Helmholtz-Gemeinschaft

Ergebnisse & Diskussion
wurde bereits verschiedentlich in der Literatur beschrieben (Fan et al., 2001, Kuzmic et al.,
1996, Sears et al., 1999, Toth et al., 2009, Widjaja et al., 2008). Eine höhere Drehzahl führt
zu höheren Scherkräften, welche einen Einfluss auf die Stabilität von Proteinen haben
können. Untersuchungen, die den Einfluss von Scherkräften, unter Ausschluss der Umgebungsluft,
auf die Stabilität von Proteinen untersucht haben zeigen, dass die Inaktivierung
von Proteinen durch Scherkräfte nur sehr gering und somit vernachlässigbar ist (Maa und
Hsu, 1996, Maa und Hsu, 1997, Thomas und Dunnill, 1979, Thomas et al., 1979). Vermutlich
ist die Proteinaggregation bei höheren Drehzahlen hauptsächlich in der höheren Luftblasenzahl
mit kleinerem Durchmesser und der damit einhergehenden Vergrößerung der Luft/Gas-
Interphase begründet (Maa und Hsu, 1997, Thomas und Dunnill, 1979). Die beobachtete
geringere Sensitivität gegenüber den Rührprozessen mit dem Kopfrührer stützt die
Vermutung, dass die BFDH281A empfindlich auf die hydrophobe Oberfläche des Rührfisches
reagiert, wogegen die BAL trotz des Magnetrührfisches über einen Zeitraum von 24 h eine
hohe Stabilität aufweist.
4.1.2 Einfluss des pH-Wertes auf die Rührstabilität
Der einzige Unterschied in beiden magnetisch gerührten Versuchsaufbauten mit der BAL und
der BFDH281A war der pH-Wert des Puffers. Daher wurden die Versuche für die BAL und
die BFDH281A bei verschiedenen pH-Werten wiederholt.
Aktivität
lösliches Protein
relative(r) Aktivität / Anteil lösl. Protein
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0,0
1,9 ml
0,6 ml
1,9 ml
0,6 ml
pH 6,5 pH 7
1,9 ml
0,6 ml
Abb. 51: Stabilität der BFDH281A nach 24 h magnetischem Rühren bei verschiedenen pH-Werten. Die
Aktivität und der Proteingehalt der Kontrollen nach 24 h wurden jeweils als 1 definiert. Die Volumina der
gerührten Proben betrugen je 1,9 und 0,6 ml. Magnetrührer 1400 Upm; 0,5 mg/ml BFDH281A in 50 mM Kpi-
Puffer; 0,1 mM ThDP; 2,5 mM MgSO 4 ; T=25 °C. n=3 für pH 6,5 und pH 8; n=1 für pH 7.
pH 8
- 97 -