HYDRAGEL 7 HR HYDRAGEL 15 HR HYDRAGEL 7 HR HYDRAGEL 15 HR

HYDRAGEL 7 & 15 HR - 2005/03
III. VOLTOOIING VAN DE GEL-VERWERKING
1 Haal de gel-houder uit het compartiment, open hem en haal de gedroogde gel eruit.
LET OP: Na het kleuren of ontkleuren van gels en voorafgaand aan densitometrie of scannen, kunt u een extra spoelfase van de gel toevoegen
om de achtergrond nog duidelijker te maken en eventueel resterende kleurstof in de vorm van blauwe vlekjes, te verwijderen. Spoel de gel
met behulp van het "WASH ISOENZ/GEL"-programma.
2. Zonodig kunt u de achterkant (de zijde van de plastic steun) van de droge film schoonmaken met een enigszins vochtig, zacht papiertje.
RESULTATEN
Kwaliteitscontrole
Het wordt aangeraden om een normaal monster of een controleserum (Control serum, SEBIA, PN 4785) in elke serie monsters op te nemen.
Waarden (kwantitatieve analyse)
Scannen met een densitometer (bij 570 nm) van gekleurde elektroforegrammen levert de relatieve concentraties (percentages) van de afzonderlijke
proteïne zones op.
Normale waarden (gemiddeld ± 2 SD) voor de belangrijke afzonderlijke elektroforetische serum proteïne zones op HYDRAGEL 7/15 HR gels zijn
verkregen uit een gezonde populatie van 225 volwassenen (mannen en vrouwen):
FRACTIE HYRYS PHORESIS Albumine 56.2 – 69.0 57.5 – 67.9 Alfa-1 globulinen 1.2 – 3.2 1.0 – 3.8 Alfa-2 globulinen 7.8 – 13.4 7.2 – 12.8 Beta globulinen 7.4 – 13.4 7.6 – 13.6
| Gamma globulinen | 9.8 – 18.6 | 10.3 – 18.3 |
Het wordt aanbevolen dat elk laboratorium zijn eigen normale waarden vast stelt.
Interpretatie
De interpretatie is kwalitatief.
SERUM-PROTEINE (6)
De interpretatie wordt uitgevoerd door de elektroforegrammen van het klinische monster te vergelijken met een normaal controlepreparaat. In het geval
van een toegenomen, afgenomen of extra fractie is het doorgaans nodig om de geconstateerde veranderingen te bevestigen met behulp van andere
tests, zoals kwantificatie van specifieke proteïnen, immuno-elektroforese of immunofixatie.
Onder de zeer talrijke plasmaproteïnen zijn er slechts ongeveer vijftien die in voldoende kwantiteit voorkomen om gevisualiseerd te worden op High
Resolution gels. Wat HYDRAGEL 7/15 HR gel zo waardevol maakt is zijn gevoeligheid in de kathode-zone, waardoor detectie van zwakke
monoclonale of oligoclonale banden mogelijk wordt. De interpretatie is in principe kwalitatief.
LIQUOR CEREBROSPINALIS PROTEINEN
Iedere extra band die gedetecteerd wordt in de gamma-zone van CSF, zonder dat daar een corresponderende fractie in het serum tegenover staat,
dient bevestigd te worden door middel van een immunofixatie-procedure (HYDRAGEL 3/6 CSF SEBIA of SEBIA immunofixatie kits, HYDRAGEL
1/2/4/9 IF SEBIA) teneinde de intrathecale synthese te karakteriseren. De immunologische bevestiging is noodzakelijk omdat het mogelijk is dat er in
de gamma-zone nog andere banden worden gedetecteerd dan immunoglobulinen (tau-fractie, koolzuur-anhydrase, post-gamma of CRP,
bijvoorbeeld).
Opmerking : De interpretatie is strikt vergelijkend. Het is dus absoluut noodzakelijk om:
- biologische vloeistoffen (CSF / serum) te analyseren die tegelijkertijd verzameld zijn zonder dat er sprake is van enige behandeling die de
concentratie van Ig G in het serum zou kunnen doen veranderen.
- ervoor te zorgen dat de hoeveelheden proteïnen of immunoglobulinen van de beide toe te passen monsters exact gelijk zijn. Het is dus noodzakelijk
om van tevoren kwantificatie uit te voeren met een degelijke mate van nauwkeurigheid en met de daartoe aangewezen reagentia.
Liquor cerebrospinalis (CSF) is een biologische vloeistof met een lage concentratie proteïnen. De hoeveelheid proteïnen in normale CSF is ongeveer
0,30 g/l ± 0,15. De meerderheid van de CSF-proteïnen is afkomstig van het serum van waaruit ze worden gefilterd en getransporteerd door de bloed
- CSF barrière. Voor analyse op HYDRAGEL 7/15 HR gels dient de CSF te worden geconcentreerd tot ongeveer 10 g/l.
Een normaal CSF-patroon vertoont de volgende zone-volgorde:
• Pre-albumine, of transthyretine, de snelste fractie ;
• Albumine, de meestvoorkomende fractie, die ongeveer 75 % vertegenwoordigt van het totaal aan proteïnen ;
• Alfa-1 zone, die hoofdzakelijk bestaat uit alfa-1 antitrypsine ;
• Alfa lipoproteïne ;
• Alfa-2 zone, die voornamelijk proteïnen bevat met een hoog moleculair gewicht, en die dus zeer zwak is aangezien proteïnen niet door de bloed -
CSF barrière heen kunnen ;
• Bèta-fractie, die transferrine bevat ;
• Bèta-2 zone, die hoofdzakelijk «CSF-specifiek» transferrine bevat, de tau-fractie, een vorm van transferrine met een tekort aan koolhydraten
(sialzuur) ;
• Gamma-zone, die in principe Ig G bevat en soms Ig A en Ig M.
Bij veel studies is een toename aangetoond van immunoglobulinen afkomstig van een synthese binnen het centraal zenuwstelsel. Er is tot op heden
nog geen verklaring gevonden voor de antigene stimulatie van deze Ig G-productie. Wel zijn er hypothesen naar voren gebracht die spreken over een
virus-infectie en auto-immuunreacties.
Afgezien van multipele sclerose kan er een toename aan Ig G worden gedetecteerd bij demyelinating infantile disease, subacute scleroserende
panencephalitis en ook bij andere ontstekingsreacties en infectieziekten.
- 30 -