HYDRAGEL HEMOGLOBIN(E) K20

HYDRAGEL HEMOGLOBIN(E) K20 - 2005/03
2. Kwantitatieve afwijkingen: thalassemie
Thalassemie omvat een vrij heterogene groep genetische afwijkingen die gekarakteriseerd worden door een afgenomen synthese van een type van
de polypeptideketens. Het moleculaire mechanisme achter deze afname is nog niet geheel beschreven.
Er zijn twee typen thalassemie-syndroom bekend:
Alfa-thalassemie
Deze worden gekarakteriseerd door een afname van de synthese van de α-ketens, hetgeen vervolgens de synthese van de 3 fysiologische
hemoglobinen aantast. Het exces aan synthese van ß- en α-ketens ten opzichte van α-ketens zorgt voor de vorming van tetrameren zonder α-keten.
• hemoglobine Bart = γ 4,
• hemoglobine H = ß 4.
Bèta-thalassemie
Deze worden gekarakteriseerd door de afname van de synthese van de ß-ketens. Alleen de synthese van hemoglobine A wordt beïnvloed. Daarom
zijn de percentages hemoglobine F en hemoglobine A 2
hoger ten opzichte van hemoglobine A.
3. Migratiepatronen
Migratie van normale
hemoglobinen
A(A 0
+ A 1
) A (A 0
+ A 1
)
F
S - D
A 2
A 2
- C - E
Migratie van belangrijke
afwijkende hemoglobinen
koolzure anhydrase
koolzure anhydrase
applicatiepunt
A 0
: De niet-geglyceerde fractie van het normaal volwassenen hemoglobine A.
A 1
: De geglyceerde fractie van het normaal volwassenen hemoglobine A.
In de hierboven weergegeven patronen is de anodo beneden en de kathode aan de bovenzijde.
Interferentie en begrenzingen
• Gebruik geen gehemolyseerde bloedmonsters.
• Als er een afwijkend hemoglobine wordt waargenomen dat zich anders gedraagt dan de belangrijkste hemoglobine varianten S, C, D en E, dan
moeten andere identificatiemiddelen gebruikt worden (bijv. isoelectrische focussering, globine-keten elektroforese), of vraag advies bij of zend een
monster aan, een gespecialiseerd laboratorium.
• De densitometrische keuring van Hb F (of enig ander minder belangrijk hemoglobine dat in de buurt van de belangrijke fracties migreert) is semikwantitatief
aangezien de waarden onnauwkeurig worden beneden de 2 - 3 % van het totale hemoglobine.
• De monsters van bepaalde patiënten met een homozygote hemoglobine S, die behandeld zijn met Hydrea® (hydroxycarbamide) kunnen een
hemoglobine F vertonen die door deze behandeling is gesynthetiseerd. Bij enkele gevallen heeft men kunnen waarnemen dat deze geïnduceerde
hemoglobine F een mobiliteit heeft op de HYDRAGEL 7 HEMOGLOBIN(E)-gels die licht verschilt van die van de natuurlijke hemoglobine F.
• Soms, wanneer monsters langer dan zeven dagen bewaard worden, kan er een geconcentreerde fractie worden waargenomen door de vlek die
zich achter de Hb A-fractie bevindt. Deze fractie mag niet worden verward met een hemoglobinevariant, zoals bijvoorbeeld hemoglobine H of Bart.
Troubleshooting
Bel de technische dienst van de leverancier als de test mislukt terwijl de instructies voor de voorbereiding en opslag van materialen, en voor de
procedure, nauwkeurig werden gevolgd.
De veiligheidsbladen behorend bij de reagentia in de Kit als ook informatie over de verwerking van afval of restproducten kunt u verkrijgen bij de
Technische Dienst van de leverancier.
UITSLAGGEGEVENS
Alle uitslaggegevens zijn gebaseerd op een studie in meerdere laboratoria waarbij de HYDRAGEL HEMOGLOBIN(E) K20 procedure en een ander
op de markt verkrijgbaar agarose gelsysteem werd toegepast. In aanvulling hierop werden concordantiestudies uitgevoerd waarbij de identiteit van de
hemoglobinen en hun waarden werden vastgesteld met behulp van andere, geaccepteerde, methoden. De resultaten van representatieve voorbeelden
van de studies worden hier gepresenteerd.
Alle elektroforegrammen zijn visueel geïnterpreteerd. SEBIA’s HYRYS densitometer werd bij alle densitometrische evaluaties toegepast om waar
nodig de visuele informatie aan te vullen.
Reproduceerbaarheid binnen een serie
Er werd elektroforese uitgevoerd op drie bloedmonsters, op een enkele partij gels gebruikmakend van de HYDRAGEL HEMOGLOBIN(E) K20
procedure. Elk van de monsters werd getest in alle tracks van een enkele gel. De onderstaande tabel toont de gemiddelden, SD en CV voor ieder
afzonderlijk hemoglobinecomponent in de drie monsters, berekend aan de hand van de densitometrische percentage waarden voor ieder track. Verder
zijn bij geen van de herhalingen valse negatieve of valse positieve waarden geconstateerd.
- 27 -