HYDRAGEL 7 HR HYDRAGEL 15 HR HYDRAGEL 7 HR HYDRAGEL 15 HR

HYDRAGEL 7 & 15 HR - 2005/03
5. Αφαιρέστε τις ταινίες ρυθµιστικού διαλύµατος από τη συσκευασία τους. Κρατήστε τις από την πλαστική άκρη τους. Προσαρµόστε
την τρυπηµένη άκρη των ταινιών στις ακίδες του φορέα ηλεκτροδίων, το πλαστικό κάλυµµα της ταινίας πρέπει να είναι στραµµένο
προς το φορέα (Εικ. 2).
6. Ανοίξτε τη συσκευασία του HYDRAGEL.
-Περάστε γρήγορα και οµοιόµορφα ένα διηθητικό χαρτί στην επιφάνεια του gel για να απορροφήσει την περίσσεια υγρού.
Αφαιρέστε το χαρτί αµέσως.
ΠΡΟΕΙ∆ΟΠΟΙΗΣΗ: Μην αφήνετε το διηθητικό χαρτί σε επαφή µε το gel επί µακρόν για να µην αφυδατωθεί.
-Εισαγάγετε 120 µL απεσταγµένο ή απιονισµένο ύδωρ για το HYDRAGEL 7 HR ή 200 µL για το HYDRAGEL 15 HR µέχρι το
κατώτερο τρίτο της κλίµακας που είναι τυπωµένη στην Πλάκα Ελέγχου Θερµοκρασίας της µονάδας ηλεκτροφόρησης.
-Τοποθετήστε την πλάκα του gel (µε την επιφάνεια του gel προς τα άνω) µε το άκρο της να αγγίζει το stop στο κάτω τµήµα της
τυπωµένης κλίµακας (Εικ. 3).
-Λυγίστε το gel και χαµηλώστε το επί της επιφάνειας του νερού. (Εικ. 3). Βεβαιωθείτε ότι δεν έχουν παγιδευτεί φυσαλίδες αέρα,
ότι το νερό έχει απλωθεί κάτω από ολόκληρη την πλακέτα του gel και το gel είναι ευθυγραµµισµένο µε την τυπωµένη κλίµακα.
7. Κατεβάστε και τους δύο φορείς. Σε αυτήν τη θέση, οι ταινίες ρυθµιστικού διαλύµατος δεν αγγίζουν το gel. ΜΗΝ ΠΙΕΖΕΤΕ ΤΟΥΣ
ΦΟΡΕΙΣ ΤΕΛΕΙΩΣ ΠΡΟΣ ΤΑ ΚΑΤΩ.
8. Αφαιρέστε τον εφαρµογέα από τον υγρό θάλαµο. Κρατήστε τον από το προστατευτικό κάλυµµα.
-Αποσπάστε το προστατευτικό κάλυµµα των δοντιών του εφαρµογέα.
-Τοποθετήστε τον εφαρµογέα στη θέση No 5 του φορέα.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ: Οι τυπωµένοι αριθµοί στον εφαρµογέα πρέπει να είναι στραµµένοι προς τον χειριστή (Εικ. 4)
9. Κλείστε το καπάκι της µονάδας ηλεκτροφόρησης.
10. Αρχίστε τη διαδικασία αµέσως πιέζοντας το πλήκτρο µε το πράσινο βέλος «START» στην αριστερή πλευρά του πληκτρολογίου.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ: Βεβαιωθείτε ότι η είσοδος αερισµού στη δεξιά πλευρά του οργάνου είναι ελεύθερη.
ΗΛΕΚΤΡΟΦΟΡΗΣΗ – ΠΕΡΙΓΡΑΦΗ ΤΩΝ ΑΥΤΟΜΑΤΟΠΟΙΗΜΕΝΩΝ ΣΤΑ∆ΙΩΝ
• Οι δύο φορείς χαµηλώνουν ώστε οι ταινίες µε το ρυθµιστικό διάλυµα και ο εφαρµογέας να είναι σε επαφή µε την επιφάνεια του gel.
• Ο φορέας του εφαρµογέα σηκώνεται.
• Προγράµµατα ηλεκτροφόρησης “7/15 HR1” και “7/15 HR2”: Η ηλεκτροφόρηση πραγµατοποιείται υπό συνεχή τάση 255 V για το
HYDRAGEL 7 HR και το HYDRAGEL 15 HR, στους 20 °C, µέχρι να συµπληρωθούν 75 Vh, για περίπου 18 min.
• Πρόγραµµα ηλεκτροφόρησης “7/15 HR3”: Η ηλεκτροφόρηση πραγµατοποιείται υπό συνεχή τάση 255 V για το HYDRAGEL 7 HR και το
HYDRAGEL 15 HR, στους 20 °C, µέχρι να συµπληρωθούν 75 Vh, για περίπου 40 Vh, για περίπου 10 min.
• Ο φορέας ηλεκτροδίων ανυψώνεται για να αποσυνδεθούν τα ηλεκτρόδια.
• Η θερµοκρασία της πλακέτας ελέγχου αυξάνεται στους 60 °C για 9 min για να στεγνώσει το gel.
• Η πλακέτα ελέγχου κρυώνει. Όταν φτάσει τους 50 °C, ένας ήχος σηµατοδοτεί το ξεκλείδωµα της µονάδας ηλεκτροφόρησης. Η
θερµοκρασία της πλακέτας ελέγχου παραµένει στους 50 °C µέχρι να ανοιχθεί το καπάκι. Στη συνέχεια η θερµοκρασία συνεχίζει να
πέφτει µέχρι τους 20 °C (σε λιγότερο από 5 min) και στη συνέχεια µπορεί να ακολουθήσει νέα ηλεκτροφόρηση.
ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Το καπάκι της µονάδας ηλεκτροφόρησης παραµένει κλειστό κατά τη διάρκεια όλων των σταδίων της ηλεκτροφόρησης.
II. ΠΡΟΕΤΟΙΜΑΣΙΑ ΤΗΣ ΕΠΕΞΕΡΓΑΣΙΑΣ ΤΩΝ GEL
1. Ανοίξτε το καπάκι.
2. Αφαιρέστε τον εφαρµογέα και πετάξτε τον.
3. Σηκώστε και τους δύο φορείς, αφαιρέστε τις ταινίες ρυθµιστικού διαλύµατος από την πλαστική άκρη τους και πετάξτε τις.
4. Αφαιρέστε το στεγνωµένο gel για περαιτέρω επεξεργασία.
5. Μετά από κάθε χρήση, σκουπίστε τα ηλεκτρόδια και την πλάκα ελέγχου θερµοκρασίας µε µαλακό υγρό πανάκι.
Βεβαιωθείτε ότι τα ηλεκτρόδια και η πλάκα είναι στεγνά µετά από κάθε χρήση.
Τα ηλεκτρόδια πρέπει να καθαρίζονται συστηµατικά µετά από κάθε χρήση.
6. Ανοίξτε τον στατήρα των gel. Τοποθετήστε το στεγνό gel (µε την επιφάνεια του gel προς τα άνω) στις αύλακες και κλείστε τον
στατήρα. Βεβαιωθείτε ότι το film είναι σωστά τοποθετηµένο µέσα στον στατήρα (Εικ. 5).
7. Τοποθετήστε τον στατήρα στη Μονάδα Επεξεργασίας / Χρώσης των gel.
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ: Πριν την έναρξη της επεξεργασίας / χρώσης των gel, ελέγξτε τα ακόλουθα:
-ο περιέκτης χρώσης είναι γεµάτος µε 300 mL χρωστικού διαλύµατος,
-ο περιέκτης διαλύµατος αποχρωµατισµού περιέχει τουλάχιστον 1 λίτρο διαλύµατος αποχρωµατισµού,
-ο περιέκτης αχρήστων είναι κενός.
Για τη σύνδεση των γραµµών των αντιδραστηρίων: ανατρέξτε στις πληροφορίες που εµφανίζονται στην οθόνη του οργάνου
(επιλέξτε: REAGENT LINES).
ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ: Μην ξεχνάτε να αποφράσσετε τις µη χρησιµοποιούµενες γραµµές.
8. Επιλέξτε το πρόγραµµα χρώσης «HR ACID VIOLET» ή «HR AMIDO» από το µενού του οργάνου και αρχίστε τη διαδικασία πατώντας
το πλήκτρο «START» (πράσινο βέλος στη δεξιά πλευρά του πληκτρολογίου).
Κατά τα στάδια χρώσης, αποχρωµατισµού και στεγνώµατος, η µονάδα παραµένει κλειδωµένη.
Μετά το στάδιο ψύξης, ένας ήχος σηµατοδοτεί το ξεκλείδωµα της µονάδας (ο αερισµός διατηρείται µέχρι την αφαίρεση του
στατήρα των gel).
III. ΟΛΟΚΛΗΡΩΣΗ ΤΗΣ ΕΠΕΞΕΡΓΑΣΙΑΣ ΤΩΝ GEL
1. Αφαιρέστε τον στατήρα των gel από τη µονάδα, ανοίξτε τον και αφαιρέστε το στεγνό gel.
ΣΗΜΕΙΩΣΗ : Μετά τη χρώση / αποχρωµατισµό και πριν τη σάρωση, το gel µπορεί να υποβληθεί σε ένα επιπλέον βήµα πλύσης, αν
χρειάζεται, για τον καλύτερο καθαρισµό του background του gel και την αποµάκρυνση υπολειπόµενης χρωστικής που µπορεί να
παραµένει ως µπλε κηλίδες. Πλύνετε το gel χρησιµοποιώντας το πρόγραµµα “ WASH ISOENZ/GEL”.
2. Αν χρειάζεται, καθαρίστε την πίσω (πλαστική) επιφάνεια του στεγνού φιλµ µε υγρό χαρτί.
3. ∆ιαβάστε οπτικά τα ηλεκτροφορήµατα για τυχόν ανωµαλίες. Οι οπτικές παρατηρήσεις µπορεί να συµπληρωθούν µε πυκνοµέτρηση
στα 570 nm ή µε κίτρινο φίλτρο για την παροχή ηµιποσοτικών σχετικών τιµών για µεµονωµένα ή συνδυασµένα πρωτεϊνικά
κλάσµατα.
- 69 -