Deutsche Tagung f ¨ur Forschung mit ... - SNI-Portal

Methoden und Instrumentierung Poster: Mi., 14:00–16:30 M-P5
Synchrotronstrahlung und Untersuchung von Proteinen mittels Zirkulardichroismus-Spektroskopie
im fernen UV
Peter Baumgärtel 1 , Ben Schuler 2 , Gerd Reichardt 3 , Olgica Bakajin 4 , Jan
Lengefeld 1 , Avinash Kane 4 , Armin Hoffmann 2 , Robert Seckler 1
1 Universität Potsdam, Physikalische Biochemie, Karl-Liebknecht-Str. 24, 14476 Golm –
2 Universität Zürich, Biochemisches Institut, Winterthurerstrasse 190, CH-8057 Zürich
– 3 BESSY, Albert-Einstein-Str. 15, 12489 Berlin – 4 Lawrence Livermore National Laboratory,
BioSecurity and Nanosciences Laboratory, Livermore, CA USA
Zirkulardichroismus-Spektroskopie (CD) im fernen UV ist eine etablierte Methode zur
Untersuchung von Proteinen. Aus einem Spektrum lässt sich der Sekundärstrukturgehalt
eines Proteins berechnen. Mit Hilfe der ” stopped-“ oder ” continous-flow“ Technik
kann zudem der Faltungszustand des Proteins zeitaufgelöst abgebildet werden.
Der hierzu benötigte Spektralbereich im fernen UV (300 bis 130 nm) legt es nahe,
Synchrotronstrahlung als Lichtquelle zu nutzen. Bei BESSY II konnte bereits eine
Messkammer in Betrieb genommen werden. Sie dient unter anderem dazu, den Vorteil
der Synchrotronstrahlung für die Methodik zu sondieren und aufzuzeigen. Ein Vorteil
der Synchrotronstrahlung liegt im erweiterten Spektralbereich bis 130 nm – in Laborgeräten
liegt die untere Grenze bei 170 nm. Die Ergebnisse zeigen, dass der erweiterte
Bereich nur durch die Präparation äußerst dünner Schichten oder getrockneter Proben
zugänglich wird. Bei den Techniken für zeitaufgelöste Messungen sind zudem die
geringe Divergenz und der hohe Photonenfluss der Synchrotronstrahlung von Vorteil.
Sie erlauben es die Zeitauflösung zu verbessern und das Probenvolumen wesentlich zu
verkleinern. Dies wird am Beispiel erster erfolgreicher Messungen, mit dem von uns
entwickelten Mikromixer, dargestellt [1]. Die Messungen zeigen jedoch auch, dass derzeit
bei BESSY II kein für die Methode optimal geeigneter Experimentierplatz zur
Verfügung steht. Eine Lösung für die Zukunft könnte deshalb ein für CD dediziertes
Strahlrohr bei BESSY II sein.
[1] A. Hoffmann et al., eingereicht bei PNAS, Mai 2006