Characterization of yield, sensitivity to Botrytis cinerea and ...

More documents

Recommendations

Info

14זמני של דשן ומים:‏)Fertigationהמכילה את הדשן )20/20/20(, NPK וגוזמו אחריכל גל לבלוב/פריחה.‏ לא ניתן טיפול כימי כל שהוא לכל תקופת הגידול.‏ עקבנו אחרייבול הפרחים השבועי למשך64לצמח אחד ± .SDשבועות.‏ התוצאות מופיעות כיבול ממוצע מצטברהערכת הרגישות של זני הפרחים השונים ל-‏ Botrytis cinereaתרבית של .B cinerea התקבלה מפרחים נגועים.‏ לאחר מכן גודלה התרבית גודלה על.)PDA, Difco(גבי מצע גידול העשוי אגר מסוג (PDA) potato dextrose agarתרחיף )suspension( נבגים הוכן מהנבגים הנמצאים בקצוות של תרביות .B cinereaבנות שבועיים.‏ הנבגים הוסרו באמצעות לולאה בקטריולוגית,‏ ויוצר תרחיף במיםמזוקקים סטריליים,‏ סונן באמצעות4שכבות של בד כותנה אוורירי סטרילי בכדילהסיר את שאריות התפטיר ‏)גוף הפטרייה המורכב מקורים רבים.)mycelia:שיטהבדיקה )bioassay( לקביעת רגישותם של עלי הכותרת של פרחי מאכל מזניםB. cinereaשונים לפטריית -בוצעה על עלים נפרדים שנתלשו מצמח האם.‏ עליהכותרת ששמשו לצורך ה-‏bioassayנלקחו מהדור- whorl -‏)ספירלית עלים בעלתמרכז אחד(‏ השני עד החמישי כשסופרים מהדור החיצוני ביותר.‏ מס'‏ עלים טוטלי של9-15עלי כותרת נאסף מ2-3פרחים ו-‏3-4עלי כותרת אינדיבידואליים הוצבו על ניירסינון לח בתוך צלחות פטרי סטריליות כעותקים מדויקים.‏ טיפה בנפח שלהמכילה תרחיף נבגים של ה-‏20 μl)5X10 4 -10 5 spores/ml( B. cinerea הונחה באמצעהעלה,‏ מים סטריליים שמשו כקבוצת ביקורת.‏ אחוז השטח הפגוע נקבע אחריימים של אינקובציה בטמפ'‏ 20 o C בתוך צלחות סגורות.‏4-10ההדבקה טבעית של זני הפרחים השונים ל-‏B. cinereaנקבעה באופן מיידי לאחרהחליף או מיד אחרי תום תקופת האחסון.‏ הפרחים הטריים הקטופים שהוטבלובתמיסת כלור אורגני Israel( )TOG 6, Milchan Bross Ltd., רוססו בצורהאוורירית במים וכוסו בשקיות העשויות .polyethylene שקיות אלו ובתוכם הפרחיםנסגרו למשך יומיים עם גומייה.‏ חומרת הסימפטומים נקבעה אחריימים של 6
15אינקובציה בטמפ'‏ 20. o C החומרה של ההדבקה נקבעה ע"י הערכה ויזואלית של אחוזהפרחים שנפגמו מ-‏ .Botrytis הערכתה של ההדבקה הטבעית לאחר אחסון של15ימים בוצעה ע"י ספירה כמותית של עלי הכותרת הנגועים המכוסים בפוליפרופילין)polypropylene( מחורר.‏אחוז ההדבקה המלאכותית )1( וגם ההדבקה הטבעית )3,4( תורגם לסימנים לפיהסקאלה:‏ )-( : איןהדבקה, )±( : פחות מ-‏ , 1% )+( : 1% - 25% , )++( : 25% -75% - 50% : )+++( , 50%, )++++( : למעלה מ-‏ 75%. בגלל שההערכה של ההדבקהב "2" בוצעה מוקדם )4 ימים אחרי ההדבקה(‏ רמות האינפקציה הגיעו למקסימום שללפי כך הסקאלה נקבעה כך ש:‏ )-( : אין הדבקה, )±( : פחות מ-‏ , 1% )+( : 1% -75%, 15% )++( : 15% - 30% , )+++( : 30% - 45% , )++++( : למעלה מ-‏ .45%קביעת הפעילות האנטיאקסידנטיתהפקת נוגדי החמצון והגדרתם בוצעה כמתואר )#179 .)Vinokur, 2006 בקיצור,‏ עלי50mMכותרת שלפרחיםמכל זן הוקפאו ונהפכולתמציות ע"י ריסוק ב-‏בופראציטאט buffer( )acetate המאופיינת ב-‏ pH של 4.3. נוגדי חמצון הידרופיליים הופקוע"י אצטון )acetone( ואילו נוגדי החמצון הליפופיליים ע"י הקסאן )hexane( כמתואר.)2006(ע"י Vinokurהפוטנציאל האנטיאוקסידנטי של התמציות שהופקו נמדד150 μMכמתואר )1999 .)Araki, תערובת הריאקציה הסופית הכילה azinobis1.77 mM ]2,2’ ו--‏‎2,2’-azobis(2‎ 3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate (ATBS)]249ב ml(AAPH) amidinopropane) dihydrochloride איתנול שריכוזו 99.9%פלוס 250 μl של .H 2 SO 4תערובת הריאקציה שהתקבלה חוממה בטמפ'‏ 45 o C למשך60דקות וקוררה לאחר1 mlמכן עד לטמפ'‏ החדר.‏ 5μlמהתמציות שהוכנו מהפרחים עורבבו עםשלתערובת הריאקציה ונקבעה הירידה בספיגה באורך גל של 734 nmדקה 15 לאחרBioscience( .)Ultrospec, Amersham התוצאות הסופיות חושבובטמפ'‏ 25 o Cכהשוואה בין הספיגה בדגימות לעומת הספיגה הסטנדרטית של(±)-6-Hydroxy-
Page 1: 1עלי הכותרת של הורד
Page 5 and 6: 55מ"מ אך שכיחותם בטב
Page 7 and 8: 7השפעת תנאי הסביבה
Page 10 and 11: 10להביא למחלת הסרטן.
Page 12 and 13: 12הנבלעת בתמיסה תלו
Page 16 and 17: 16(Trolox) .2,5,7,8-tetramethylchro
Page 18 and 19: 18900300750250600200450150300100150
Page 20 and 21: 20הרגישות של הזנים ה
Page 22 and 23: 22תכולת נוגדי החמצו
Page 24 and 25: 24ניתן לחלק את שאר ה
Page 26 and 27: 26ופורחים בשיעור זה
Page 28 and 29: 28ספריםעדי בנארי,‏ 2
Page 30 and 31: 30Droby, S. and Lichter, A., 2004.
Page 32 and 33: 32Kelley, K.M., Behe, B.K., Biernba

Characterization of yield, sensitivity to Botrytis cinerea and ...

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?