Helmholtz-Gemeinschaft

Ergebnisse & Diskussion
der BAL durch die Bildung solcher Schiffbasen hervorgerufen werden, muss eine Senkung
des Umgebungs-pHs auch zu einer Stabilisierung der BAL gegenüber den Aldehyden führen.
Aufgrund der insgesamt sehr guten Aktivität der BAL gegenüber den para-substituierten
Benzaldehyden und der damit einhergehenden vereinfachten Analyse sowie der voneinander
abweichenden Inaktivierungsraten von 2,5% min -1 bis 6,2% min -1 , wurde der Einfluss des pH-
Werts zunächst für diese Substratgruppe untersucht. Die Inaktivierung sowie die Aktivitätsmessungen
wurden bei pH 7 durchgeführt, alle anderen Parameter entsprachen den
Experimenten in Kapitel 4.2.1.
7
pH 7
pH 8
6
5
k des
(% min -1 )
4
3
2
1
0
4-MBA
4-ClBA
4-FBA
4-BrBA
4-TBA
Abb. 60: Inaktivierungsraten der BAL mit para-substituierten Benzaldehyden bei pH 7 und pH 8 im
Vergleich. Inaktivierungsansatz: 20 µg/ml BAL in 50 mM TEA-Puffer, pH 7 und pH 8; 0,5 mM ThDP,
2,5 mM MgSO 4 ; 30 vol% DMSO; 2 mM Substrat; T=25 °C. Reaktionsansätze zur Ermittlung der Aktivität:
siehe Tabelle 7. Die Standardabweichungen ergeben sich aus der Berechnung von k des eines Experiments und
stellen keine empirisch ermittelten Standardabweichungen dar.
Bereits bei einer Senkung des pH-Wertes um eine Einheit ist eine Stabilisierung der BAL um
etwa das 3-5 Fache gegenüber den para-substituierten Benzaldehyden zu beobachten (Abb.
60). Für weitere Analysen wurde 4-Chlorbenzaldehyd aufgrund der hohen Aktivität und der
damit vereinfachten Analytik ausgewählt. Zusätzlich sollten zwei weitere Aldehyde für
vergleichende Analysen eingesetzt werden. Erstens sollte der unsubstituierte und in den
meisten Arbeiten als Standardsubstrat verwendete Benzaldehyd näher untersucht werden,
zweitens wurde 3,5-Dimethoxybenzaldehyd als sterisch sehr anspruchsvolles Substrat,
welches zudem in den Arbeiten von Schmidt und Zavrel bereits charakterisiert wurde und in
der vorliegenden Arbeit eine mit Benzaldehyd vergleichbare Inaktivierung gezeigt hatte,
ausgewählt. Um signifikante Aussagen über die Unterschiede in der Inaktivierung treffen zu
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