lipid rafts - Cursuri Medicina

FUNDAMENTE TEORETICESI METODE IN CERCETAREABIOMEDICALA FUNDAMENTALAMai 2011

BAZELE MOLECULAREALE PROCESELOR FIZIOLOGICEDE LA NIVELUL BIOMEMBRANELORMai 2011

Esenţa vieţii (fenomene biotice) constă în capacitateastructurilor vii de a oxida gradat diferite substanţe, utilizândmare parte din energia chimică astfel eliberată pentrudesfăşurarea anumitor reacţii chimice ce consumă energie(endergonice).Ansamblul acestor procese de nivel molecular senumeşte metabolism şi stă la baza vieţii, asigurând condiţiileenergetice pentru fenomenele antientropice de păstrare şidezvoltare a structurilor proprii.

• Metabolismul cuprinde fenomene– catabolice (litice)– anabolice (sintetice)• Catabolism înseamnă deci scindarea substanţelor complexe,cu eliberare de energie chimică de legătură, care este înparte stocată sub forma legăturilor fosfat macroergice dindiferiţi compuşi, în special adenozin-trifosfat (ATP).• Lanţurile de reacţii catabolice realizează de fapt un transfertreptat de electroni către atomii de oxigen, rezultând în finalCO 2 şi H 2 O, precum şi alţi produşi finali de catabolism, ce numai pot fi oxidaţi la nivel celular.• Anabolism înseamnă sinteză de substanţe proprii, cu consumde energie, furnizată de catabolism prin ATP.

• Tesutul este o grupare de celule învecinate ce aparţinaceluiaşi tip tisular, adică au aceeaşi specializare morfofuncţională.Tipurile tisulare principale sunt: epitelial,muscular, nervos, conjunctiv.• Organele sunt grupări tisulare structurate în scop deintegrare a funcţiilor, care pot astfel deveni mai complexe,cu elemente calitativ superioare ce nu se manifestă caatare la simplul nivel celular sau tisular.• Tot astfel organele formează sisteme funcţionale deorgane, numite uneori aparate.• Organismele sunt organizate în nivele superioare, pe planecologic (populaţie, biocenoză / ecosistem, biosferă) şisistematic (populaţie, specie, gen, familie, clasă,încrengătură, regn).

Pornind de la aspectele generale şiparticulare ale funcţiilor celulare, fiziologiadescrie integrarea acestora la nivel de organ,sistem şi organism în cadrul “marilor funcţii”de nutritiţie (digestie, respiraţie, excreţie, circulaţie),de reglare / comandă / control (neuro-endocrine),de relaţie (senzoriale, somatomotorii, psihocomp.).

• Intrucât în organismul uman marea majoritate a celulelornu pot întreţine schimburi directe cu mediul extern alacestuia, pentru viaţa şi activitatea lor, a fost necesar caacestea să se diferenţieze şi să se organizeze în organe,aparate şi sisteme care să poată să pună celulele încontact indirect, prin intermediul mediului intern, cu mediulînconjurător.• In acest scop s-au diferenţiat: aparatul digestiv careasigură aportul de substanţe nutritive şi biologic active dinmediul extern, sistemul hemodinamic care asigurădistribuţia sângelui purtător de nutrimente şi principiibiologic active tuturor ţesuturilor, aparatul respirator careasigură oxigenul necesar metabolismului şi îndepărtareabioxidului de carbon

La nivel celular se manifestă toate proprietăţile generale,fundamentale, ale materiei vii: metabolismul, excitabilitatea, mişcarea,reproducerea.Ele sunt asigurate morfofuncţional la nivel subcelular în moddiferenţiat, prin specializările organitelor celulare. Unele aspecte ale vieţiisunt prezente izolat, oarecum incomplet, şi la nivel de organite izolate şichiar ansambluri supramoleculare reconstituite artificial.Pe de altă parte, în cadrul organismelor pluricelulare ele suntintegrate, rezultând manifestări complexe la nivel de ţesut, organ, aparat,organism.

Celula este alcătuită din membrană, citoplasmă şi nucleu.Componenta principală a membranei este plasmalema, un bistratfosfolipidic în care se găsesc proteine periferice şi integrale, la care seadaugă glicokalixul (cu compoziţie predominant glicoproteică) la exteriorşi citoscheletul submembranar şi reticulul superficial la interior.Citoplasma este compartimentată printr-un sistem de membranefosfolipidice intracelulare.Organitele delimitate de membrane sunt de tip vezicular /canalicular şi cuprind: reticulul endoplasmic, mitocondriile, lizozomii,aparatul Golgi, vezicule de endo- şi exocitoză.Alte organite (nedelimitate de membrane) pot fi granulare, caribozomii şi diverse incluziuni citoplasmatice, sau fibrilare, grupate într-unansamblu morfo-funcţional numit citoschelet.

In afară de organitele menţionate, comune tuturor celulelor,există varietăţi ale acestora, caracteristice anumitor tipuri celulare.- structurarea filamentelor de miozină şi actină în miofibrile cuorganizare sarcomerică în fibrele musculare striate.- în axonii neuronilor se constituie neurofilamente, în care tubulinaparticipă la transportul axonal de substanţe- evaginări membranare filiforme ale plasmalemei numite cili, cepot fi mobili prin prezenţa unei diferenţieri citoscheletice specifice.- în timpul mitozei microtubulii formează fusul de diviziune, ceasigură migrarea către polii celulei a materialului genetic (cromatide încazul mitozei sau cromozomi în cazul meiozei).

A. DEFINITII SI CLASIFICARI ALE BIOMEMBRANELORB. PLASMALEMA SI STRUCTURILE ASOCIATEB1. Mozaicul fluid si diferentierile sale functionale: domenii membranarelipid rafts, caveole, poli de exocitozaB2. Structuri asociate cu plasmalema: glicokalix; citoschelet si reticulendoplasmic submembranarB4. Jonctiuni celulareB3. Transferul de substante prin plasmalema: definitii, clasificari siexemplificari (exceptand canalele ionice)B3.1. Canale ionice: operare, definitii si clasificăriB3.2. Canalul de sodiu voltaj-dependent rapidB3.3. Canale de potasiuB3.4. Canale de clorB4. Potentiale membranare: asimetria ionica si ecuatia GoldmanB4.1. Polarizari si depolarizari locale si globaleB4.2. Potentiale de actiune

B5. Receptori membranari definitii, clasificari; sisteme de semnalizareB5.1. Receptori colinergiciB5.2. Receptori adrenergiciB5.3. Receptori pentru alte amineB5.4. Receptori purinergiciB5.5. Receptori pentru aminoaciziB5.6. Receptori pentru peptideC. MEMBRANA RETICULARA: ARHTECTURA, DIFERENTIERIC1. Transferul de substante prin membrana reticulara: exemplificariC2. Sinteza proteica si procesarea post-translationalaC3. Membrana lizozomalaC4. Traficul fosfolipidelor membranare: sintezaD. MEMBRANE MITOCONDRIALE; FOSFORILAREA OXIDATIVAE. MEMBRANA NUCLEARAF. SINTEZA: PROCES, MEMBRANA, SUBSTRAT MOLECULAR

Plasmalema este un bistrat fosfolipidic ce conţine şi alte lipide,precum şi proteine intrinseci (integrale, ce străbat ambele straturi) sauextrinseci (periferice, aparţinând unui singur strat). Plasmalemadelimitează celula, asigurând schimburi controlate de substanţă şiinformaţie cu mediul extracelular.Ea prezintă structuri specializate pentru diverse aspectefuncţionale: transferul substanţelor hidrofile (pori, canale, transportori),recunoaşterea semnalelor biochimice (receptori), legătura cu celuleleînvecinate (joncţiuni strânse şi comunicante), mişcarea celulei / lichiduluiextracelular (cili şi flageli).

• a. deţine rolul de barieră de difuziune, adică de frontieră fizică întremediul intra- şi extracelular participând astfel la menţinereadiferenţelor de concentraţie a substanţelor între aceste două teritorii;• b. asigură transportul anumitor substanţe. Aceste transporturicontribuind de asemeni la menţinerea compoziţiei mediuluiintracelular necesar derulării tuturor reacţiilor biochimiceintracelulare;• c. are rol fundamental în transmiterea informaţiei între mediul intraşiextracelular, dar în aceiaşi măsură de la o celulă la alta. În acestultim domeniu, al transmiterii informaţiei, membranele celulelor aşazis excitabile (neuronale, muşchilor scheletici, netezi şi cardiaci etc)joacă un rol fundamental în cuplarea excitaţiei proprii cu răspunsulfiziologic al celulei (eliberare de neuromediatori, contracţie muscularăetc).• ectoplasmă• hialoplasmă, mai vâscoasă şi rigidă decât granuloplasma• suprafaţă celulară = plasmalema propriu-zisăacoperită de zona de microvecinătate

LOG RAFTSPLUTE DE BUSTENI

KON-TIKIfamousbalsa raftfloatingon thePacific

KON-TIKIends upin museum

famousLIPID RAFTSfloat foreverin the membranes

LIPID RAFTSsubset of membranelateral heterogeneitiesdue to lipid-lipid immiscibility

LIPID RAFTS= highly dynamic, submicroscopic assemblies= rich in sphingolipids and cholesterol= float within the liquid phospholipid bilayer= coalesce upon clustering of their components

LIPID RAFTS= platforms for protein attachment- when membranes are moved- during signal transduction

HISTORY outer leaflet packing inner leaflet Israelachvili 1973 lipid domains in biological membranes Karnovsky 1979 perturbation by free fatty acids regulation of receptor mobility detergent-resistant membrane fractions Brown 1992resistance of lipid rafts to extraction by Triton X-100 at 4°C

HISTORYIn plasmalema exista microdomeniilipidice rezistente la detergenti, care aufluiditate mai redusa si organizare maistabila decat marea fosfolipidica, si carepot fi implicate in dinamica proteinelormembranareRusu V, 1985, prelegere de biofizica pentru studentii la medicina

HISTORYSimons K, Ikonen E (1997) Nature 387(6633):569-72Functional rafts in cell membranes1992-1997 ~0015 papers ~003/year1997-2005 ~2400 papers ~300/yearMeder D,[...] Simons K (2006) Proc Natl Acad Sci U S A 103(2):329-34

LIPID RAFTS - NATURE / STRUCTURE- outer leaflet (inner ?)- saturated hydrocarbon chains liquid-ordered = tightly packed- size and functions are debated- DRM = aggregates of rafts, not native state- too small to be optically resolved,untill recently Gaus 2003, Parton 2003- highly dynamic; partitioning kinetics

aft-associated proteinsGPI-anchored Chatterjee 2001cholesterol-binding (caveolins) Kurzchalia 1999Src-TyrK (Lck, Fyn, Lyn; 2 acyl anchor) Simons 2000heterotrimeric GTP-binding Mofett 2000hedgehog Karpen 2001phospholipid-binding (annexins) Babiychuk 2002palmitoylated & myristoylated (flotillins) Rajendran 2003

GPI ANCHORS

LIPID RAFTSSTRUCTURE

LIPID RAFTS ORGANISATION

FUNCTION(non)caveolae-mediated endocytosissorting in polarised epithelial cellsvirus buddingimmune receptor signalling= membrane traffic + control= plasmalemmal signal transduction+ receptor targeting / cycling domain receptor densities signal control

ENDOCYTOSIS MECHANISMS

LIPID RAFTS IN PLASMALEMMALSIGNAL TRANSDUCTION

LIPID RAFTSWHERE TO ?

• Excitabilitatea este proprietatea materiei vii de a răspunde,mai mult sau mai puţin specific, la acţiunea unui stimuladecvat.• Stimulul (excitaţia) este o variaţie energetică din mediu şipoate induce răspunsul dacă este adecvat ca: formăenergetică, amplitudine, durată de acţiune, bruscheţe (rată detransfer energetic).• O formă particulară este aşa numita excitabilitate electrică,capacitatea unei membrane celulare de a genera şi conducesemnale electrice speciale numite potenţiale de acţiune.• Cuplarea dintre excitaţie şi răspuns este un fenomen deosebitde complex, care de obicei cuprinde o etapă de transducţiemembranară şi mecanisme de semnalizare intracelulară.

Membrane Transport ProteinsTransport of small moleculesMovement of molecules and maintenance ofspecial environments within cellsaccomplished by special transmembraneproteins15-30% of a cell’s genes encode membraneproteins75% of cell’s metabolic energy in transport

Protein-free Lipid BilayersEventually, most molecules will diffusethrough down concentration gradientRate differs dependent upon type ofmoleculeMembrane virtually impermeable to chargedions

Membrane Transport ProteinsBiological membranes will also allow manymolecules to permeateHowever, simple diffusion rate for many veryslow or virtually nonexistentThus, ions, sugars, amino acids, nucleotides,etc. assisted in movement by specialproteins

Two types of membrane transportprocesses:Passive TransportSome carrier proteinsAll channel proteinsActive TransportSome carrier proteins

Passive TransportA gradient determines the direction ofmovement (“downhill”)All channel proteins and many carrierproteins allow solutes to passively diffuse(“facilitated diffusion”) across membranes

Active TransportSometimes it is necessary to transport amolecule against its concentration orelectrochemical gradient (“uphill”)Process mediated by special carrierproteins, sometimes referred to as pumpsThis process requires energy and activitymust be coupled to some source ofmetabolic energy

Transportul transmembranar se realizează camacrotransfer / microtransfer.După sens, macrotransferul poate fiendocitoză / exocitoză,După cum vezicula de endocitoză conţine sau nu materialsolid, aceasta se numeşte fagocitoză sau pinocitoză, iar dupădimensiuni poate fi vorba de macropinocitoză sau micropinocitoză.Microtransferul poate fi pasiv sau activ, după cum serealizează în sensul sau împotriva gradientului electrochimictransmembranar.

Transportul pasiv este un proces de difuziune prin membrană.In general rata de difuzie printr-o membrană este proporţională cutemperatura absolută, gradientul de concentraţie şi coeficientul depermeabilitate, determinat la rândul său de coeficientul de partiţie întremembrană şi mediu. Substanţele lipofile difuzează uşor prin bistratulfosfolipidic, iar cele hidrofile utilizează diverse căi hidrofile.In sensul scăderii ratei de transfer şi al creşterii selectivităţii, precum şipe baza diferenţelor structurale, căile hidrofile pot fi clasificate în pori, canaleşi transportori.Porii şi canalele sunt structuri proteice care delimitează căi apoasetransmembranare. Canalele prezintă bariere de permeabilitate şi deselectivitate, unele din ele operate chimic sau electric.Difuziunea transmembranară pe căi preferenţiale specifice se numeştefacilitată, în opoziţie cu difuziunea simplă.

• Difuziunea apei prin membrană = osmoză• Presiunea osmotică este egală cu presiuneacare aplicată în compartimentul cuosmolaritate mai mare poate împiedicaosmoza.• Osmolaritatea unei soluţii este numărul totalde particule aparţinând substanţelor dizolvateraportat la numărul lui Avogadro şi la volumulsoluţiei.

• In cazul transportorilor, transferul de substanţăpresupune legarea acesteia de proteinatransportoare pe o faţă a membranei, o anumemodificare conformaţională a acesteia (flip-flop,ping-pong, situsuri succesive de legare), şieliberarea substanţei transportate pe cealaltă faţăa membranei.• După numărul de specii moleculare transferatepentru un ciclu transportor, există uniport şicotransport. Acesta din urmă se numeşte sinportdacă transferul este în acelaşi sens şi antiport dacăsensul este opus.

• Transportul activ se realizează evident numai decătre transportori proteici şi poate fi primar sausecundar, după cum proteina transportoareprezintă sau nu activitate ATP-azică proprie.• Transportul activ secundar este întotdeaunacotransport, una din substanţe fiind transportatăactiv pe baza gradientului pentru o alta.Consumul de energie este indirect, realizându-sela nivelul unui transportor activ primar ce menţinegradientul menţionat, necesar pentrufuncţionarea celui secundar.

Channel ProteinsForm hydrophilic pores across the membraneNot just simple aqueous poresNarrow …. selectively permeableTransport through is always passive and rapidAllow inorganic ions to diffuse = ion channelsAre gated; NOT continuously open

Channel ProteinsForm hydrophilic pores across the plasmamembraneNarrow and must be selectively permeableOpen and close as needed; transport through israpid

Channel ProteinsAlways passive transport; cannot becoupled to energy sourcePrimarily function to allow inorganic ions todiffuse down electrochemical gradientWhen they transport inorganic ions, theyare called ion channels

Ion ChannelsNot just simple aqueous poresDisplay ion selectivityAre gated; NOT continuously open

Ion channels:up to 100 X 10 6 ions/secondalways passive transportRegulation of opening: “gating”

Kinds of stimuli that “gate” channels

Carrier proteins: activity somewhatresembles enzymatic activity

Carrier proteins: activity somewhatresembles enzymatic activityprotein contains specificbinding sites for solute

carrier protein activity somewhatresembles enzymatic activityreversible conformationalchanges involved

passivetransport

Active TransportSometimes it is necessary to transport amolecule against its concentration orelectrochemical gradient (“uphill”)Process mediated by special carrier proteins,sometimes referred to as pumpsThis process requires energy and activity must becoupled to some source of metabolic energy

Three ways of driving active transport

Three ways of driving active transport

Three ways of driving active transportmainly foundonly in bacteria

Three types of carrier-mediated transportcoupled carriers can take advantage of energy stored inelectrochemical gradient of one solute to drive transport of another

Active TransportIn the plasma membrane of animals, sodium isoften the ion used to drive active transportConcentration is lower inside the cell than outside

Binding ofligands iscooperativeNa + bindingenhancesglucose bindingNa + bindinglikely to happenin state A

Cellular pHProteins (and other molecules) areaffected by pHMacromolecules generally have an optimalpH at which they function

Cellular pHCells must be able to control pHAccomplished for the cytosol two ways:sodium-proton exchangersodium-driven chloride-bicarbonateexchanger

Cellular pHCells must be able to control pHAccomplished for the cytosol two ways:sodium-proton exchangersodium-driven chloride-bicarbonateexchanger

Na + H +CYTOSOLsodium-proton exchanger

Na +andHCO 3-(HCl out)(NaHCO 3 in)H +andCl -CYTOSOLsodium-driven chloride-bicarbonate exchanger

How do we get thisessential sodiumgradient?

Sodium low inside cell, potassium highDifferences maintained by a specialNa + -K + pumpOperates as an antiporterUses ATP for energy

Plasma membrane Na + -K + pump is an ATPasetwo ions transported against gradients

Ionophores:channel formermobile ion carrierProduced bymicroorganisms asbiological weapons

Used by biologists toincrease permeabilityof membranesGramicidin A:-antibioticCalcium transporter:-turn on cell signaling

Electrochemical GradientCharged molecules move along agradient that is a combination of:concentration gradientelectrical gradientMembrane potential: electricalpotential difference across membrane

Ion Channels and ElectricalProperties of CellsA membrane potential arises whenthere is a difference in electricalcharge on the two sides of a membraneThese differences can result fromactive ion pumping or from passivediffusion

Ion Channels and ElectricalProperties of CellsSodium concentrations are low within acellIn contrast, there are many negativelycharged “fixed anions”There must be other cations to balancethe negative charges

Potassium ChannelsBalance of internal negative chargesaccomplished largely by potassiumActively pumped into the cell by Na + -K +pumpPotassium can also move freely in andout through K + leak channels

Potassium Channels andElectrical Properties of CellsPotassium leak channels always openPotassium, through these two types oftransport, reaches a balance betweenconcentration gradient andelectrochemical gradient

Potassium Channels andElectrical Properties of CellsWhen equilibrium is reached, with no netion flow, there is a resting membranepotentialA slight change or discrepancy in thearrangement of charges across amembrane can quickly cause achange in membrane potential

Membrane potential in animal cells depends on K +leak channels and the K + gradient across membraneNa + /K + pump and channels that allow K + to leak in enableK + to approach equilibrium• e.g., if no membrane potential, but K + abundant in cells. K +leak out due to concentration gradient.• K + movement will cease because a negative charge insidecell will result.• When concentration and electrical gradients are balanced,resting membrane potential is reached

Calcium Gradient EssentialMUST be maintained at very low intracellularconcentrations (interferes with phosphatebasedenergy system)Steep gradient maintained by active pumps thatuse the power of ATP to pump Ca2+ out of thecellCalcium evolved to be a crucial signaling moleculeIncreases in response to certain extracellularsignals to induce a very rapid response

Calcium Gradient in MuscleMuscle cells contain sarcoplasmic reticulumSpecial organelle that acts as internal store ofcalciumUpon reception of signal to contract muscle,store of calcium rapidly released, causes cellularresponse

Calcium Gradient in MuscleOnce contraction no longer needed, Ca 2+ activelypumped out of cytosol back into sarcoplasmicreticulumThis ends the muscle contraction, but requiresinput of energy, such as from ATP

Calcium Gradient in MuscleRelates to rigor mortis that sets in after deathAs cells die and signaling pathways fall apart,calcium is released from sarcoplasmic reticulum-- muscles contractCells are dead and cannot generate or maintainthe ATP needed to actively transport Ca 2+ backout -- muscles remain contracted

CALCIUM INFLUX FLUXES ANDSMOOTH MUSCLECONTRACTIONstudies on contribution of L-type channelsof L-typereticular store, and store-operated channelsand store-operated channelsD. D. N. N. SerbanIasi - - Romania

Cytosolic calcium signalsparticipate in any celullar activity,from the coupling of excitation to responses(contractile / secretory) and control of metabolism,gene expression (differentiation / adaptation)and division (proliferation)…down to functional alterations and celullar death,incidental (necrosis) or programmed (apoptosis).

RETICULAR CALCIUM RELEASERyR & InRRETICULARUPTAKESERCACYTOSOLIC CALCIUMEXTRACELULLAR CALCIUM INFLUXCaL, ROC, SOCPLASMALEMMALEXTRUSIONPMCA & Na/CaCALCIUM-CALMODULIN-MLCKMYOSIN LIGHT CHAIN PHOSPHORYLATIONFORCE DEVELOPMENTSTABLE BRIDGESACTIN-DEPENDENT MECHANISMSFORCE MAINTENANCECONTRACTILE STATUSFIBRE LENGTH - CIRCUMFERINTAPARIETAL TENSIONHEMODYNAMIC RESISTANCEVASCULAR COMPLIENCESECTORIAL PRESSUREBLOOD FLOW

SOC Berridge 1995store-operated channels =plasmalemmal Ca² + conducting channels activatedby depletion of Ca² + storesmediate capacitive influxmany issues are still debated- molecular architecture- activation mechanismPutney 1986, Casteels 1981

HOW MANY SOCS• highly calcium-selective current I CRAC innonexcitable cells is generated by Ca² + - SOCLewis 2001• I CRAC similar; pCa 2+ /pNa + = 1 to 40; cat-SOCSkryma 2000, Albert 2003, Abeele 2004• activated by the same mechanisms• sensitive to the same inhibitorsAlbert 2002, Liu 2003, Hunton 2004

• Ca² + - SOC (pCa 2+ /pNa + ~ 1000)in rat basophilic leukemia cells (RBL)• Cat-SOC (pCa 2+ /pNa + = 1 )in smooth muscle cells (SMC)• Ca² + - SOC în RBL• Cat - SOC (pCa 2+ /pNa + = 40)in human submandibular gland cells• Cat - SOC (pCa 2+ /pNa + = 4)in human parotid gland cellsTrepakova 2001, Smani 2003Ambudkar 2003

cat – SOC– Na + influx depolarization voltage-gated Ca 2+ channels Poteser, 2003– SOC & Ca L co-activation in gallbladder Morales 2004capacitive influx contraction // depolarization– Na + influx Ca 2+ influx via Na/Ca Arnon 2000, Lee 2002– in pulmonary artery reverse Na/Cacontributes to store depletion mediatedincrease in cytosolic calcium Zhang 2005

CIF-iPLA 2 -SOC• Ca 2+ - SOC (RBL, Jurkat) and cat-SOC (SMC)triggered by CIF (Ca 2+ influx factor, partiallypurified)• CIF produced upon Ca 2+ store depletiondisplaces inhibitory CaM from iPLA 2 lysophospholipids which activate SOC• store refilling CIF CaM rebinds to iPLA 2 inactive SOCs Ca 2+ influx Csutora 1999, Trepakova 2000• CIF may be sphingosine 1-phosphatein human neutrophils and HL60 Itagaki 2003

IP 3 R-SOC• conformational coupling model Irvine 1990, Petersen 1996• direct coupling of SOCs with IP 3receptors (IP 3R)• store depletion SOC in two different waysCIF vs conformational coupling Prevarskaya 2004• two distinct classes of Ca 2+ -conducting channels:SOC activated by depletion via CIF-iPLA 2no IP 3is neededIP 3ROC activated by IP 3R by direct couplingno store depletion is needed Bolotina 2004• >50% fast capacitivebovine trachea depletion

• possible compartmentalization of the storeoperatedpathway in areas away fromreceptors and other Ca 2+ influxesAmbudkar 2004• variety of Ca 2+ channelsCa 2+ -SOC, cat-SOC, IP 3 ROC, voltage-gated influx to trigger / maintain differentphysiological responses in various cells