Helmholtz-Gemeinschaft

Ergebnisse & Diskussion
steigender 4-Chlorbenzaldehydkonzentration linear an, eine weitere Konzentrationserhöhung
führt zu keiner weiteren Beschleunigung der Inaktivierung. Das Maximum der Inaktivierung
liegt hier bei etwa 3-3,7% min -1 . Mit 20 mM 4-Chlorbenzaldehyd erscheint die Inaktivierung
mit 2,5% min -1 daher relativ gering. Die hohe Abweichung kann zum einen mit der
erschwerten Analytik durch die große Menge des ausfallenden Produktes erklärt werden. Zum
anderen ist das Reaktionsgleichgewicht mit 20 mM Benzaldehyd durch die Präzipitation des
Produkts (4,4´-Dichlorbenzoin) so verschoben, dass in dem Ansatz über den Großteil der
Inkubationszeit eine wesentlich geringere 4-Chlorbenzaldehydkonzentration vorliegt. Da das
Reaktionsgleichgewicht meist schon in weniger als zwei Minuten spätestens aber nach fünf
Minuten erreicht war, ist die tatsächliche Substratkonzentration in allen Inaktivierungsansätzen
wesentlich geringer als die ursprünglich eingesetzte. Soweit möglich wurde die
Umsetzung des 4-Chlorbenzaldehyds in den Inaktivierungsansätzen ermittelt (10-85%) und
die Inaktivierungsrate in Abhängigkeit von der im Inaktivierungsansatz tatsächlich
vorhandenen 4-Chlorbenzaldehydkonzentration bestimmt (Abb. 62 B). Ausgehend von dieser
Betrachtung steigt die Geschwindigkeit der Inaktivierung mit Erhöhung der 4-Chlorbenzaldehyd
Konzentration bis etwa 0,7 mM noch linear an, bei höheren Konzentrationen ist keine
weitere Beschleunigung der Inaktivierung zu beobachten. Ein signifikanter Unterschied zu
den eingesetzten Substratkonzentrationen ergibt sich also nicht. Die maximale Inaktivierungsrate
ist demnach schon bei geringen Konzentrationen von etwa 0,7-1 mM 4-Chlorbenzaldehyd
erreicht.
A
4,0
B
4,0
3,5
3,5
3,0
3,0
k des
(% min -1 )
2,5
2,0
1,5
1,0
k des
(% min -1 )
2,5
2,0
1,5
1,0
0,5
0,5
0,0
0 4 8 12 16 20
4-Chlorbenzaldehyd (mM)
0,0
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0
4-Chlorbenzaldehyd (mM)
Abb. 62: Inaktivierungsraten der BAL in Abhängigkeit von der eingesetzten 4-Chlorbenzaldehydkonzentration
(A) und der 4-Chlorbenzaldehydkonzentration nach Erreichen des Reaktionsgleichgewichts
(B). Inaktivierung mit 0-20 mM 4-Chlorbenzaldehyd: 0,02 mg/ml BAL in 50 mM TEA-Puffer, pH 8;
2,5 mM MgSO 4 ; 0,5 mM ThDP; 30 vol% DMSO; T=25 °C. Zur besseren Übersicht sind Hilfslinien
eingezeichnet.
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