Xây dựng phương pháp định lượng Pantoprazol trong huyết tương bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

LINK DOCS.GOOGLE: https://drive.google.com/file/d/0B_NNtKpVZTUYNWJaM09ud3Q3YVk/view?usp=sharing LINK DOCS.GOOGLE:
https://drive.google.com/file/d/0B_NNtKpVZTUYNWJaM09ud3Q3YVk/view?usp=sharing

daykemquynhon
from daykemquynhon More from this publisher
24.09.2017 Views

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com 21 www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com nghiệm, chúng tôi lựa chọn bước sóng phù hợp tiến hành chạy sắc là λ = 291± 2 nm. 3.1.1.2. Lựa chọn nội chuẩn Chất được lựa chọn làm nội chuẩn cần có cấu trúc và tính chất vật lý gần giống với chất phân tích. Dựa trên cấu trúc phân tử và tính chất hóa lý của chất phân tích và các chuẩn sẵn có ở phòng thí nghiệm chúng tôi khảo sát một số chất làm nội chuẩn như: omeprazol, rabeprazol, lansoprazol. Sau đây là các sắc đồ thu được trong quá trình khảo sát IS: Hình 3.2: SKĐ PAN và omeprazol DIỄN ĐÀN TOÁN - LÍ - HÓA 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú Hình 3.3: SKĐ PAN và rabeprazol Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com 22 www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com 70 mAU 290nm,4nm (1.00) 60 50 40 30 20 10 0 -10 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 min Hình 3.4: SKĐ PAN và lansoprazol Với nội chuẩn là omeprazol và rabeprazol ta thu được sắc đồ có thời gian lưu của chất phân tích và nội chuẩn gần nhau làm cho sắc đồ chồng lên nhau không tách ra được nên việc trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> PAN với nội chuẩn omeprazol và rabeprazol sẽ gây khó khăn trong quá trình trong>địnhtrong> trong>lượngtrong>. Với nội chuẩn là lansoprazol, ta thấy thời gian chạy sắc phù hợp(nhỏ hơn 10 phút), pic chất phân tích và nội chuẩn tách nhau rõ ràng. Do đó ta lựa chọn lansoprazol làm chất nội chuẩn cho việc trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> PAN trong huyết tương. 3.1.1.3. Lựa chọn cột sắc Do PAN là chất ít phân cực nên nếu tiến hành sắc pha thuận sẽ làm thời gian chạy sắc kéo dài gây khó khăn cho quá trình phân tích. Tiến hành phân tích trên hệ sắc pha đảo: chất phân tích ít phân cực và pha động phân cực. Trong pha đảo, sử dụng hai loại cột chủ yếu là cột C8 và C18. Tuy nhiên, trong điều kiện phòng thí nghiệm của chúng tôi chỉ có cột C18 nên chúng tôi lựa chọn sử dụng cột C18. Ta tiến hành khảo sát cột C18 với các độ dài cột khác nhau: 100 mm, 150 mm, 250 mm. Với loại cột dài 100 mm, 150 mm, do chiều dài cột ngắn nên khi phân tích mẫu, pic chất phân tích và nội chuẩn không tách nhau hoàn toàn (Rs < 1,5). Kết hợp tham khảo một số tài liệu trong>địnhtrong> trong>lượngtrong> PAN trong dịch sinh học, chúng tôi tiến hành khảo sát trên cột sắc Rp18 (250 x 4,6 mm; 5 µm) với bảo vệ cột Rp18 (4 x 3 mm; 5µm) kết quả thực nghiệm thấy cột Rp18 có khả năng tách tốt và chọn lọc PAN ra khỏi mẫu phân tích (hình 3.4). DIỄN ĐÀN TOÁN - LÍ - HÓA 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN trong>Pantoprazoltrong>/5.430 IS/8.796 Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/daykemquynhonofficial www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

www.twitter.com/daykemquynhon<br />

https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn<br />

www.facebook.com/daykem.quynhon<br />

www.daykemquynhon.blogspot.com<br />

22<br />

www.daykemquynhon.ucoz.com<br />

MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com<br />

70 mAU<br />

290nm,4nm (1.00)<br />

60<br />

50<br />

40<br />

30<br />

20<br />

10<br />

0<br />

-10<br />

0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 min<br />

Hình 3.4: SKĐ PAN và lansoprazol<br />

Với nội chuẩn là omeprazol và rabeprazol ta thu được <strong>sắc</strong> <strong>ký</strong> đồ có thời gian<br />

lưu của chất phân tích và nội chuẩn gần nhau làm cho <strong>sắc</strong> <strong>ký</strong> đồ chồng lên nhau<br />

không tách ra được nên việc <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>lượng</s<strong>trong</strong>> PAN với nội chuẩn omeprazol và<br />

rabeprazol sẽ gây khó khăn <strong>trong</strong> quá trình <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>lượng</s<strong>trong</strong>>.<br />

Với nội chuẩn là lansoprazol, ta thấy thời gian chạy <strong>sắc</strong> <strong>ký</strong> phù hợp(nhỏ hơn<br />

10 phút), pic chất phân tích và nội chuẩn tách nhau rõ ràng. Do đó ta lựa chọn<br />

lansoprazol làm chất nội chuẩn cho việc <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>lượng</s<strong>trong</strong>> PAN <strong>trong</strong> <strong>huyết</strong> <strong>tương</strong>.<br />

3.1.1.3. Lựa chọn cột <strong>sắc</strong> <strong>ký</strong><br />

Do PAN là chất ít phân cực nên nếu tiến hành <strong>sắc</strong> <strong>ký</strong> pha thuận sẽ làm thời<br />

gian chạy <strong>sắc</strong> <strong>ký</strong> kéo dài gây khó khăn cho quá trình phân tích.<br />

Tiến hành phân tích trên hệ <strong>sắc</strong> <strong>ký</strong> pha đảo: chất phân tích ít phân cực và pha<br />

động phân cực. Trong pha đảo, sử dụng hai loại cột chủ yếu là cột C8 và C18. Tuy<br />

nhiên, <strong>trong</strong> điều kiện phòng thí nghiệm của chúng tôi chỉ có cột C18 nên chúng tôi<br />

lựa chọn sử dụng cột C18. Ta tiến hành khảo sát cột C18 với các độ dài cột khác<br />

nhau: 100 mm, 150 mm, 250 mm. Với loại cột dài 100 mm, 150 mm, do chiều dài<br />

cột ngắn nên khi phân tích mẫu, pic chất phân tích và nội chuẩn không tách nhau<br />

hoàn toàn (Rs < 1,5).<br />

Kết hợp tham khảo một số tài liệu <s<strong>trong</strong>>định</s<strong>trong</strong>> <s<strong>trong</strong>>lượng</s<strong>trong</strong>> PAN <strong>trong</strong> dịch sinh học, chúng<br />

tôi tiến hành khảo sát trên cột <strong>sắc</strong> <strong>ký</strong> Rp18 (250 x 4,6 mm; 5 µm) với bảo vệ cột<br />

Rp18 (4 x 3 mm; 5µm) kết quả thực nghiệm thấy cột Rp18 có khả <strong>năng</strong> tách tốt và<br />

chọn lọc PAN ra khỏi mẫu phân tích (hình 3.4).<br />

DIỄN ĐÀN TOÁN - LÍ - HÓA 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN<br />

<s<strong>trong</strong>>Pantoprazol</s<strong>trong</strong>>/5.430<br />

IS/8.796<br />

Diễn đàn hỗ trợ giáo dục : Đ/C 1000B Trần Hưng Đạo Tp Quy Nhơn<br />

Người sáng lập : Nguyễn Thanh Tuấn - Chủ quản tài nguyên : Nguyễn Thanh Tú<br />

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú<br />

www.facebook.com/daykemquynhonofficial<br />

www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!