teljes anyag - Nyugat-Magyarországi Egyetem Mezőgazdaság

A zona pellucidában vitrifikáció után bekövetkezett változások összehasonlítása...47KÖVETKEZTETÉSEKFunahashi et al. (2000) szkenning elektron mikroszkópos (SEM) vizsgálatokkal megállapította,hogy az intakt ZP átlagos átmérôje és annak átlagos vastagsága nagyobb voltaz ovulált oocitáknak, mint az in vitro maturáltaknak. A ZP vastagsága nagyobb volt azin vivo zigótáknak, mint a petesejteknek, míg az IVM–IVF zigóták nem különböztek azIVM petesejtektôl. Ez az eredmény azt jelzi, hogy a ZP morfológia és a sperma penetrációtkövetô ZP reakció jelentôsen különbözik az IVM és ovulált oociták között.Michelmann et al. (2007) vizsgálták a zonamorfológiát és a spermakötô mintázatot sertésnél.A petesejtek négy csoportját különböztették meg: éretlen, in vivo érlelt, in vitromaturáltatott 24, vagy 48 h-ig. Ezen kívül in vivo vagy in vitro fejlôdött korai embriókzónamorfológiáját is elemezte. Azt tapasztalta, hogy négy különbözô zónamorfológiahatározható meg. A kategóriák a porózus hálószerû struktúrától a megközelítôleg sima éskompakt felszínig terjedtek. Az elôzô szerzôkkel nem egyezô eredményeket kapott, ugyanisnem talált különbséget az in vitro és in vivo érlelt petesejtek és a zóna szerkezete között.Vizsgálatai szerint az összes petesejtcsoport nagyon heterogén zónamorfológiát mutatott, ésnem volt tisztán értékelhetô összefüggés a kategóriákon belül. Az embriófejlôdést vizsgálvaazt tapasztalta, hogy in vivo embriófejlôdés során a zónafelszín a porózus struktúrától akompakt felszín felé változott, addig az in vitro embriók kompaktak maradtak a fejlôdésösszes stádiumában.Succu et al.(2007b) kettôs fluoreszcens festést alkalmazva vizsgálták a vitrifikáció hatásátjuh petesejtek ZP integritására, és az eredményeik azt mutatták, hogy visszamelegítésután alacsonyabb membránintegritás volt megfigyelhetô a vitrifikált csoportnál (P < 0,01),mint a kontrollnál.Az in vivo és in vitro érlelés közötti különbséget igazolja, hogy megállapították, a peteveze tôspecifikus glikoprotein (OGP) az ivari ciklus során helyileg és idôben különbözôképpenexpresszálódik és lokalizálódik az érett petesejtek és az embriók ZP-ján, a perivitellinálisterében és plazmamembránján. McCauley et al. (2003) kísérleteikben az in vitro maturáltatottsertés petesejtekhez, vagy a kapacitáción átesett spermiumokhoz OGP-t adva azttapasztalták, hogy csökkent a polispermia, valamint a spermiumok kötôdô képessége azónához, de magas penetrációs arányt sikerült elérniük.Szükség van az in vitro és in vivo érési folyamatok, valamint a vitrifikáció során létrejöttváltozások pontosabb feltárására. Megállapítottuk, hogy a vitrifikált/visszamelegített IVMpetesejtek degenerálódási aránya a csupasz petesejtek esetében szignifikánsan (P < 0,05)nagyobb volt (78,08±1,88%), mint a kumuluszsejtekkel borított oociták csoportjában(57,04±1,55%).A vitrifikáció során a ZP sérül és a sérülés mértéke függ attól, hogy a ZP csupasz vagykumuluszsejtekkel körülvett-e a hûtési folyamat kezdetén. Az in vitro maturált és apreovulációs petesejtek zonájának pronáz hatására bekövetkezô oldódását vizsgálva avitrifikációt követôen megállapítottuk, hogy a kumuluszsejtekkel körülvett in vivo és invitro érlelt oociták ZP-ja egyaránt kisebb mértékben károsodott a vitrifikáció során, minta lecsupaszított petesejteké.