JUILLET
CASFMV2_030915
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Glycopeptides<br />
Concentrations<br />
critiques<br />
(mg/L)<br />
S ≤ R ><br />
Charge<br />
du<br />
disque<br />
(µg)<br />
Diamètres<br />
critiques<br />
(mm)<br />
S ≥ R <<br />
Notes<br />
Chiffres arabes pour les commentaires portant sur les concentrations critiques (CMI)<br />
Lettres pour les commentaires portant sur les diamètres critiques d’inhibition<br />
La détermination de la sensibilité aux glycopeptides ne doit pas être réalisée par diffusion en milieu gélosé pour tous les staphylocoques (Staphylococcus spp.). La<br />
seule méthode de référence pour la détermination des CMI des glycopeptides est la microdilution (référence ISO 20776). En l’attente de commercialisation de galeries<br />
permettant une mesure de la CMI de la vancomycine et de la teicoplanine par la méthode de référence, la CMI pourra être mesurée par la méthode des gradients de<br />
diffusion (bandelettes) (inoculum : McFarland 0,5), mais dans certaines conditions décrites ci-après.<br />
Pour les utilisateurs d’automates travaillant en milieu liquide :<br />
Une souche de Staphylococcus spp. présentant une CMI mesurée par un automate en milieu liquide ≤1mg/L à la teicoplanine ET à la vancomycine peut être catégorisée<br />
sensible aux glycopeptides. A la demande, la CMI pourra être mesurée par la méthode de référence ou à défaut par la méthode des bandelettes et pourra figurer sur<br />
l’antibiogramme.<br />
Il est recommandé d’effectuer une recherche de sensibilité diminuée aux glycopeptides sur une souche de Staphylococcus spp. présentant une CMI mesurée par un<br />
automate en milieu liquide > à 1 mg/L à la teicoplanine OU à la vancomycine.<br />
Pour les utilisateurs de la méthode de diffusion<br />
La recherche de la sensibilité diminuée aux glycopeptides permet une première approche pour la catégorisation des glycopeptides sans mesure de la CMI (voir logigramme).<br />
58 59<br />
Méthodes pour la recherche de la sensibilité diminuée aux glycopeptides<br />
2 méthodes de détection sont proposées :<br />
· Test Teico 5 : Ensemensement d’une gélose Mueller-Hinton (MH) additionnée de 5 mg/L de teicoplanine, par dépôt en spot de 10 μl d’une suspension McFarland 2,<br />
incubation à 35°C ± 2° et lecture en 24 H si positif, sinon en 48 heures. La sensibilité diminuée est mise en évidence par la présence de 4 colonies ou plus.<br />
· Test en gradient de diffusion (Macro-bandelette) : Test de sensibilité à la vancomycine et à la teicoplanine par diffusion en gradient (bandelettes) sur milieu coeurcerveau<br />
(à l’exclusion de tout autre milieu) avec un inoculum McFarland 2, incubation à 35°C ± 2 ° et lecture en 24 H si positif, sinon en 48 heures. La sensibilité diminuée<br />
est mise en évidence avec des valeurs ≥8 mg/l pour à la fois vancomycine et teicoplanine ou avec une valeur ≥12 mg/l pour la teicoplanine seule. Ce test réalisé avec un<br />
inoculum lourd ne permet pas de mesurer la CMI de la vancomycine et de la teicoplanine.<br />
Un témoin négatif (S. aureus ATCC 25923) et un témoin positif (Staphylococcus haemolyticus CIP 107204) sont à utiliser.<br />
Interprétation du test de la recherche de la sensibilité diminuée aux glycopeptides<br />
• TEST positif<br />
- Pour S. aureus : la souche de S. aureus doit être catégorisée «souche de sensibilité diminuée aux glycopeptides». L’utilisation thérapeutique des glycopeptides<br />
est déconseillée. La souche peut être adressée dans un centre référent pour confirmation par la méthode d’analyse de population et catégorisation définitive.<br />
- Pour S. non aureus : la CMI sera mesurée par la méthode de référence ou à défaut par la méthode des bandelettes pour la catégorisation et pourra figurer sur<br />
l’antibiogramme<br />
• TEST négatif<br />
Staphylococcus spp. peut être catégorisé sensible aux glycopeptides. A la demande, la CMI pourra être mesurée par la méthode de référence ou à défaut par la méthode<br />
des bandelettes et pourra figurer sur l’antibiogramme.<br />
V2.0 <strong>JUILLET</strong> 2015 59<br />
Staphylococcus spp.