Helmholtz-Gemeinschaft

Material & Methoden
Rührschaufel
Steckmodul
Motor mit Steckmodul
Aufsicht
Motor
Frequenzregler
Motor mit Steckmodul
Seitenansicht
Abb. 44: Einzelkomponenten und Aufbau des Kopfrührers. (Abb. mit freundlicher Genehmigung von Prof.
Dr. Ing. A. Spieß)
3.10.2 Bestimmung der Stabilität in 2-Phasen
Puffer pH 8:
MIBK gesättigter Puffer:
50 mM Kpi 10 ml Methylisobutylketon (MIBK)
2,5 mM MgSO 4 100 ml Puffer
0,1 mM ThDP Mischen und trennen der Phasen im Scheidetrichter
Enzymlösungen:
0,5 mg/ml BAL in Puffer
0,5 mg/ml BAL in MIBK gesättigtem Puffer
Die Analysen zur Stabilität der BAL in 2-Phasen wurden in HPLC-Gefäßen aus Glas mit
Schraubdeckel durchgeführt. Je Ansatz wurden 0,5 ml Enzymlösung in MIBK gesättigtem
Puffer mit 0,5 ml MIBK gegeben. Für jede entnommene Probe wurde ein eigener Ansatz
gewählt. Die Proben wurden auf dem Mehrfachmagnetrührer Telesystem 60 (Thermo Fischer,
Deutschland) bei 25 °C mit 1400 Upm und Intervallschaltung gerührt. Die Intervallschaltung
wurde so eingestellt, dass alle 60 min eine Pause von 30 sek eingelegt wurde, damit der
Rührfisch (zylindrisch, Mikro, 8 mm Länge Ø 1,5 mm, PFTE ummantelt) neu zentriert
werden konnte. Ungerührte 2-Phasen Proben, sowie 1 ml Kontrollen mit 0,5 mg/ml BAL in
Puffer und MIBK gesättigtem Puffer (gerührt und ungerührt) wurden mitgeführt. Die
Restaktivitäten wurden relativ zur Ausgangsaktivität mittels des fluoreszenzphotometrischen
Aktivitätstest ermittelt (Kapitel 3.9.1.3). Je Probe wurde eine Dreifachbestimmung durch-
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