Xây dựng phương pháp định lượng Pantoprazol trong huyết tương bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

LINK DOCS.GOOGLE: https://drive.google.com/file/d/0B_NNtKpVZTUYNWJaM09ud3Q3YVk/view?usp=sharing LINK DOCS.GOOGLE:
https://drive.google.com/file/d/0B_NNtKpVZTUYNWJaM09ud3Q3YVk/view?usp=sharing

daykemquynhon
from daykemquynhon More from this publisher
24.09.2017 Views

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com 39 www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com các kết quả trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> ở mỗi nồng độ đều nhỏ hơn 15%. Như vậy mẫu huyết tương đạt chỉ tiêu độ ổn trong>địnhtrong> dài ngày. * Độ ổn trong>địnhtrong> của mẫu sau xử lý (trong auto-sampler) Pha các mẫu LQC và HQC như mục 2.3.1 và tiến hành như mục 2.3.3.7. Kết quả độ ổn trong>địnhtrong> trong auto-sampler ở 4 o C được trình bày trong bảng 3.14. Mẫu Bảng 3.14: Kết quả độ ổn trong>địnhtrong> của mẫu sau xử lý trong auto-sampler Mẫu LQC ( 90 ng/mL) Nồng độ (ng/mL) Mẫu HQC ( 3500 ng/mL) Tiêm ngay Sau 25 giờ/4 o C Tiêm ngay Sau 25 giờ/4 o C 1 89,5 80,0 3232,0 3237,7 2 98,3 81,5 3252,7 3321,7 3 86,7 81,8 3211,2 3451,2 4 88,7 80,2 3251,7 3437,2 5 87,3 83,8 3248,2 3430,2 6 82,5 83,5 3342,4 3423,2 TB 88,8 81,8 3256,4 3383,5 CV (%) 5,4 1,8 1,3 2,3 Độ lệch (%) -7,9 3,9 Kết quả cho thấy, nồng độ mẫu LQC, HQC của PAN sau khi bảo quản 25 giờ trong auto-sampler sai khác với nồng độ mẫu LQC, HQC tiêm ngay không quá 15% và giá trị CV giữa các kết quả trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> ở mỗi nồng độ đều nhỏ hơn hoặc bằng 15%. Như vậy, mẫu huyết tương đạt độ ổn trong>địnhtrong> của mẫu sau xử lý (trong autosampler). * Nhận xét chung Từ những kết quả thẩm trong>địnhtrong> độ đặc hiệu - chọn lọc, khoảng tuyến tính, giới hạn trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> dưới, độ đúng - độ chính xác, tỷ lệ thu hồi, nghiên cứu độ ổn trong>địnhtrong> thu được ở trên cho thấy trong>phươngtrong> trong>pháptrong> đã được xây trong>dựngtrong> đáp ứng các yêu cầu của một trong>phươngtrong> trong>pháptrong> phân tích dùng trong sinh học. DIỄN ĐÀN TOÁN - LÍ - HÓA 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com 40 www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com 3.3. BÀN LUẬN 3.3.1. Phương trong>pháptrong> xử lý mẫu PAN trong huyết tương Xử lý mẫu giúp loại bỏ một hoặc nhiều thành phần tạp chất có trong mẫu, tạo điều kiện thuận lợi cho quá trình phân tách, trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> PAN bằng trong>phươngtrong> trong>pháptrong> HPLC. Dựa vào đặc tính của PAN, tham khảo một số tài liệu và khảo sát thực tế chúng tôi đã xây trong>dựngtrong> được một trong>phươngtrong> trong>pháptrong> xử lý mẫu dùng trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> PAN trong huyết tương. So với trong>phươngtrong> trong>pháptrong> tủa protein, trong>phươngtrong> trong>pháptrong> xử lý mẫu sử dụng trong khóa luận - chiết lỏng lỏng với dung môi TBME - hiệu suất chiết cao, mẫu thu được ít tạp nên tạo điều kiện tối ưu cho trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> PAN trong huyết tương. 3.3.2. Phương trong>pháptrong> trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> PAN trong huyết tương Phương trong>pháptrong> HPLC trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> PAN trong huyết tương sử dụng trong nghiên cứu này đã được thẩm trong>địnhtrong> theo các chỉ tiêu của US - FDA và EMA bao gồm: độ đặc hiệu - chọn lọc, khoảng tuyến tính, giới hạn trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> dưới, độ đúng - độ chính xác, tỷ lệ thu hồi, nghiên cứu độ ổn trong>địnhtrong>. Với một điều kiện sắc không quá phức tạp, dễ dàng triển khai tại các phòng thí nghiệm của Việt Nam, chất phân tích PAN đã tách hoàn toàn khỏi các thành phần tạp có trong huyết tương với thời gian triển khai sắc là 10 phút. Thời gian triển khai sắc không quá dài cho phép trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> được một số trong>lượngtrong> mẫu lớn trong một ngày, giúp tiết kiệm được thời gian và chi phí, đặc biệt là trong điều kiện hạn hẹp về thiết bị hiện đại và tài chính. Độ ổn trong>địnhtrong> của trong>phươngtrong> trong>pháptrong>: chúng tôi đã tiến hành đánh giá được chỉ tiêu căn bản về độ ổn trong>địnhtrong> của trong>phươngtrong> trong>pháptrong>, cho thấy sự sai khác rất nhỏ giữa nồng độ PAN sau 3 chu kỳ đông rã, sau thời gian 5 giờ ở nhiệt độ phòng và sau thời gian 30, 53, 68 ngày so với dung dịch ngay sau khi pha, đáp ứng yêu cầu trong>phươngtrong> trong>pháptrong> phân tích dịch sinh học. DIỄN ĐÀN TOÁN - LÍ - HÓA 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon<br />

https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn<br />

www.facebook.com/daykem.quynhon<br />

www.daykemquynhon.blogspot.com<br />

40<br />

www.daykemquynhon.ucoz.com<br />

MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com<br />

3.3. BÀN LUẬN<br />

3.3.1. Phương <s<strong>trong</strong>>pháp</s<strong>trong</strong>> xử lý mẫu PAN <strong>trong</strong> <strong>huyết</strong> <strong>tương</strong><br />

Xử lý mẫu giúp loại bỏ một hoặc nhiều thành phần tạp chất có <strong>trong</strong> mẫu, tạo<br />

điều kiện thuận lợi cho quá trình phân tách, <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>lượng</s<strong>trong</strong>> PAN <strong>bằng</strong> <s<strong>trong</strong>>phương</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>pháp</s<strong>trong</strong>><br />

HPLC. Dựa vào đặc tính của PAN, tham khảo một số tài liệu và khảo sát thực tế<br />

chúng tôi đã xây <s<strong>trong</strong>>dựng</s<strong>trong</strong>> được một <s<strong>trong</strong>>phương</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>pháp</s<strong>trong</strong>> xử lý mẫu dùng <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>lượng</s<strong>trong</strong>> PAN<br />

<strong>trong</strong> <strong>huyết</strong> <strong>tương</strong>.<br />

So với <s<strong>trong</strong>>phương</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>pháp</s<strong>trong</strong>> tủa protein, <s<strong>trong</strong>>phương</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>pháp</s<strong>trong</strong>> xử lý mẫu sử dụng <strong>trong</strong> khóa<br />

luận - chiết <strong>lỏng</strong> <strong>lỏng</strong> với dung môi TBME - <strong>hiệu</strong> suất chiết <strong>cao</strong>, mẫu thu được ít tạp<br />

nên tạo điều kiện tối ưu cho <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>lượng</s<strong>trong</strong>> PAN <strong>trong</strong> <strong>huyết</strong> <strong>tương</strong>.<br />

3.3.2. Phương <s<strong>trong</strong>>pháp</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>lượng</s<strong>trong</strong>> PAN <strong>trong</strong> <strong>huyết</strong> <strong>tương</strong><br />

Phương <s<strong>trong</strong>>pháp</s<strong>trong</strong>> HPLC <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>lượng</s<strong>trong</strong>> PAN <strong>trong</strong> <strong>huyết</strong> <strong>tương</strong> sử dụng <strong>trong</strong> nghiên<br />

cứu này đã được thẩm <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> theo các chỉ tiêu của US - FDA và EMA bao gồm: độ<br />

đặc <strong>hiệu</strong> - chọn lọc, khoảng tuyến tính, giới hạn <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>lượng</s<strong>trong</strong>> dưới, độ đúng - độ<br />

chính xác, tỷ lệ thu hồi, nghiên cứu độ ổn <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>>.<br />

Với một điều kiện <strong>sắc</strong> <strong>ký</strong> không quá phức tạp, dễ dàng triển khai tại các phòng<br />

thí nghiệm của Việt Nam, chất phân tích PAN đã tách hoàn toàn khỏi các thành<br />

phần tạp có <strong>trong</strong> <strong>huyết</strong> <strong>tương</strong> với thời gian triển khai <strong>sắc</strong> <strong>ký</strong> là 10 phút. Thời gian<br />

triển khai <strong>sắc</strong> <strong>ký</strong> không quá dài cho phép <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>lượng</s<strong>trong</strong>> được một số <s<strong>trong</strong>>lượng</s<strong>trong</strong>> mẫu lớn<br />

<strong>trong</strong> một ngày, giúp tiết kiệm được thời gian và chi phí, đặc biệt là <strong>trong</strong> điều kiện<br />

hạn hẹp về thiết bị hiện đại và tài chính.<br />

Độ ổn <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> của <s<strong>trong</strong>>phương</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>pháp</s<strong>trong</strong>>: chúng tôi đã tiến hành đánh giá được chỉ tiêu<br />

căn bản về độ ổn <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> của <s<strong>trong</strong>>phương</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>pháp</s<strong>trong</strong>>, cho thấy sự sai khác rất nhỏ giữa nồng độ<br />

PAN sau 3 chu kỳ đông rã, sau thời gian 5 giờ ở nhiệt độ phòng và sau thời gian<br />

30, 53, 68 ngày so với dung dịch ngay sau khi pha, đáp ứng yêu cầu <s<strong>trong</strong>>phương</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>pháp</s<strong>trong</strong>><br />

phân tích dịch sinh học.<br />

DIỄN ĐÀN TOÁN - LÍ - HÓA 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN<br />

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn<br />

Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú<br />

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú<br />

www.facebook.com/daykemquynhonofficial<br />

www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!