JUILLET

Glycopeptides
Concentrations
critiques
(mg/L)
S ≤ R >
Charge
du
disque
(µg)
Diamètres
critiques
(mm)
S ≥ R <
Notes
Chiffres arabes pour les commentaires portant sur les concentrations critiques (CMI)
Lettres pour les commentaires portant sur les diamètres critiques d’inhibition
La détermination de la sensibilité aux glycopeptides ne doit pas être réalisée par diffusion en milieu gélosé pour tous les staphylocoques (Staphylococcus spp.). La
seule méthode de référence pour la détermination des CMI des glycopeptides est la microdilution (référence ISO 20776). En l’attente de commercialisation de galeries
permettant une mesure de la CMI de la vancomycine et de la teicoplanine par la méthode de référence, la CMI pourra être mesurée par la méthode des gradients de
diffusion (bandelettes) (inoculum : McFarland 0,5), mais dans certaines conditions décrites ci-après.
Pour les utilisateurs d’automates travaillant en milieu liquide :
Une souche de Staphylococcus spp. présentant une CMI mesurée par un automate en milieu liquide ≤1mg/L à la teicoplanine ET à la vancomycine peut être catégorisée
sensible aux glycopeptides. A la demande, la CMI pourra être mesurée par la méthode de référence ou à défaut par la méthode des bandelettes et pourra figurer sur
l’antibiogramme.
Il est recommandé d’effectuer une recherche de sensibilité diminuée aux glycopeptides sur une souche de Staphylococcus spp. présentant une CMI mesurée par un
automate en milieu liquide > à 1 mg/L à la teicoplanine OU à la vancomycine.
Pour les utilisateurs de la méthode de diffusion
La recherche de la sensibilité diminuée aux glycopeptides permet une première approche pour la catégorisation des glycopeptides sans mesure de la CMI (voir logigramme).
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Méthodes pour la recherche de la sensibilité diminuée aux glycopeptides
2 méthodes de détection sont proposées :
· Test Teico 5 : Ensemensement d’une gélose Mueller-Hinton (MH) additionnée de 5 mg/L de teicoplanine, par dépôt en spot de 10 μl d’une suspension McFarland 2,
incubation à 35°C ± 2° et lecture en 24 H si positif, sinon en 48 heures. La sensibilité diminuée est mise en évidence par la présence de 4 colonies ou plus.
· Test en gradient de diffusion (Macro-bandelette) : Test de sensibilité à la vancomycine et à la teicoplanine par diffusion en gradient (bandelettes) sur milieu coeurcerveau
(à l’exclusion de tout autre milieu) avec un inoculum McFarland 2, incubation à 35°C ± 2 ° et lecture en 24 H si positif, sinon en 48 heures. La sensibilité diminuée
est mise en évidence avec des valeurs ≥8 mg/l pour à la fois vancomycine et teicoplanine ou avec une valeur ≥12 mg/l pour la teicoplanine seule. Ce test réalisé avec un
inoculum lourd ne permet pas de mesurer la CMI de la vancomycine et de la teicoplanine.
Un témoin négatif (S. aureus ATCC 25923) et un témoin positif (Staphylococcus haemolyticus CIP 107204) sont à utiliser.
Interprétation du test de la recherche de la sensibilité diminuée aux glycopeptides
• TEST positif
- Pour S. aureus : la souche de S. aureus doit être catégorisée «souche de sensibilité diminuée aux glycopeptides». L’utilisation thérapeutique des glycopeptides
est déconseillée. La souche peut être adressée dans un centre référent pour confirmation par la méthode d’analyse de population et catégorisation définitive.
- Pour S. non aureus : la CMI sera mesurée par la méthode de référence ou à défaut par la méthode des bandelettes pour la catégorisation et pourra figurer sur
l’antibiogramme
• TEST négatif
Staphylococcus spp. peut être catégorisé sensible aux glycopeptides. A la demande, la CMI pourra être mesurée par la méthode de référence ou à défaut par la méthode
des bandelettes et pourra figurer sur l’antibiogramme.
V2.0 JUILLET 2015 59
Staphylococcus spp.