edição". Para informações complementares<br />

sobre as precauções de manipulação, consultar o<br />

"Biosafety in Microbiological and Biomedical<br />

Laboratories – CDC/NIH – Última edição", ou a<br />

regulamentação em vigor no país de utilização.<br />

• Os meios de cultura não devem ser utilizados como<br />

materiais ou componentes de fabrico.<br />

• Não utilizar os reagentes após a data de validade.<br />

• Não utilizar os reagentes se a embalagem estiver<br />

danificada.<br />

• Não utilizar placas contaminadas ou desidratadas.<br />

• A interpretação dos resultados do teste deve ser<br />

efectuada tendo em conta o contexto clínico, a origem<br />

da amostra, os aspectos macro e microscópicos, e<br />

eventualmente, os resultados de outros testes.<br />

• A utilização do meio pode ser delicada para pessoas<br />

com dificuldades de diferenciação das cores.<br />

• A interpretação dos resultados do teste deve ser<br />

efectuada tendo em conta o contexto clínico, a origem<br />

da amostra, os aspectos macro e microscópicos, e<br />

eventualmente, os resultados de outros testes.<br />

CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO<br />

• As placas conservam-se entre 2°C e 8°C na sua<br />

embalagem até à data de validade.<br />

• O prazo de conservação das placas fora da<br />

embalagem, em saqueta/sachet de celofane, é de 2<br />

semanas a 2º - 8° C.<br />

• Conservar ao abrigo da luz.


Gelose chromID <strong>Salmonella</strong> (SM2) 12044 E - pt - 2007/09<br />

AMOSTRAS<br />

Utilização em bacteriologia médica:<br />

O meio é semeado directamente a partir de fezes<br />

(líquidas ou em suspensão em água fisiológica estéril), de<br />

colheitas/coletas rectais ou de um caldo de<br />

enriquecimento.<br />

É conveniente respeitar as boas práticas em termos de<br />

colheitas/coletas e de transporte.<br />

Utilização em bacteriologia alimentar:<br />

Seguir as recomendações das normas em vigor para<br />

efectuar colheitas/coletas e a preparação das amostras.<br />

PROCEDIMENTO<br />

Utilização em bacteriologia clínica:<br />

A pesquisa de <strong>Salmonella</strong> com a gelose chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong> pode ser feita de acordo com o esquema<br />

habitual da coprocultura :<br />

1. Deixar as placas voltar à temperatura ambiente.<br />

2. Semear a gelose chromID TM <strong>Salmonella</strong> directamente<br />

a partir das amostras ou após enriquecimento em<br />

caldo Rappaport ou Selenite F.<br />

3. Incubar na estufa, tampa para baixo, a 37°C em<br />

aerobiose. A escolha da temperatura de incubação é<br />

da responsabilidade do utilizador em função da<br />

aplicação e das normas em vigor. As culturas são<br />

examinadas após 18 a 24 horas de incubação. Em<br />

alguns casos, pode ser necessário prolongar a<br />

incubação.<br />

Utilização em bacteriologia alimentar :<br />

Este meio é adaptado à aplicação simplificada do<br />

protocolo normalizado NF EN ISO 6579 (8) e<br />

NF V 08-052 (7) para a pesquisa das <strong>Salmonella</strong> nos<br />

produtos<br />

alimentares.<br />

De acordo com a norma NF EN ISO 6579 (8), o<br />

isolamento em chromID TM <strong>Salmonella</strong> é efectuado em<br />

paralelo com uma gelose XLD após enriquecimento em<br />

água peptonada tamponada e enriquecimento em caldos<br />

Rappaport-Vassiliadis Soja e Muller-Kauffmann com<br />

tetrationato e novobiocina.<br />

1. Deixar as placas voltar à temperatura ambiente.<br />

2. Semear cada um dos 2 caldos de enriquecimento em<br />

2 placas distintas.<br />

3. Incubar na estufa, com a tampa para baixo, entre 35º<br />

e 37° C em aerobiose.<br />

As culturas são examinadas geralmente após 18 a 24<br />

horas de incubação.<br />

A gelose chromID TM <strong>Salmonella</strong> é igualmente compatível<br />

com a utilização do teste VIDAS Immuno-Concentration<br />

<strong>Salmonella</strong> (VIDAS ® ICS).<br />

LEITURA E INTERPRETAÇÃO<br />

• Após incubação, observar o crescimento bacteriano.<br />

• Anotar a presença de colónias características de<br />

<strong>Salmonella</strong> : colónias rosa pálido a roxo.<br />

• A identificação do ou dos microrganismos isolados deve<br />

ser seguida por testes bioquímicos e/ou imunológicos<br />

(6).<br />

bioMérieux ® SA Português - 2<br />

CONTROLO DE QUALIDADE<br />

Protocolo :<br />

A fertilidade do meio pode ser testada em relação à<br />

seguinte estirpe/cepa :<br />

• <strong>Salmonella</strong> Typhimurium ATCC ® Resultados esperados :<br />

14028<br />

Estirpe/cepa Resultados a 33º - 37° C<br />

<strong>Salmonella</strong> Typhimurium<br />

ATCC ® Crescimento Colónias<br />

14028 em 24 horas rosas a<br />

roxas<br />

Nota :<br />

É da responsabilidade do utilizador ter em conta a<br />

natureza da aplicação e a legislação local em vigor para a<br />

execução do controlo de qualidade (frequência, número<br />

de estirpes/cepas, temperatura de incubação... ).<br />

LIMITES DO TESTE<br />

• Podem observar-se precipitados brancos durante o<br />

crescimento de alguns microrganismos. Estes<br />

precipitados não apresentam o aspecto característico<br />

das colónias de <strong>Salmonella</strong>.<br />

• Alguns serótipos de <strong>Salmonella</strong> (particularmente<br />

<strong>Salmonella</strong> Dublin, <strong>Salmonella</strong> Abortusovis, <strong>Salmonella</strong><br />

Gallinarum) podem apresentar uma coloração fraca ou<br />

tardia.<br />

• Alguns bacilos Gram (-) que não <strong>Salmonella</strong> podem<br />

apresentar colónias características. É portanto<br />

necessário efectuar uma identificação completa com<br />

testes complementares.<br />

• Algumas fezes podem conter esterases livres<br />

susceptíveis de provocar o aparecimento de uma<br />

coloração rosa a roxo da gelose no ponto de<br />

inoculação.<br />

• De acordo com a sensibilidade das estirpes/cepas aos<br />

agentes selectivos, algumas bactérias Gram (+) ou<br />

algumas leveduras podem desenvolver-se neste meio.<br />

• O desenvolvimento depende das exigências específicas<br />

de cada microrganismo. Portanto, é possível que<br />

algumas estirpes/cepas que tenham exigências<br />

específicas não se desenvolvam.<br />

• Em função das colheitas/coletas analisadas, é<br />

recomendado associar a gelose chromID TM <strong>Salmonella</strong><br />

a meios complementares destinados à coprocultura (por<br />

exemplo geloses Campylosel, Yersinia, Clostridium<br />

difficile …).<br />

• Em microbiologia alimentar, é recomendado associar a<br />

gelose chromID TM <strong>Salmonella</strong> a um dos meios<br />

recomendados pela norma de referência.<br />

• A gelose chromID TM <strong>Salmonella</strong> foi avaliada a partir das<br />

principais matrizes alimentares e a partir de um grande<br />

número de estirpes/cepas bacterianas. Tendo em conta<br />

a diversidade dos produtos alimentares, dos<br />

procedimentos de fabrico e da flora microbiana, pode<br />

ser necessário verificar se a gelose chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong> está correctamente adaptada à<br />

especificidade dos produtos a testar.<br />

COMPORTAMENTO FUNCIONAL<br />

Validação em colheitas/coletas :<br />

A gelose chromID TM <strong>Salmonella</strong> foi comparada à gelose<br />

SM ® ID e a outro meio cromogénico.<br />

260 colheitas/coletas de origem humana (sais e<br />

zaragatoas/swabs rectais) foram analisadas entre as<br />

quais :<br />

• 231 naturalmente contaminadas ou não por salmonelas.


Gelose chromID <strong>Salmonella</strong> (SM2) 12044 E - pt - 2007/09<br />

• 29 fezes negativas artificialmente contaminadas por<br />

salmonelas.<br />

As colheitas/coletas de fezes foram semeadas<br />

directamente nos meios e após enriquecimento em caldo<br />

Selenito F.<br />

As colheitas/coletas rectais foram semeadas unicamente<br />

após enriquecimento em caldo Selenito F.<br />

O comportamento funcional foi avaliado após 24 horas de<br />

incubação a 37°C.<br />

Fertilidade e sensibilidade de detecção de <strong>Salmonella</strong><br />

Entre as 260 amostras estudadas, 40 apresentaram<br />

culturas positivas em salmonelas em pelo menos um dos<br />

3 meios (identificação confirmada).<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

SM ® ID Outro meio<br />

Sensibilidade de<br />

detecção de<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

39/40<br />

(98%)<br />

36/40<br />

(90%)<br />

28/40<br />

(70%)<br />

Especificidade de coloração<br />

Entre as colónias características observadas em cada um<br />

dos meios, a proporção de colónias confirmadas<br />

<strong>Salmonella</strong> é a seguinte :<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

SM ® ID Outro meio<br />

Especificidade da<br />

coloração<br />

39/42<br />

(93 %)<br />

36/50<br />

(72 %)<br />

28/29<br />

(97 %)<br />

Detecção das estirpes/cepas das <strong>Salmonella</strong><br />

lactose (+) :<br />

A gelose chromID TM <strong>Salmonella</strong> foi comparada à gelose<br />

SM ® ID.<br />

Foram efectuadas 9 culturas puras de <strong>Salmonella</strong><br />

Lactose (+). Foram apresentadas 7 estirpes/cepas das<br />

colónias características sobre a gelose chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong> enquanto que nenhuma era característica<br />

sobre a gelose SM ® ID.<br />

ELIMINAÇÃO DE RESÍDUOS<br />

Eliminar os reagentes utilizados e não utilizados bem<br />

como os materiais descartáveis contaminados seguindo<br />

os procedimentos relativos aos produtos infecciosos ou<br />

potencialmente infecciosos. É da responsabilidade de<br />

cada laboratório gerir os resíduos e os efluentes que este<br />

produz consoante a sua natureza e o seu perigo, e<br />

assegurar (ou fazer assegurar) o tratamento e a<br />

eliminação em conformidade com as regulamentações<br />

aplicáveis.<br />

ATCC é uma marca utilizada, depositada e/ou registada propriedade exclusiva da American Type Culture Collection.<br />

CLSI é uma marca utilizada, depositada e/ou registada, propriedade exclusiva da Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.<br />

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673 620 399 RCS LYON<br />

<strong>REF</strong>ERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS<br />

1. AGBAN A., OUNANIAN M., LUU-DUC C. et al. – Synthèse<br />

de substrats indigogéniques. Mise en évidence de l’activité<br />

estérasique des <strong>Salmonella</strong>. – Eur. J. Med. Chem., 1990, vol.<br />

25, p. 697-699.<br />

2. DELORME S., SENTA-LOYS A., SAUVONNET V. et al. –<br />

SM ID 2, a new chromogenic medium for isolation, detection<br />

and presomptive identification of <strong>Salmonella</strong>: comparison<br />

with SM ID, Hektoen and four commercially available<br />

chromogenic media. – Poster 933, Glasgow 2003, 13 th<br />

ECCMID.<br />

3. MANAFI M., WILLINGER B. – Comparison of three rapid<br />

methods for identification of <strong>Salmonella</strong> spp. – Lett. Appl.<br />

Microbiol., 1994, vol. 19, p. 328-331.<br />

4. PIGNATO S., GIAMMANCO G., GIAMMANCO G. –<br />

Rambach agar and SM-ID medium sensitivity for presumptive<br />

identification of <strong>Salmonella</strong> subspecies I-VI. – J. Med.<br />

Microbiol., 1995, vol. <strong>43</strong> , p. 68-71.<br />

5. RUIZ J., NUMEZ M.L., DIAZ J et al. – Comparison of five<br />

plating media for isolation of <strong>Salmonella</strong> species from human<br />

stools. – J. Clin. Microbiol., 1996, vol. 34, p. 686-688.<br />

6. SENTA-LOYS A., SAUVONNET V., ROGER-DALBERT C. –<br />

Impact of SM ID 2, a new chromogenic medium, on<br />

identification and susceptibility results. – Poster n° 642, Paris<br />

2003, 23 rd RICAI.<br />

7. Microbiologie des aliments. - Recherche des <strong>Salmonella</strong>.<br />

Méthode de routine. - NF V 08-052 - Mai 97 – AFNOR –<br />

ISSN 0335-3931.<br />

8. Microbiologie des aliments. Directives générales pour la<br />

recherche des <strong>Salmonella</strong>. – NF EN ISO 6579, Décembre<br />

2002, ISSN 0335-3931.<br />

QUADRO DE SÍMBOLOS<br />

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in vitro<br />

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Conteúdo suficiente para “n”<br />

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A bioMérieux, o logotipo azul e VIDAS e SM e chromID são marcas utilizadas, depositadas e/ou registadas,<br />

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<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong>/ <strong>43</strong> <strong>629</strong> 12044 E - el - 2007/09<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> (SM2)<br />

µ µ <strong>Salmonella</strong><br />

IVD<br />

To chromID <strong>Salmonella</strong> µ SM ® ID 2<br />

<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> <br />

µ <strong>Salmonella</strong><br />

µ (, µ)<br />

µ µ µ NF EN<br />

ISO 6579 (8) NF V 08-052 (7).<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong><br />

SM ® ID (Ref. <strong>43</strong><br />

291). , <br />

(+) <strong>Salmonella</strong>, µ <br />

µµ.<br />

<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> µ<br />

3<br />

µ µ :<br />

• <strong>Salmonella</strong>.<br />

• µ.<br />

<strong>Salmonella</strong>, µµµ<br />

(+) <strong>Salmonella</strong>, :<br />

µ µ µµ<br />

.<br />

µ <br />

µ.<br />

µµ <br />

Gram (+) µ.<br />

<br />

µ <br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> 2 x 10 (90 mm)<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>629</strong> 10 x 10 (90 mm)<br />

SM2 *<br />

* µ <br />

<br />

.<br />

µ µ / µ<br />

µ µ µ :<br />

( ) ...........................................................6,25 g<br />

Tris .................................................................................................0,16 g<br />

()..................................................................................6 g<br />

( )........................................................1,5 g<br />

µ µµ .........................................................................9,63 g<br />

NaCl ....................................................................................................5 g<br />

µµ.............................................................................0,03 g<br />

..................................................................................................14 g<br />

........................................................................................1 l<br />

pH 7,3<br />

<br />

• .<br />

<br />

• µ Selenite F (Ref. 42 099).<br />

• µ Rappaport (Ref. 42 091).<br />

• µ Rappaport-Vassiliadis (Ref. 42 0<strong>43</strong>).<br />

• µ Selenite Cystine (Ref. 42 052).<br />

• µ Rappaport-Vassiliadis (Ref. 42 110).<br />

• µ Muller-Kauffmann µ <br />

(Ref. 42 114).<br />

• VIDAS ® ICS (Ref. 30 <strong>43</strong>5)<br />

bioMérieux ® SA - 1<br />

<br />

• in vitro <br />

µ .<br />

• µ .<br />

• <br />

. µ <br />

/ µ <br />

µµ<br />

. ’ <br />

µ <br />

µµ µ µ<br />

( µ µ <br />

).<br />

• µ, µ <br />

µµ <br />

µµ µ .<br />

µ<br />

µµ µ <br />

.<br />

"CLSI ® M29-A, Protection of<br />

Laboratory Workers from occupationally Acquired<br />

Infections; Approved Guideline – <br />

". µ<br />

µ, <br />

"Biosafety in Microbiological and Biomedical<br />

Laboratories – CDC/NIH – ", <br />

µ <br />

µ.<br />

• µ<br />

.<br />

• µ µ <br />

µµ .<br />

• µ <br />

.<br />

• µ µµ <br />

.<br />

• µ µ <br />

µ , <br />

µ, µ <br />

µ µ , <br />

, µ <br />

µ.<br />

• µ µ<br />

µ µ.<br />

• µ µ <br />

<br />

<br />

. <br />

µ µ.<br />

<br />

• 2°C-8°C<br />

µ µµ .<br />

• , µ<br />

2 µ 2-8°C <br />

.<br />

• .


chromID <strong>Salmonella</strong> (SM2) 12044 E - el - 2007/09<br />

<br />

<br />

µ µ<br />

( µ <br />

), µ <br />

µ µ.<br />

<br />

µ .<br />

µ<br />

<br />

µ µ.<br />

<br />

:<br />

<strong>Salmonella</strong> µ <br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> µ µ µ<br />

:<br />

1. µ<br />

µ.<br />

2. µ chromID TM <strong>Salmonella</strong><br />

µ µ µµ<br />

µ µ Rappaport Selenite F.<br />

3. , µ µµ , <br />

35-37°C . <br />

µ<br />

µ , µ µ<br />

. µ<br />

18-24 . µ <br />

µ .<br />

µ:<br />

µ<br />

µ µ <br />

NF EN ISO 6579 (8) NF-V 08-52 (7) <br />

<strong>Salmonella</strong> µ.<br />

µ µ NF EN ISO 6579 (8), <br />

µ chromID TM <strong>Salmonella</strong> <br />

µµ XLD µ<br />

-µµ µ µ<br />

, <br />

µµ µ Rappaport-Vassiliadis <br />

µ Muller-Kauffmann µ .<br />

1. µ<br />

µ.<br />

2. µ 2 µ<br />

µ 2 .<br />

3. µ µµ 35-37°C<br />

.<br />

, µ 18-24<br />

.<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> µ <br />

µ VIDAS Immuno-Concentration<br />

<strong>Salmonella</strong> (VIDAS ® ICS).<br />

<br />

• , .<br />

• <br />

<strong>Salmonella</strong>: µ <br />

• () µµ() ()<br />

() µ(), <br />

µ / (6).<br />

<br />

bioMérieux ® SA - 2<br />

:<br />

µ <br />

µ :<br />

• <strong>Salmonella</strong> Typhimurium ATCC ® 14028<br />

µµ µ:<br />

µ 33-37°C<br />

<strong>Salmonella</strong> Typhimurium<br />

ATCC ® 14028<br />

µ<br />

24 <br />

<br />

µ <br />

µ:<br />

<br />

µ µ ,<br />

µ µ <br />

µ (, µ , µ<br />

…).<br />

<br />

• µ µ <br />

µ µµ. <br />

µ µ <br />

<strong>Salmonella</strong>.<br />

• µ <strong>Salmonella</strong> (µ<br />

<strong>Salmonella</strong> Dublin, <strong>Salmonella</strong> Abortusovis, <strong>Salmonella</strong><br />

Gallinarum) µ µ µ<br />

µµ µ µµ.<br />

• µ Gram (-) <strong>Salmonella</strong> µ<br />

µ . ’ <br />

<br />

µ µµ .<br />

• µ µ µ <br />

µ<br />

µ µµ µ<br />

µµ.<br />

• µ <br />

, µ Gram (+) <br />

µ µ .<br />

• <br />

µµ . ’ ,<br />

µ <strong>Salmonella</strong> <br />

µ .<br />

• µ µ , <br />

µ chromID TM <strong>Salmonella</strong> <br />

µ µ µµ <br />

(.. <br />

Campylosel, Yersinia, Clostridium difficile, .).<br />

• µ µ, <br />

µ chromID TM <strong>Salmonella</strong> <br />

µ µ <br />

.<br />

• chromID TM <strong>Salmonella</strong> <br />

µ µ µ <br />

. µ µ <br />

µ, <br />

µ , µ <br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> 2 <br />

µµ <br />

.


chromID <strong>Salmonella</strong> (SM2) 12044 E - el - 2007/09<br />

<br />

µ µ<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> µ <br />

SM ® ID µ .<br />

260 µ ( <br />

µ) µµµ:<br />

• 231 µ µµ <br />

µ µµ µ µ.<br />

• 29 µ <br />

µ µ µ.<br />

µ µ <br />

µ µµ µ Selenite F.<br />

µ µ µ µ <br />

µµ µ Selenite F.<br />

µ 24 <br />

37°C.<br />

<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

260 µ µ<br />

µ <br />

3 ( ).<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® SM<br />

ID2<br />

® ID <br />

<br />

<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

39/40<br />

(98%)<br />

36/40<br />

(90%)<br />

28/40<br />

(70%)<br />

µµ<br />

<br />

, <br />

<strong>Salmonella</strong> <br />

:<br />

chromID TM<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

SM ® ID <br />

<br />

µµ<br />

39/42<br />

(93%)<br />

(+) <strong>Salmonella</strong> :<br />

36/50<br />

(72%)<br />

28/29<br />

(97%)<br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> µ <br />

SM ® ID.<br />

(+)<br />

<strong>Salmonella</strong>. <br />

µ chromID TM <strong>Salmonella</strong>, µ<br />

µ SM ® ID.<br />

<br />

µµ µ µµ<br />

<br />

µµ µ <br />

µµ µµ<br />

. <br />

µ <br />

µ µ µ<br />

<br />

µ ATCC µµ, µ / µ µ µ American Type Culture Collection.<br />

µ CLSI µµ, µ / µ µ µ Laboratory Standards Institute Inc.<br />

bioMérieux ® SA<br />

au capital de 12 029 370 €<br />

673 620 399 RCS LYON<br />

( <br />

) µ µ µ.<br />

<br />

1. AGBAN A., OUNANIAN M., LUU-DUC C. et al. – Synthèse<br />

de substrats indigogéniques. Mise en évidence de l’activité<br />

estérasique des <strong>Salmonella</strong>. – Eur. J. Med. Chem., 1990, vol.<br />

25, p. 697-699.<br />

2. DELORME S., SENTA-LOYS A., SAUVONNET V. et al. –<br />

SM ID 2, a new chromogenic medium for isolation, detection<br />

and presomptive identification of <strong>Salmonella</strong>: comparison<br />

with SM ID, Hektoen and four commercially available<br />

chromogenic media. – Poster 933, Glasgow 2003, 13 th<br />

ECCMID.<br />

3. MANAFI M., WILLINGER B. – Comparison of three rapid<br />

methods for identification of <strong>Salmonella</strong> spp. – Lett. Appl.<br />

Microbiol., 1994, vol. 19, p. 328-331.<br />

4. PIGNATO S., GIAMMANCO G., GIAMMANCO G. –<br />

Rambach agar and SM-ID medium sensitivity for presumptive<br />

identification of <strong>Salmonella</strong> subspecies I-VI. – J. Med.<br />

Microbiol., 1995, vol. <strong>43</strong> , p. 68-71.<br />

5. RUIZ J., NUMEZ M.L., DIAZ J and al. – Comparison of five<br />

plating media for isolation of <strong>Salmonella</strong> species from human<br />

stools. – J. Clin. Microbiol., 1996, vol. 34, p. 686-688.<br />

6. SENTA-LOYS A., SAUVONNET V., ROGER-DALBERT C. –<br />

Impact of SM ID 2, a new chromogenic medium, on<br />

identification and susceptibility results. – Poster n° 642, Paris<br />

2003, 23rd RICAI.<br />

7. Microbiologie des aliments. - Recherche des <strong>Salmonella</strong>.<br />

Méthode de routine. - NF V 08-052 - Mai 97 – AFNOR –<br />

ISSN 0335-3931.<br />

8. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Horizontal<br />

method for the detection of <strong>Salmonella</strong>. – NF EN ISO 6579,<br />

December 2002, ISSN 0335-3931.<br />

<br />

µ <br />

<strong>REF</strong><br />

µ <br />

69280 Marcy-l'Etoile / France<br />

. 33 (0)4 78 87 20 00<br />

Fax 33 (0)4 78 87 20 90<br />

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In Vitro <br />

<br />

<br />

µ µ<br />

µµ <br />

µ <br />

µ <br />

µ «»<br />

<br />

<br />

<br />

µ bioMérieux, o µ VIDAS SM µµ,<br />

µ / µ µ µ bioMérieux SA µ


<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> / <strong>43</strong> <strong>629</strong> 12044 E - sv - 2007/09<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> Agar (SM2)<br />

Kromogent medium för selektiv isolering och differentiering av släktet <strong>Salmonella</strong><br />

chromID <strong>Salmonella</strong> är det nya namnet för SM ® ID 2 agar.<br />

SAMMANFATTNING OCH FÖRKLARING<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar är ett selektivt isolerings- och<br />

differentieringsmedium för detektion av <strong>Salmonella</strong> i<br />

humanprover (faeces, rektala prov) och<br />

livsmedelsprodukter enligt standarder NF EN ISO 6579<br />

(8) och NF V 08-052 (7).<br />

Detektionsprincipen för chromID <strong>Salmonella</strong> agar är olik<br />

den för SM ® ID-agar (art. nr. <strong>43</strong> 291). Dessutom möjliggör<br />

den detektion av laktospositiv <strong>Salmonella</strong> med högre<br />

färgningsspecificitet.<br />

METOD<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar består av en näringsbas som<br />

kombinerar olika peptoner och tre kromogena substrat,<br />

vilket möjliggör:<br />

• tillväxt av all <strong>Salmonella</strong>.<br />

• detektion av aktivitet av specifika enzymer.<br />

Differentiering av <strong>Salmonella</strong>, inklusive laktospositiv<br />

<strong>Salmonella</strong>, baseras på följande princip: spontant svagt<br />

rosa till ljuslila färgning av stammar som bildar esteras.<br />

Andra bakteriestammar bildar kolonier som har andra<br />

färger.<br />

Den selektiva blandningen inhiberar de flesta<br />

grampositiva bakterier och jästsvampar.<br />

KITETS INNEHÅLL<br />

Medium färdigt för användning<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> Förpackning med 2 x 10 plattor<br />

(90 mm)<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>629</strong> Förpackning med 10 x 10 plattor<br />

(90 mm)<br />

SM2 *<br />

* Tryckt på varje platta<br />

SAMMANSÄTTNING<br />

Teoretiskt innehåll.<br />

Detta medium kan justeras och/eller kompletteras i enlighet med<br />

önskade kriterier:<br />

Peptoner (svin eller nöt)..................................................................6,25 g<br />

Tris .................................................................................................0,16 g<br />

Laktos (nöt)..........................................................................................6 g<br />

Gallsalter (nöt eller ägg) ...................................................................1,5 g<br />

Kromogen blandning.......................................................................9,63 g<br />

NaCl ....................................................................................................5 g<br />

Selektiv blandning ...........................................................................0,03g<br />

Agar...................................................................................................14 g<br />

Renat vatten .........................................................................................1 l<br />

pH 7,3<br />

NÖDVÄNDIGT MATERIAL (SOM INTE MEDFÖLJER)<br />

• Bakteriologisk inkubator.<br />

bioMérieux ® SA Svenska - 1<br />

IVD<br />

YTTERLIGARE TÄNKBARA REAGENSER<br />

• Selenite F-buljong (Art. nr. 42 099).<br />

• Rappaportbuljong (Art. nr. 42 091).<br />

• Rappaport-Vassiliadisbuljong (Art. nr. 42 0<strong>43</strong>).<br />

• Selenite Cystine-buljong (Art. nr. 42 052).<br />

• Rappaport-Vassiliadissojabuljong (Art. nr. 42 110).<br />

• Muller-Kauffmannbuljong med tetrationat och novobiocin<br />

(Art. nr. 42 114).<br />

• VIDAS ® ICS (Art. nr. 30 <strong>43</strong>5).<br />

FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER<br />

• Endast för in vitro-diagnostisk användning och<br />

mikrobiologisk kontroll.<br />

• Endast för professionell användning.<br />

• Detta kit innehåller produkter av animaliskt ursprung.<br />

Certifierade data angående ursprunget och/eller<br />

hälsotillståndet hos djuren garanterar inte total frånvaro<br />

av överförbara patogena substanser. Det<br />

rekommenderas därför att dessa produkter behandlas<br />

som potentiellt infektiösa och handhas enligt sedvanliga<br />

försiktighetsåtgärder (ska inte förtäras eller inandas).<br />

• Alla prover, odlingar av mikroorganismer och<br />

inokulerade produkter ska anses infektiösa och hanteras<br />

på ett lämpligt sätt. Sterilteknik och sedvanliga<br />

försiktighetsåtgärder för att hantera den speciella<br />

gruppen av bakterier ska iakttas under hela proceduren.<br />

Se ""CLSI ® M29-A, Protection of Laboratory Workers<br />

From occupationally Acquired Infections; Approved<br />

Guideline – Current Revision". För ytterligare<br />

information om försiktighetsåtgärder vid hantering se<br />

"Biosafety in Microbiological and Biomedical<br />

Laboratories – CDC/NIH – Senaste upplagan" eller de<br />

f.n. gällande reglerna i det aktuella landet.<br />

• Odlingsmedier bör inte användas som material eller<br />

komponenter i tillverkningsprocesser.<br />

• Använd inte reagenser efter sista förbrukningsdatum.<br />

• Använd inte reagenser om förpackningen är skadad.<br />

• Använd inte kontaminerade plattor eller plattor som<br />

avsöndrar fukt.<br />

• Tolkning av testresultaten skall göras med hänsyn till<br />

patientens anamnes, provkälla, kolonimorfologi och<br />

mikroskopisk morfologi och om nödvändigt, resultat av<br />

andra utförda tester.<br />

• Användning av mediet kan vara svårt för personer med<br />

nedsatt färgseende.<br />

• Data angående prestanda har erhållits med hjälp av den<br />

metod som anges i denna bipacksedel. Varje ändring i<br />

utförandet kan påverka resultaten.<br />

FÖRVARING<br />

• Förvara plattorna i sin låda vid 2-8°C fram till sista<br />

förbrukningsdatum.<br />

• Utanför lådan kan plattorna förvaras i cellofanpåsen i 2<br />

veckor vid 2-8°C.<br />

• Skydda mot ljus.


chromID <strong>Salmonella</strong> Agar (SM2) 12044 E - sv - 2007/09<br />

PROVER<br />

För användning inom medicinsk bakteriologi<br />

Mediet inokuleras direkt från faeces (flytande faeces eller<br />

en suspension av faeces i steril fysiologisk<br />

koksaltlösning), rektala prover eller från en<br />

anrikningsbuljong.<br />

God laboratoriesed (GLP) ska tillämpas vid insamling och<br />

transport.<br />

För användning inom livsmedelsbakteriologi<br />

Följ rekommendationerna i gällande standarder för<br />

provinsamling och beredning.<br />

BRUKSANVISNING<br />

För användning inom medicinsk bakteriologi<br />

Detektion av <strong>Salmonella</strong> med chromID <strong>Salmonella</strong> agar<br />

kan utföras i enlighet med sedvanligt protokoll för<br />

faecesodling:<br />

1. Låt plattorna anta rumstemperatur.<br />

2. Inokulera chromID <strong>Salmonella</strong> agar direkt från prov<br />

eller efter anrikning i Rappaport- eller Selenite Fbuljong.<br />

3. Inkubera plattan upp och ner vid 37°C under aeroba<br />

förhållanden. Användaren är ansvarig för att välja<br />

lämplig temperatur beroende på avsedd användning<br />

och i enlighet med gällande standard. Odlingarna<br />

granskas efter 18-24 timmars inkubation. I vissa fall<br />

kan det bli nödvändigt att förlänga inkubationen.<br />

För användning inom livsmedelsbakteriologi<br />

Detta medium är lämpligt för det förenklade utförandet av<br />

de standardiserade protokollen NF EN ISO 6579 (8) och<br />

NF-V 08-52 (7) för detektion av <strong>Salmonella</strong> i<br />

livsmedelsprodukter.<br />

Enligt NF EN ISO 6579-standarden (8) bör isolering på<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar utföras parallellt med XLDagar<br />

efter föranrikning i buffrat peptonvatten, följt av<br />

anrikning i Rappaport-Vassiliadissojabuljong och Muller-<br />

Kauffmannbuljong med tetrationat och novobiocin.<br />

1. Låt plattorna anta rumstemperatur.<br />

2. Inokulera de 2 anrikningsbuljongerna på separata<br />

plattor.<br />

3. Inkubera plattorna upp och ner vid 35-37°C under<br />

aeroba förhållanden.<br />

Odlingarna granskas generellt efter 18-24 timmars<br />

inkubation.<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar är också kompatibel för<br />

användning med VIDAS Immuno-Concentration-<br />

<strong>Salmonella</strong>analys (VIDAS ® ICS).<br />

AVLÄSNING OCH TOLKNING<br />

• Efter inkubationen undersöks bakterietillväxten.<br />

• Registrera närvaron av karakteristiska <strong>Salmonella</strong>kolonier:<br />

svagt rosa till ljuslila kolonier.<br />

• Identifiering av isolerade mikroorganismer måste följas<br />

av biokemiska och/eller immunologiska tester (6).<br />

KVALITETSKONTROLL<br />

Protokoll:<br />

Mediets näringskapacitet kan testas med följande stam:<br />

• <strong>Salmonella</strong> Typhimurium ATCC ® 14028<br />

bioMérieux ® SA Svenska - 2<br />

Förväntade resultat:<br />

Stam Resultat vid 33-37°C<br />

<strong>Salmonella</strong> Typhimurium<br />

ATCC ® Tillväxt inom Rosa till<br />

14028<br />

24 timmar ljuslila<br />

kolonier<br />

Obs:<br />

Det är användarens ansvar att utföra kvalitetskontroll med<br />

hänsyn till den planerade användningen av mediet och i<br />

enlighet med lokala tillämpliga förhållningsregler<br />

(frekvens, antal stammar, inkubationstemperatur etc.).<br />

METODENS BEGRÄNSNINGAR<br />

• Vita fällningar kan observeras när vissa<br />

mikroorganismer tillväxer. Dessa fällningar har inte det<br />

karakteristika utseendet för <strong>Salmonella</strong>-kolonier.<br />

• Vissa <strong>Salmonella</strong>-serovarer (framför allt <strong>Salmonella</strong><br />

Dublin, <strong>Salmonella</strong> Abortusovis och <strong>Salmonella</strong><br />

Gallinarum) kan ge en svag färgning eller vara<br />

långsamma med att ge färgning.<br />

• Vissa gramnegativa stavar, utöver <strong>Salmonella</strong>, kan bilda<br />

karakteristiska kolonier. En fullständig identifiering<br />

måste därför utföras med hjälp av ytterligare tester.<br />

• Vissa faecesprov kan innehålla fritt esteras som kan ge<br />

rosa till ljuslila färgning av mediet vid inokuleringsytan.<br />

• Beroende på olika stammars känslighet för selektiva<br />

ämnen kan vissa grampositiva bakterier eller<br />

jästsvampar växa på detta medium.<br />

• Tillväxt beror på behoven hos varje enskild<br />

mikroorganism. Därför är det möjligt att vissa stammar<br />

av <strong>Salmonella</strong>, som har specifika behov, inte tillväxer.<br />

• Beroende på vilka prover som analyseras<br />

rekommenderas användning av chromID <strong>Salmonella</strong><br />

agar tillsammans med ytterligare medier för<br />

faecesodling (t.ex. Campylosel-, Yersinia-, Clostridium<br />

difficile-agar, etc.).<br />

• Inom livsmedelsmikrobiologi rekommenderas att<br />

använda chromID <strong>Salmonella</strong> agar tillsammans med<br />

medier som rekommenderas av referensstandarden.<br />

• chromID <strong>Salmonella</strong> agar har utvärderats för de<br />

viktigaste livsmedelsmatriserna och ett stort antal<br />

bakteriestammar. Givet den stora variationen av<br />

livsmedelsprodukter, tillverkningsprocesser och<br />

mikrobiell flora kan det vara nödvändigt att kontrollera<br />

att SM ® ID 2-agarn är lämpad för de specifika produkter<br />

som ska testas.<br />

PRESTANDA<br />

Validering med hjälp av prov<br />

SM ® ID 2-agar jämfördes med SM ® ID-agar och ett annat<br />

kromogent medium.<br />

260 humanprover (faeces och rektala prover) testades,<br />

inklusive:<br />

• 231 prover som var naturligt kontaminerade eller inte<br />

kontaminerade med salmonella.<br />

• 29 negativa faecesprov som var artificiellt<br />

kontaminerade med salmonella.<br />

Faecesproverna inokulerades direkt på mediet och efter<br />

anrikning i Selenite F-buljong.<br />

Rektala prover inokulerades endast efter anrikning i<br />

Selenite F-buljong.<br />

Prestanda utvärderades efter 24 timmars inkubation vid<br />

37°C.


chromID <strong>Salmonella</strong> Agar (SM2) 12044 E - sv - 2007/09<br />

Näringskapacitet och sensitivitet för <strong>Salmonella</strong>-detektion<br />

40 av de 260 prov som studerades bildade positiva<br />

<strong>Salmonella</strong>-odlingar på minst ett av tre medier (bekräftad<br />

identifiering).<br />

Känslighet för<br />

<strong>Salmonella</strong>detektion<br />

chromID<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

=SM ® ID 2<br />

39/40<br />

(98%)<br />

SM ® ID Annat medium<br />

36/40<br />

(90%)<br />

28/40<br />

(70%)<br />

Färgningsspecificitet<br />

Bland de karakteristiska kolonierna på varje medium är<br />

den andel av kolonierna som konfirmerades som<br />

<strong>Salmonella</strong>:<br />

Färgningsspecificitet<br />

chromID<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

39/42<br />

(93%)<br />

SM ® ID<br />

36/50<br />

(72%)<br />

Detektion av laktospositiv <strong>Salmonella</strong>:<br />

Annat medium<br />

28/29<br />

(97%)<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar jämfördes med SM ® ID-agar.<br />

Nio rena laktospositiva <strong>Salmonella</strong>-odlingar erhölls. Sju<br />

stammar bildade karakteristiska kolonier på chromID<br />

<strong>Salmonella</strong> agar medan inga kolonier var karakteristiska<br />

på SM ® ID-agar.<br />

AVFALLSHANTERING<br />

Avfallshantering av använda eller oanvända reagenser,<br />

liksom av andra kontaminerade engångsmaterial, ska ske<br />

i enlighet med procedurer för infektiösa eller potentiellt<br />

infektiösa produkter. Det är varje laboratoriums ansvar att<br />

handha avfalls- och avloppsprodukter enligt typ och<br />

farlighetsgrad och behandla och avlägsna dem (eller få<br />

dem behandlade och avlägsnade) i enlighet med alla<br />

tillämpliga föreskrifter.<br />

<strong>REF</strong>ERENSLITTERATUR<br />

1. AGBAN A., OUNANIAN M., LUU-DUC C. et al. – Synthèse<br />

de substrats indigogéniques. Mise en évidence de l’activité<br />

estérasique des <strong>Salmonella</strong>. – Eur. J. Med. Chem., 1990, vol.<br />

25, p. 697-699.<br />

2. DELORME S., SENTA-LOYS A., SAUVONNET V. et al. –<br />

SM ID 2, a new chromogenic medium for isolation, detection<br />

and presomptive identification of <strong>Salmonella</strong>: comparison<br />

with SM ID, Hektoen and four commercially available<br />

chromogenic media. – Poster 933, Glasgow 2003, 13 th<br />

ECCMID.<br />

3. MANAFI M., WILLINGER B. – Comparison of three rapid<br />

methods for identification of <strong>Salmonella</strong> spp. – Lett. Appl.<br />

Microbiol., 1994, vol. 19, p. 328-331.<br />

4. PIGNATO S., GIAMMANCO G., GIAMMANCO G. –<br />

Rambach agar and SM-ID medium sensitivity for presumptive<br />

identification of <strong>Salmonella</strong> subspecies I-VI. - J. Med.<br />

Microbiol., 1995, vol. <strong>43</strong>, p. 68-71.<br />

ATCC är ett använt, patentsökt och/eller registrerat varumärke som tillhör American Type Culture Collection.<br />

CLSI är ett använt, patentsökt och/eller registrerat varumärke för Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.<br />

bioMérieux ® SA<br />

au capital de 12 029 370 €<br />

673 620 399 RCS LYON<br />

5. RUIZ J., NUNEZ M.L., DIAZ J och al. – Comparison of five<br />

plating media for isolation of <strong>Salmonella</strong> species from human<br />

stools. – J. Clin. Microbiol., 1996, vol. 34, p. 686-688.<br />

6. SENTA-LOYS A., SAUVONNET V., ROGER-DALBERT C. –<br />

Impact of SM ID 2, a new chromogenic medium, on<br />

identification and susceptibility results. – Poster n° 642, Paris<br />

2003, 23rd RICAI.<br />

7. Microbiologie des aliments. - Recherche des <strong>Salmonella</strong>.<br />

Méthode de routine. - NF V 08-052 - Mai 97 – AFNOR –<br />

ISSN 0335-3931.<br />

8. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Horizontal<br />

method for the detection of <strong>Salmonella</strong>. – NF EN ISO 6579,<br />

December 2002, ISSN 0335-3931.<br />

SYMBOLER<br />

Symbol Betydelse<br />

eller <strong>REF</strong> Katalognummer<br />

69280 Marcy-l'Etoile / France<br />

Tel. 33 (0)4 78 87 20 00<br />

Fax 33 (0)4 78 87 20 90<br />

http://www.biomerieux.com<br />

Medicintekniska produkter för in vitro<br />

diagnostik<br />

Tillverkare<br />

Temperaturbegränsning<br />

Använd före<br />

Lot nummer<br />

Se handhavandebeskrivningen<br />

Räcker till "n" antal tester<br />

Skyddas mot ljus<br />

Tryckt i Frankrike<br />

bioMérieux, den blå logotypen, VIDAS, SM och chromID är patentsökta och/eller registrerade varumärken som tillhör<br />

och används av bioMérieux SA eller något av dess dotterbolag.


<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong>/ <strong>43</strong> <strong>629</strong> 12044 E - da - 2007/09<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> Agar (SM2)<br />

Chromogent medium til selektiv isolation og differentiering af genus <strong>Salmonella</strong><br />

chromID TM <strong>Salmonella</strong> er det nye navn for SM ® ID 2 agar.<br />

RESUMÉ OG FORKLARING<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar er et selektivt isolations- og<br />

differentiationsmedium til detektion af <strong>Salmonella</strong> i<br />

humane prøver (fæces, rektalprøver) og<br />

fødevareprodukter iht. standarderne NF EN ISO 6579 (8)<br />

og NF V 08-052 (7).<br />

Detektionsprincippet for SM ® ID 2 agar afviger fra<br />

princippet for chromID <strong>Salmonella</strong> agar (Ref. <strong>43</strong> 291).<br />

Desuden muliggør det detektion af laktose (+) <strong>Salmonella</strong>,<br />

med højere farvningsspecificitet.<br />

PRINCIP<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar består af en næringsbase,<br />

der kombinerer forskellige peptoner og 3 chromogene<br />

substrater, hvilket muliggør:.<br />

• dyrkning af alle <strong>Salmonella</strong>.<br />

• detektion af specifikke enzymaktiviteter.<br />

Direkte differentiering af <strong>Salmonella</strong>, herunder laktose (+)<br />

<strong>Salmonella</strong>, er baseret på følgende princip: spontan<br />

lyserød til lilla farvning af stammer, der danner esterase.<br />

Andre bakteriestammer danner kolonier med andre farver.<br />

Den selektive blanding hæmmer de fleste Gram-positive<br />

bakterier og gærsvampe.<br />

KITTETS INDHOLD<br />

Brugsklart medium<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> Pakning med 2 x 10 plader (90 mm)<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>629</strong> Pakning med 10 x 10 plader (90 mm)<br />

SM2 *<br />

* Trykt på hver enkelt plade<br />

SAMMENSÆTNING<br />

Teoretisk sammensætning.<br />

Dette medium kan justeres og/eller suppleres efter de nødvendige<br />

ydelseskriterier:<br />

Peptoner (svine- eller okse-)...........................................................6,25 g<br />

Tris .................................................................................................0,16 g<br />

Laktose (okse-)....................................................................................6 g<br />

Galdesalte (okse- eller fåre-) ............................................................1,5 g<br />

Chromogen blanding ......................................................................9,63 g<br />

NaCl ....................................................................................................5 g<br />

Selektiv blanding ............................................................................0,03 g<br />

Agar...................................................................................................14 g<br />

Demineraliseret vand ...........................................................................1 l<br />

pH 7,3<br />

NØDVENDIGE MEN IKKE MEDFØLGENDE<br />

MATERIALER<br />

• Bakteriologiinkubator.<br />

bioMérieux ® SA Dansk - 1<br />

IVD<br />

EVENTUELLE SUPPLERENDE REAGENSER<br />

• Selenit F bouillon (Ref. 42 099).<br />

• Rappaport-bouillon (Ref. 42 091).<br />

• Rappaport-Vassiliadis bouillon (Ref. 42 0<strong>43</strong>).<br />

• Selenit Cystin bouillon (Ref. 42 052).<br />

• Rappaport-Vassiliadis sojabouillon (Ref. 42 110).<br />

• Muller-Kauffmann bouillon med tetrationat og novobiocin<br />

(Ref. 42 114).<br />

• VIDAS ® ICE (Ref. 30 <strong>43</strong>5).<br />

ADVARSLER OG FORSIGTIGHEDSREGLER<br />

• Kun til in vitro diagnostisk anvendelse og<br />

mikrobiologisk kontrol.<br />

• Kun til professionel brug.<br />

• Dette kit indeholder produkter af animalsk oprindelse.<br />

Certificeret kendskab til dyrenes oprindelse og/eller<br />

sundhedstilstand er ikke nogen fuldgyldig garanti for, at<br />

der ikke er indeholdt nogen patogene stoffer. Det<br />

anbefales derfor, at disse produkter behandles som<br />

potentielt smittefarlige og håndteres under iagttagelse af<br />

de normale sikkerhedsforanstaltninger (må ikke<br />

indtages eller indåndes).<br />

• Alle prøver, mikrobekulturer og podede produkter skal<br />

betragtes som smittefarlige og håndteres i<br />

overensstemmelse hermed. Der skal anvendes aseptisk<br />

teknik og sædvanlige forholdsregler for håndtering af<br />

den undersøgte bakteriekultur gennem hele denne<br />

procedure. Se venligst "CLSI ® M29-A, Protection of<br />

Laboratory Workers from Occupationally Acquired<br />

Infections; Approved Guideline – Aktuel revidering". For<br />

yderligere oplysninger om forsigtighedsforanstaltninger<br />

ved håndtering henvises til "Biosafety in Microbiological<br />

and Biomedical Laboratories, CDC/NIH- seneste<br />

udgave" eller de aktuelt gældende bestemmelser i<br />

anvendelseslandet.<br />

• Dyrkningsmedier må ikke anvendes som<br />

produktionsmaterialer eller –bestanddele.<br />

• Reagenserne må ikke anvendes efter udløbsdatoen.<br />

• Reagenserne må ikke anvendes, hvis pakningen er<br />

beskadiget.<br />

• Plader, der er kontamineret, eller som afgiver fugt, må<br />

ikke anvendes.<br />

• Ved fortolkning af testresultaterne skal der tages højde<br />

for patientens sygehistorie, prøvens kilde, makro- og<br />

mikroskopisk morfologi samt om nødvendigt<br />

resultaterne af eventuelle andre udførte prøver.<br />

• Anvendelse af dette medium kan være vanskeligt for<br />

mennesker, der har problemer med at genkende farver.<br />

• Præstationsdata blev fundet ved anvendelse af den<br />

procedure, der er angivet på denne indlægsseddel.<br />

Enhver ændring eller modifikation af denne procedure<br />

kan påvirke resultaterne.<br />

OPBEVARINGSBETINGELSER<br />

• Pladerne opbevares ved 2°C-8°C i deres æske, indtil<br />

udløbsdatoen.<br />

• Hvis pladerne ikke opbevares i æsken, kan de<br />

opbevares i 2 uger ved 2-8°C i cellofanposen.<br />

• Beskyttes mod lys.


chromID <strong>Salmonella</strong> Agar (SM2) 12044 E - da - 2007/09<br />

PRØVER<br />

Til anvendelse i medicinsk bakteriologi<br />

Mediet inokuleres direkte ved hjælp af afføring (flydende<br />

afføring eller en afføringssuspension i sterilt fysiologisk<br />

saltvand), rektalprøver eller en berigelsesbouillon.<br />

God laboratoriepraksis for indsamling og transport skal<br />

respekteres.<br />

Til anvendelse i fødevarebakteriologi<br />

Følg anbefalingerne i de aktuelle standarder for<br />

gennemførelse af prøveindsamling og –præparering.<br />

BRUGSANVISNING<br />

Til anvendelse i medicinsk bakteriologi:<br />

Detektion af <strong>Salmonella</strong> ved hjælp af chromID<br />

<strong>Salmonella</strong> agar kan udføres efter den normale<br />

fækaliedyrkningsprotokol:<br />

1. Lad pladerne antage stuetemperatur.<br />

2. Inokulér chromID <strong>Salmonella</strong> agaren direkte med<br />

prøverne eller efter berigelse med Rappaport eller<br />

Selenit F bouillon.<br />

3. Inkubér med bunden opad ved 37°C under aerobe<br />

forhold. Brugeren er ansvarlig for valget af den rigtige<br />

temperatur til den tilsigtede anvendelse i<br />

overensstemmelse med aktuelle standarder.<br />

Kulturerne undersøges efter 18–24 timers<br />

inkubationstid. I visse tilfælde kan det være<br />

nødvendigt at forlænge inkubationen.<br />

Til anvendelse i fødevarebakteriologi:<br />

Dette medium er perfekt egnet til forenklet anvendelse af<br />

standardprotokollen NF EN ISO 6579 (8) og NF-V 08-52<br />

(7) til detektion af <strong>Salmonella</strong> i fødevareprodukter.<br />

I henhold til NF EN ISO 6579 standard (8), skal isolation<br />

på chromID <strong>Salmonella</strong> agar udføres parallelt med<br />

XLD-agar efter forudgående berigelse i bufret peptonvand<br />

efterfulgt af berigelse i Rappaport-Vassiliadis sojabouillon<br />

og Muller-Kauffmann bouillon med tetrationat og<br />

novobiocin.<br />

1. Lad pladerne antage stuetemperatur.<br />

2. Inokulér de 2 berigelsesbouilloner på 2 separate<br />

plader.<br />

3. Inkubér med bunden opad ved 35–37°C under aerobe<br />

forhold.<br />

Kulturerne undersøges normalt efter 18–24 timers<br />

inkubationstid.<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar er også egnet til brug<br />

sammen med VIDAS Immuno-Concentration <strong>Salmonella</strong><br />

analysen (VIDAS ® ICS).<br />

AFLÆSNING OG FORTOLKNING<br />

• Efter inkubationen observeres bakterievæksten.<br />

• Registrer tilstedeværelsen af karakteristiske kolonier af<br />

<strong>Salmonella</strong>: Svagt lyserød til lilla farve<br />

• Identifikation af de(n) isolerede mikroorganisme(r) skal<br />

efterfølges af biokemiske eller immunologiske tests (6).<br />

KVALITETSKONTROL<br />

Protokol:<br />

Mediets næringskapacitet kan testes ved hjælp af<br />

følgende stamme:<br />

• <strong>Salmonella</strong> Typhimurium ATCC ® 14028<br />

bioMérieux ® SA Dansk - 2<br />

Forventede resultater:<br />

Stamme Resultater ved 33-37°C<br />

<strong>Salmonella</strong> Typhimurium<br />

ATCC ® 14028<br />

Vækst inden for<br />

24 timer<br />

Lyserøde<br />

til lilla<br />

kolonier<br />

Bemærk:<br />

Det er brugerens ansvar at gennemføre Kvalitetskontrol<br />

under hensyntagen til den tiltænkte anvendelse af mediet<br />

og i overensstemmelse med eventuelle lokale gældende<br />

bestemmelser (frekvens, antal stammer,<br />

inkubationstemperatur...).<br />

METODENS BEGRÆNSNINGER<br />

• Hvide præcipitater kan observeres, når visse<br />

mikroorganismer gror. Disse præcipitater har ikke<br />

samme karakteristika som <strong>Salmonella</strong> kolonier.<br />

• Visse <strong>Salmonella</strong> serovarer (specielt <strong>Salmonella</strong> Dublin,<br />

<strong>Salmonella</strong> Abortusovis, <strong>Salmonella</strong> Gallinarum) kan<br />

danne en svag farvning eller være langsomme til at<br />

danne farvning.<br />

• Visse andre Gram-negative bakterier end <strong>Salmonella</strong><br />

kan danne karakteristiske kolonier. Der skal derfor<br />

udføres komplet identifikation med supplerende tests.<br />

• Visse afføringsprøver kan indeholde frie esteraser, som<br />

sandsynligvis vil danne en lyserød til lilla farvning af<br />

mediet på inokulationspunktet.<br />

• Afhængigt af stammernes følsomhed over for selektive<br />

stoffer kan visse Gram-positive bakterier eller<br />

gærsvampe formere sig på dette medium.<br />

• Væksten afhænger af den enkelte individuelle<br />

mikroorganismes krav. Det er derfor muligt, at visse<br />

<strong>Salmonella</strong>-stammer, der har specifikke krav, ikke<br />

udvikler sig.<br />

• Afhængigt af de analyserede prøver anbefales det at<br />

anvende chromID <strong>Salmonella</strong> agar i forbindelse med<br />

supplerende medier beregnet til fækaliekulturer (f.eks.<br />

Campylosel, Yersinia, Clostridium difficile agarer, etc.).<br />

• Ved fødevaremikrobiologi anbefales det, at anvende<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar i forbindelse med de<br />

medier, der anbefales af reference-standarden.<br />

• chromID <strong>Salmonella</strong> agar er blevet evalueret på de<br />

væsentligste fødevarematrixer samt på en lang række<br />

bakteriestammer. På grund af den store variation i<br />

fødevareprodukter, fremstillingsprocedurer og mikrobiel<br />

flora kan det være nødvendigt at kontrollere, at<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar er velegnet til de testede<br />

produkters specifikke natur.<br />

PRÆSTATIONER<br />

Validering ved hjælp af prøver<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar er blevet sammenlignet med<br />

SM ® ID-agar og et andet chromogent medium.<br />

260 humane prøver (afførings- og rektalprøver) blev<br />

testet, herunder:<br />

• 231 prøver, som var naturligt kontamineret eller ikke<br />

kontamineret med salmonella.<br />

• 29 afføringsprøver, som var kunstigt kontamineret med<br />

salmonella.<br />

Afføringsprøverne blev inokuleret direkte på mediet og<br />

efter berigelse i Selenit F bouillon.<br />

Rektalprøverne blev kun inokuleret efter berigelse i<br />

Selenit F bouillon.<br />

Præstationen blev opnået efter 24 timers inkubation ved<br />

37°C.


chromID <strong>Salmonella</strong> Agar (SM2) 12044 E - da - 2007/09<br />

Næringsstofkapacitet og følsomhed for <strong>Salmonella</strong>detektion:<br />

Fyrre af de 260 undersøgte prøver dannede positive<br />

salmonellakulturer på mindst en af de 3 medier<br />

(identifikation bekræftet).<br />

chromID<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

SM ® ID Andet medium<br />

Følsomhed for<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

detektion<br />

39/40<br />

(98%)<br />

36/40<br />

(90%)<br />

28/40<br />

(70%)<br />

Farvningsspecificitet<br />

Blandt de karakteristiske kolonier, der blev observeret på<br />

hvert af medierne er andelen af kolonier bekræftet som<br />

<strong>Salmonella</strong> som følger:<br />

Farvningsspecif<br />

icitet<br />

chromID<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

39/42<br />

(93%)<br />

SM ® ID Andet<br />

medium<br />

36/50<br />

(72%)<br />

28/29<br />

(97%)<br />

Detektion af laktose (+) <strong>Salmonella</strong>:<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar blev sammenlignet med SM ®<br />

ID-agar<br />

Der blev opnået ni rene laktose (+) <strong>Salmonella</strong>-kulturer.<br />

Syv stammer dannede karakteristiske kolonier på<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar, mens ingen kolonier var<br />

karakteristiske på SM ® ID-agar<br />

BORTSKAFFELSE AF AFFALD<br />

Bortskaf alle brugte eller ubrugte komponenter samt<br />

eventuelle andre kontaminerede materialer efter<br />

procedurer for infektiøse eller potentielt infektiøse<br />

produkter. Det er ethvert laboratoriums ansvar at håndtere<br />

det affald og spildevand, der opstår, i overensstemmelse<br />

med dets art og grad af farlighed, og at behandle og<br />

bortskaffe det (eller få det behandlet og bortskaffet) i<br />

henhold til gældende forskrifter.<br />

LITTERATURHENVISNINGER<br />

1. AGBAN A., OUNANIAN M., LUU-DUC C. et al. – Synthèse<br />

de substrats indigogéniques. Mise en évidence de l’activité<br />

estérasique des <strong>Salmonella</strong>. – Eur. J. Med. Chem., 1990, vol.<br />

25, p. 697-699.<br />

2. DELORME S., SENTA-LOYS A., SAUVONNET V. et al. –<br />

SM ID 2, a new chromogenic medium for isolation, detection<br />

and presomptive identification of <strong>Salmonella</strong>: comparison<br />

with SM ID, Hektoen and four commercially available<br />

chromogenic media. – Poster 933, Glasgow 2003, 13 th<br />

ECCMID.<br />

3. MANAFI M., WILLINGER B. – Comparison of three rapid<br />

methods for identification of <strong>Salmonella</strong> spp. – Lett. Appl.<br />

Microbiol., 1994, vol. 19, p. 328-331.<br />

4. PIGNATO S., GIAMMANCO G., GIAMMANCO G. –<br />

Rambach agar and SM-ID medium sensitivity for presumptive<br />

identification of <strong>Salmonella</strong> subspecies I-VI. - J. Med.<br />

Microbiol., 1995, vol. <strong>43</strong>, p. 68-71.<br />

ATCC er et anvendt, under registrering og/eller indregistreret varemærke tilhørende American Type Culture Collection.<br />

CLSI er et anvendt, under registrering og/eller registreret varemærke tilhørende Clinical and Laboratory Standards Institute, Inc<br />

bioMérieux ® SA<br />

au capital de 12 029 370 €<br />

673 620 399 RCS LYON<br />

5. RUIZ J., NUNEZ M.L., DIAZ J och al. – Comparison of five<br />

plating media for isolation of <strong>Salmonella</strong> species from human<br />

stools. – J. Clin. Microbiol., 1996, vol. 34, p. 686-688.<br />

6. SENTA-LOYS A., SAUVONNET V., ROGER-DALBERT C. –<br />

Impact of SM ID 2, a new chromogenic medium, on<br />

identification and susceptibility results. – Poster n° 642, Paris<br />

2003, 23rd RICAI.<br />

7. Microbiologie des aliments. - Recherche des <strong>Salmonella</strong>.<br />

Méthode de routine. - NF V 08-052 - Mai 97 – AFNOR –<br />

ISSN 0335-3931.<br />

8. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Horizontal<br />

method for the detection of <strong>Salmonella</strong>. – NF EN ISO 6579,<br />

December 2002, ISSN 0335-3931.<br />

SYMBOLFORTEGNELSE<br />

Symbol Betydning<br />

eller <strong>REF</strong> Katalognummer<br />

69280 Marcy-l'Etoile / France<br />

Tel. 33 (0)4 78 87 20 00<br />

Fax 33 (0)4 78 87 20 90<br />

http://www.biomerieux.com<br />

Medicinsk udstyr til in vitrodiagnostik<br />

Producent<br />

Temperaturbegrænsning<br />

Holdbar til<br />

Lotnummer<br />

Se brugsanvisning<br />

Indeholder tilstrækkeligt til "n" test<br />

Beskyttes mod lys<br />

Trykt i Frankrig<br />

bioMérieux, det blå logo, VIDAS, SM og chromID er anvendte, under registrering og/eller indregistrerede varemærker<br />

tilhørende bioMérieux SA eller et af dettes datterselskaber.


<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong>/ <strong>43</strong> <strong>629</strong> 12044 E - pl - 2007/09<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> agar (SM2)<br />

Podoe chromogenne do wybiórczej izolacji i rónicowania rodzaju <strong>Salmonella</strong><br />

chromID <strong>Salmonella</strong> jest now nazw. SM ® ID 2 agar<br />

WPROWADZENIE<br />

Agar chromID <strong>Salmonella</strong> jest podoem wybiórczym i<br />

rónicujcym do wykrywania <strong>Salmonella</strong> w materiaach<br />

klinicznych (ka, materiay pochodzce z odbytu) oraz w<br />

ywnoci zgodnie z normami NF EN ISO 6579 (8) i NF V<br />

08-052 (7).<br />

Zasada wykrywania na agarze chromID <strong>Salmonella</strong><br />

róni si od stosowanej dla podoa SM ® ID (Ref. <strong>43</strong> 291).<br />

Poza tym pozwala on na wykrywanie paeczek <strong>Salmonella</strong><br />

laktozo (+), z wysz specyficznoci zabarwienia.<br />

ZASADA DZIAANIA<br />

Agar chromID <strong>Salmonella</strong> zawiera jako podstaw róne<br />

odywcze peptony oraz 3 substraty chromogenne, co<br />

umoliwia:<br />

• wzrost wszystkich <strong>Salmonella</strong>.<br />

• wykrywanie aktywnoci specyficznych enzymów.<br />

Rónicowanie <strong>Salmonella</strong>, w tym laktozo (+) <strong>Salmonella</strong>,<br />

opiera si na nastpujcych zasadach: spontanicznym<br />

zabarwieniu na kolor blado róowy do fioletowo-róowego<br />

szczepów wytwarzajcych esteraz.<br />

Inne rosnce szczepy bakterii wytwarzaj kolonie<br />

w odmiennych kolorach.<br />

Wzrost wikszoci bakterii Gram (+) i drodaków jest<br />

zahamowany dziki obecnoci mieszaniny wybiórczej.<br />

ZAWARTO ZESTAWU<br />

Podoe gotowe do uycia<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>621</strong> Opakowanie na 2x10 pytek (90 mm)<br />

<strong>REF</strong> <strong>43</strong> <strong>629</strong> Opakowanie na 10x10 pytek (90 mm)<br />

SM2 *<br />

* Wydrukowano na kadej pytce<br />

SKAD<br />

Teoretyczna zawarto skadników.<br />

Podoe to moe by dostosowywane i/lub uzupeniane zgodnie<br />

z wymaganymi kryteriami:<br />

Peptony (woowe lub wieprzowe)....................................................6.25 g<br />

Tris .................................................................................................0.16 g<br />

Laktoza (woowa).................................................................................6 g<br />

Sole óci (woowe lub owcze) ..........................................................1.5 g<br />

Mieszanina chromogenna...............................................................9.63 g<br />

NaCl ....................................................................................................5 g<br />

Mieszanina wybiórcza......................................................................0.03g<br />

Agar...................................................................................................14 g<br />

Oczyszczona woda...............................................................................1 l<br />

pH 7.3<br />

WYPOSAENIE WYMAGANE NIE NALECE DO<br />

ZESTAWU<br />

• Inkubator bakteriologiczny.<br />

bioMérieux ® SA Polski - 1<br />

IVD<br />

ODCZYNNIKI UZUPENIAJCE<br />

• Bulion seleninowy F (Ref. 42 099).<br />

• Bulion Rappaport (Ref. 42 091).<br />

• Bulion Rappaport-Vassiliadis (Ref. 42 0<strong>43</strong>).<br />

• Bulion seleninowo-cysteinowy (Ref. 42 052).<br />

• Bulion sojowy Rappaport-Vassiliadis (Ref. 42 110).<br />

• Bulion Muller-Kauffmanna z tetrationianem<br />

i nowobiocyn (Ref. 42 114).<br />

• VIDAS ® ICS (Ref. 30 <strong>43</strong>5)<br />

RODKI OSTRONOCI<br />

• Do diagnostyki in vitro i kontroli mikrobiologicznej.<br />

• Do wykorzystania wycznie przez profesjonalistów.<br />

• Produkt zawiera materiay pochodzenia zwierzcego.<br />

wiadectwo pochodzenia i/lub stanu sanitarnego<br />

zwierzt nie gwarantuje w peni nieobecnoci czynników<br />

chorobotwórczych. Dlatego naley obchodzi si z nim<br />

zgodnie z zasadami postpowania z materiaem<br />

potencjalnie zakanym (nie spoywa i nie wdycha).<br />

• Wszystkie próbki pobrane od pacjentów, hodowle<br />

bakteryjne i wykorzystane produkty s potencjalnie<br />

zakane i powinny by traktowane zgodnie z zalecanymi<br />

rodkami ostronoci. Naley stosowa techniki<br />

aseptyczne i zwyke procedury obowizujce przy pracy<br />

ze szczepami bakteryjnymi zgodnie z "CLSI ® M29-A,<br />

Protection of Laboratory Workers From occupationally<br />

Acquired Infections; Approved Guideline – Bieca<br />

wersja". Dodatkowe rodki ostronoci zawarte s w<br />

"Biosafety in Microbiological and Biomedical<br />

Laboratories, – CDC/NIH – Ostatnie wydanie", lub<br />

regulowane przepisami waciwymi dla poszczególnych<br />

pastw.<br />

• Podoa hodowlane nie powinny by wykorzystywane<br />

jako materia do produkcji lub skadniki.<br />

• Nie uywa pytek przeterminowanych.<br />

• Nie uywa podoy, jeli opakowanie jest uszkodzone.<br />

• Nie uywa przeronitych lub wyschnitych pytek.<br />

• W interpretacji wyników testu naley wzi pod uwag<br />

histori choroby pacjenta, miejsce pobrania materiau,<br />

makro- i mikroskopow morfologi oraz jeli bdzie<br />

konieczne, wyniki innych przeprowadzonych testów.<br />

• Osoby z zaburzeniami percepcji kolorów mog mie<br />

problemy ze stosowaniem podoa.<br />

• W celu osignicia odpowiednich wyników naley<br />

stosowa procedur zawart w opakowaniu. Kada<br />

modyfikacja procedury moe wpywa na wyniki.<br />

PRZECHOWYWANIE<br />

• Pytki przechowywa w pudeku w temperaturze<br />

2-8°C do upynicia daty wanoci.<br />

• Jeli nie s w pudeku, pytki mog by przechowywane<br />

przez 2 tygodnie w 2-8°C w opakowaniach<br />

celofanowych.<br />

• Chroni przed wiatem.


chromID <strong>Salmonella</strong> agar (SM2) 12044 E - pl - 2007/09<br />

MATERIA DO BADA<br />

Zastosowanie w mikrobiologii klinicznej<br />

Na podoe posiewa si bezporednio ka (pynny ka lub<br />

jego zawiesin w jaowej soli fizjologicznej), materiay<br />

pochodzce z odbytu lub poddane przednamnaaniu<br />

w bulionie.<br />

Naley respektowa zasady dobrej praktyki laboratoryjnej<br />

dotyczce pobierania i transportu materiau.<br />

Zastosowanie w mikrobiologii ywnoci<br />

Postpowa zgodnie z obowizujcymi normami<br />

dotyczcymi pobierania i opracowywania materiau.<br />

SPOSÓB WYKONANIA<br />

Zastosowanie w mikrobiologii klinicznej:<br />

Wykrywanie <strong>Salmonella</strong> na agarze chromID <strong>Salmonella</strong><br />

odbywa si zgodnie ze zwyk procedur hodowli kau:<br />

1. Doprowadzi pytki do temperatury pokojowej.<br />

2. Na agar chromID <strong>Salmonella</strong> posia materia<br />

bezporednio lub po jego przednamnoeniu na<br />

bulionie Rappaport albo seleninowym F.<br />

3. Inkubowa w temperaturze 37°C przykrywk do dou<br />

w warunkach tlenowych. Uytkownik jest<br />

odpowiedzialny za wybór waciwej temperatury<br />

inkubacji, zgodnie z zamierzeniami i obowizujcymi<br />

standardami. Hodowle s na ogó oceniane po 18-24<br />

godzinach inkubacji. W niektórych przypadkach moe<br />

by konieczne przeduenie czasu inkubacji.<br />

Zastosowanie w mikrobiologii ywnoci:<br />

Podoe odpowiada uproszczonemu schematowi<br />

postpowania zawartemu w normie NF EN ISO 6579 (8)<br />

i NF-V 08-52 (7) dla wykrywania <strong>Salmonella</strong> w ywnoci.<br />

Zgodnie z norm NF EN ISO 6579 (8), izolacja na agarze<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> powinna by prowadzona<br />

równolegle z hodowl na agarze XLD, po<br />

przednamnoeniu w buforowanej wodzie peptonowej i<br />

namnoeniu w bulionie sojowym Rappaport-Vassiliadis i<br />

bulionie Muller-Kauffmanna<br />

z tetrationianem i nowobiocyn.<br />

1. Doprowadzi pytki do temperatury pokojowej.<br />

2. Posia materia z kadego z 2 bulionów na 2 odrbne<br />

pytki.<br />

3. Inkubowa w temperaturze 35 - 37°C przykrywk do<br />

dou w warunkach tlenowych.<br />

Hodowle s na ogó oceniane po 18-24 godzinach<br />

inkubacji.<br />

Agar chromID <strong>Salmonella</strong> jest równie zatwierdzony do<br />

uycia<br />

w tecie immunokoncentracji <strong>Salmonella</strong> w systemie<br />

VIDAS (VIDAS ® ICS).<br />

ODCZYT I INTERPRETACJA<br />

• Po inkubacji obserwowa wzrost bakterii.<br />

• Zanotowa obecno charakterystycznych dla<br />

<strong>Salmonella</strong> kolonii: kolonie blado róowe do fioletoworóowych.<br />

• Identyfikacja wyizolowanych mikroorganizmów musi by<br />

potwierdzona testami biochemicznymi i/lub<br />

immunologicznymi (6).<br />

bioMérieux ® SA Polski - 2<br />

KONTROLA JAKOCI<br />

Protokó:<br />

Waciwoci odywcze podoa mona sprawdza przy<br />

uyciu nastpujcego szczepu:<br />

• <strong>Salmonella</strong> Typhimurium ATCC ® 14028<br />

Zakres spodziewanych wyników:<br />

Szczep Wyniki w 33-37°C<br />

<strong>Salmonella</strong> Typhimurium<br />

ATCC ® Wzrost po Kolonie<br />

14028 24 godzinach róowe do<br />

róowofioletowych<br />

Uwaga :<br />

Obowizkiem uytkownika jest prowadzenie kontroli<br />

jakoci biorc pod uwag zamierzony sposób<br />

wykorzystania podoa i zgodno z lokalnymi przepisami<br />

(czstotliwo, liczba szczepów, temperatura inkubacji…).<br />

OGRANICZENIA TESTU<br />

• Podczas wzrostu niektórych drobnoustrojów mona<br />

obserwowa biay precypitat. Nie jest on<br />

charakterystyczny dla kolonii <strong>Salmonella</strong>.<br />

• Niektóre serotypy <strong>Salmonella</strong> (szczególnie <strong>Salmonella</strong><br />

Dublin, <strong>Salmonella</strong> Abortusovis, <strong>Salmonella</strong> Gallinarum)<br />

mog dawa sabe zabarwienie lub wybarwia si<br />

z opónieniem.<br />

• Niektóre Gram (-) paeczki inne ni <strong>Salmonella</strong> mog<br />

rosn w postaci charakterystycznych kolonii. Dlatego<br />

naley przeprowadzi pen identyfikacj przy uyciu<br />

dodatkowych testów.<br />

• Niektóre próbki kau mog zawiera woln esteraz, co<br />

prawdopodobnie spowoduje zabarwienie podoa<br />

w momencie posiewu na kolor róowy do róowofioletowego.<br />

• W zalenoci od wraliwoci szczepów na czynniki<br />

wybiórcze, niektóre bakterie Gram (+) lub drodaki<br />

mog urosn na tym podou.<br />

• Wzrost zaley od indywidualnych wymaga kadego<br />

mikroorganizmu. Moe zdarzy si, e jaki szczep<br />

<strong>Salmonella</strong> o specyficznych wymaganiach nie wyronie.<br />

• W zalenoci od badanego materiau, zaleca si<br />

stosowanie agaru chromID <strong>Salmonella</strong> w poczeniu z<br />

innymi podoami przeznaczonymi do hodowli kau (np.<br />

agary Campylosel, Yersinia, Clostridium difficile, itp.).<br />

• W mikrobiologii ywnoci zaleca si stosowa agar<br />

chromID <strong>Salmonella</strong> w poczeniu z podoami<br />

wskazanymi<br />

w odpowiednich normach.<br />

• Agar chromID <strong>Salmonella</strong> oceniano dla<br />

podstawowych produktów spoywczych i duej liczby<br />

szczepów bakteryjnych. Z uwagi na wielk<br />

rónorodno produktów ywnociowych, odmienno<br />

procesów produkcji oraz flory mikrobiologicznej, naley<br />

sprawdzi, czy agar chromID <strong>Salmonella</strong> jest<br />

waciwym podoem dla badanego produktu.<br />

OCENA TESTU<br />

Walidacja dla uycia materiaów badanych<br />

Agar chromID <strong>Salmonella</strong> porównywano z agarem SM ®<br />

ID i innym podoem chromogennym.<br />

Badaniu poddano 260 materiaów klinicznych (ka<br />

i materiay pochodzce z odbytu), w tym:<br />

231 materiaów naturalnie zawierajcych lub nie<br />

<strong>Salmonella</strong>.


chromID <strong>Salmonella</strong> agar (SM2) 12044 E - pl - 2007/09<br />

• 29 kaów „ujemnych”, do których wtórnie dodano<br />

paeczek <strong>Salmonella</strong>.<br />

Próbki kau posiewano na podoa bezporednio i po<br />

namnoeniu w bulionie seleninowym F.<br />

Materiay z odbytu posiewano wycznie po<br />

namnoeniu w bulionie seleninowym F.<br />

Ocen przeprowadzono po inkubacji przez 24 godz.<br />

w temperaturze 37°C.<br />

Waciwoci odywcze i czuo wykrywania<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

Czterdzieci z 260 przebadanych materiaów dao<br />

dodatnie hodowle w kierunku <strong>Salmonella</strong> na<br />

przynajmniej<br />

identyfikacja).<br />

jednym z 3 podoy (potwierdzona<br />

chromID<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

SM ® ID Inne podoe<br />

Czuo<br />

wykrywania<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

39/40<br />

(98%)<br />

36/40<br />

(90%)<br />

28/40<br />

(70%)<br />

Specyficzno zabarwienia<br />

Wród charakterystycznych kolonii obserwowanych na<br />

podoach, proporcja kolonii potwierdzonych jako<br />

<strong>Salmonella</strong> jest nastpujca:<br />

chromID<br />

<strong>Salmonella</strong><br />

= SM ® ID 2<br />

SM ® ID Inne podoe<br />

Specyficzno<br />

zabarwienia<br />

39/42<br />

(93%)<br />

Wykrywanie laktozo (+) <strong>Salmonella</strong>:<br />

36/50<br />

(72%)<br />

28/29<br />

(97%)<br />

Agar chromID <strong>Salmonella</strong> porównywano z agarem<br />

SM ® ID.<br />

Uzyskano 9 czystych hodowli laktozo (+) <strong>Salmonella</strong>. 7<br />

szczepów wytworzyo charakterystyczne kolonie na<br />

agarze chromID <strong>Salmonella</strong>, podczas gdy nie<br />

otrzymano charakterystycznych kolonii na agarze SM ®<br />

ID agar.<br />

POSTPOWANIE ZE ZUYTYMI TESTAMI<br />

Zuytych i niezuytych odczynników, jak<br />

i zanieczyszczonych sprztów jadnorazowych, naley<br />

pozbywa si zgodnie z procedurami dla materiaów<br />

zakanych lub potencjalnie zakanych. Obowizkiem<br />

kadego laboratorium jest pozbywanie si zuytych<br />

testów i wytworzonych cieków w zalenoci od ich<br />

typu i stopnia zabezpieczenia laboratorium oraz<br />

dezynfekowanie ich i usuwanie (zlecenie dezynfekcji<br />

i usuwania) zgodnie z zatwierdzonymi procedurami.<br />

ATCC jest znakiem towarowym uywanym, w trakcie rejestracji lub zastrzeonym, nalecym do American Type Culture Collection.<br />

CLSI jest znakiem towarowym uywanym, w trakcie rejestracji lub zastrzeonym, nalecym do Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.<br />

bioMérieux ® SA<br />

au capital de 12 029 370 €<br />

673 620 399 RCS LYON<br />

PIMIENNICTWO<br />

1. AGBAN A., OUNANIAN M., LUU-DUC C. et al. – Synthèse<br />

de substrats indigogéniques. Mise en évidence de l’activité<br />

estérasique des <strong>Salmonella</strong>. – Eur. J. Med. Chem., 1990,<br />

vol. 25, p. 697-699.<br />

2. DELORME S., SENTA-LOYS A., SAUVONNET V. et al. –<br />

SM ID 2, a new chromogenic medium for isolation,<br />

detection and presomptive identification of <strong>Salmonella</strong>:<br />

comparison with SM ID, Hektoen and four commercially<br />

available chromogenic media. – Poster 933, Glasgow<br />

2003, 13 th ECCMID.<br />

3. MANAFI M., WILLINGER B. – Comparison of three rapid<br />

methods for identification of <strong>Salmonella</strong> spp. – Lett. Appl.<br />

Microbiol., 1994, vol. 19, p. 328-331.<br />

4. PIGNATO S., GIAMMANCO G., GIAMMANCO G. –<br />

Rambach agar and SM-ID medium sensitivity for<br />

presumptive identification of <strong>Salmonella</strong> subspecies I-VI. –<br />

J. Med. Microbiol., 1995, vol. <strong>43</strong> , p. 68-71.<br />

5. RUIZ J., NUMEZ M.L., DIAZ J and al. – Comparison of five<br />

plating media for isolation of <strong>Salmonella</strong> species from<br />

human stools. – J. Clin. Microbiol., 1996, vol. 34, p. 686-<br />

688.<br />

6. SENTA-LOYS A., SAUVONNET V., ROGER-DALBERT C.<br />

– Impact of SM ID 2, a new chromogenic medium, on<br />

identification and susceptibility results. – Poster n° 642,<br />

Paris 2003, 23rd RICAI.<br />

7. Microbiologie des aliments. - Recherche des <strong>Salmonella</strong>.<br />

Méthode de routine. - NF V 08-052 - Mai 97 – AFNOR –<br />

ISSN 0335-3931.<br />

8. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Horizontal<br />

method for the detection of <strong>Salmonella</strong>. – NF EN ISO<br />

6579, December 2002, ISSN 0335-3931.<br />

TABELA SYMBOLI<br />

Symbol Znaczenie<br />

lub <strong>REF</strong><br />

69280 Marcy-l'Etoile / France<br />

Tel. 33 (0)4 78 87 20 00<br />

Fax 33 (0)4 78 87 20 90<br />

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Wyrób do diagnostyki In Vitro<br />

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Przestrzega zakresu temperatury<br />

Uy przed<br />

Kod partii<br />

Sprawd w instrukcji obsugi<br />

Wystarczy na wykonanie <br />

testów<br />

Chroni przed witaem<br />

Wydrukowano we<br />

Francji<br />

bioMérieux, jego niebieskie logo i VIDAS,SM, chromID s znakami towarowymi uywanymi, w trakcie rejestracji i/lub<br />

zastrzeonymi, nalecym do bioMérieux SA lub jednego z przedstawicielstw.

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