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Einflussfaktoren auf die Stabilität und Aktivität der ... - JuSER

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Ergebnisse & Diskussion<br />

ortho<br />

meta<br />

para<br />

ortho<br />

meta<br />

Benzaldehyd<br />

Chlor-<br />

Brom-<br />

Fluor-<br />

Methyl-<br />

Methoxy-<br />

Nitro-<br />

(BA)<br />

(ClBA)<br />

(BrBA)<br />

(FBA)<br />

(TBA)<br />

(MBA)<br />

(NOBA)<br />

Abb. 57: In dieser Arbeit verwendete Benzaldehyd-Derivate (die verwendeten Abkürzungen sind in<br />

Klammern angegeben).<br />

4.2.1 Inaktivierung der BAL durch verschiedene Benzaldehyd-Derivate<br />

Die Inaktivierungsanalysen wurden wie in Kapitel 3.10.3 beschrieben durchgeführt. Aufgrund<br />

der Vielzahl an untersuchten Aldehyden, wurde in der Regel nur ein Experiment pro Substrat<br />

durchgeführt. Da die substituierten Benzoine nicht käuflich zu erwerben sind und eine<br />

Synthese und anschließende Reinigung für eine Kalibrierung zu zeitaufwändig gewesen wäre,<br />

konnte keine quantitative Analyse der Anfangsreaktionsgeschwindigkeiten durchgeführt<br />

werden. Deshalb wurde für die Bestimmung der relativen Aktivität die Fläche der Produktsignale<br />

herangezogen und diese miteinander verglichen. Nicht für alle Substrate lagen<br />

kinetische Parameter aus anderen Arbeiten vor. Die Substratkonzentrationen zur Ermittlung<br />

der relativen Aktivität wurden daher im Rahmen ihrer Löslichkeit möglichst hoch gewählt.<br />

Die Aktivität der BAL war gegenüber manchen Substraten (z.B. 2-Methoxy- 2-Methyl- und<br />

3-Nitrobenzaldehyd) trotzdem sehr gering und lag innerhalb eines geeigneten Messzeitraums<br />

unterhalb der Nachweisgrenze. In diesen Fällen wurde die Enzymkonzentration zur<br />

Ermittlung der Anfangsreaktionsgeschwindigkeiten angepasst. Da der Aktivitätstest mit dem<br />

gleichen Substrat durchgeführt wurde, welches auch für die Inaktivierung verwendet wurde,<br />

wurden Aldehyde gegenüber denen die BAL unter den gewählten Bedingungen keinerlei<br />

Aktivität aufwies (z.B. 2-Nitrobenzaldehyd) oder die Löslichkeit nicht ausreichte, um<br />

sinnvolle Messungen zu gewährleisten (z.B. 3,5-Dibrombenzaldehyd) nicht in die<br />

Untersuchungen mit einbezogen. Eine Übersicht über die Reaktionsbedingungen für alle<br />

untersuchten Aldehyde ist in Tabelle 7 (Kapitel 3.10.3) zusammengefasst.<br />

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