teljes anyag - Nyugat-Magyarországi Egyetem Mezőgazdaság

More documents

Recommendations

Info

44Varga E.– Egerszegi I. – Rátky J. – Kiss R. – Tempfli K. – Bali Papp Á.:VisszamelegítésA petesejtek visszamelegítése három lépcsôben történt. A mûszalmákat ujjaink közé fogva(~36 o C) felmelegítettük 0,5–1 perc alatt. A melegítés során a petesejteket 5–5 percig,csökkenô szaharóz-koncentrációjú (0,75 M, majd 0,5 M) oldatokban ekvilibráltattuk, végülaz oocitákat szaharózmentes alapoldatba helyeztük.A petesejtek vizsgálata a visszamelegítést követôenA visszamelegítés után mikroszkóp segítségével (40x nagyítás) megvizsgáltuk a petesejtekmorfológiáját. Azokat a petesejteket, melyek ooplazmája sötét és homogén volt, a ZP-juknem sérült, illetve a petesejtek alakja nem változott meg, normálisnak tekintettük. Abnormálisnaktekintettük azokat az oocitákat, melyekben strukturális változásokat figyeltünkmeg, sérült a ZP-juk, citoplazmájuk világos, töredezett volt.A zona pellucida szerkezetének vizsgálataA visszamelegítést követôen csoportonként 30–40 petesejtet PBS oldatba (Kim et al. 1997)helyeztük, majd pipettázással eltávolítottuk felszínükrôl a kumuluszsejteket (MCOC,POCOC), végül 100 μl 0,1% (w/v) pronáz oldatot adtunk az alap PBS oldathoz. Mikroszkópsegítségével (400x nagyítás) folyamatosan figyeltük a petesejteket és feljegyeztük, hogymennyi idô alatt emésztôdött meg a ZP.Statisztikai vizsgálatokMinden vizsgálatot háromszor megismételtünk. Az eredmények értékelése a STATISTICAprogrammal (ANOVA) történt. A csoportok közötti különbségeket Duncan’s teszttel vizsgáltuk.Szignifikáns különbségnek azt tekintettük, ahol a valószínûség P < 0,05 volt.EREDMÉNYEKA petesejtek életképessége a vitrifikációt követôenIn vitro érlelt, kumuluszsejtekkel körülvett [MCOC csoport (n = 255)] és szintén in vitromaturált, de a kumuluszsejtektôl a maturációt követôen <strong>teljes</strong>en lecsupaszított petesejteket[MD csoport (n = 215)] vitrifikáltunk a nyitott, kihúzott végû mûszalma (OPS) módszerrel.Kontrollcsoportként (n = 217) sertés petesejteket maturáltattunk in vitro, 42 órán keresztül.Megvizsgáltuk a petesejtek szerkezetében bekövetkezô és a sejtmag érését jelzô morfológiaiváltozásokat a visszamelegítés után (1. kép).42 óra in vitro maturációt követôen megállapítottuk, hogy a vizsgált kontroll petesejtek esetébena kumuluszsejtek expandálódási rátája 89,33±6,11% volt, míg a sejtek 82,67±6,11%-aelérte a metafázis II állapotot. Ez alapján a maturációs rendszer megfelelônek bizonyulta petesejtek mesterséges érleléséhez.A vitrifikált/visszamelegített petesejtek degenerálódási aránya az MD-csoportban szignifikánsan(P < 0,05) nagyobb volt (78,08±1,88%), mint az MCOC csoportban (57,04±1,55%).
A zona pellucidában vitrifikáció után bekövetkezett változások összehasonlítása...451. kép (A) Kumulusz-petesejt komplex expandálódottkumuluszállománnyal az IVM 42. órájában(B) érett, MII petesejt az IVM 42. órájábanM = kromoszómák metafázisban, 1. st. = elsô sarkitestPicture 1. (A) Cumulus-oocyte complex with expanded cumulus cells at 42 h of IVM(B) matured, metaphase II stage oocyte at 42 h of IVMM = chromosomes at metaphase, 1 st.= first polar bodyMIIABA ZP oldódásának vizsgálata (2. kép)2. kép Sertés fagyasztott/visszamelegített petesejtek a ZP eltávolítása után(A) petesejt intakt plazmamembránnal, látható sarkitesttel,(B) petesejt ép plazmamembránnal,(C) feloldódott plazmamembrán, degenerálódott petesejtPicture 2. Porcine vitrified/warmed oocytes after ZP digestion(A) oocyte with intact plasma membrane, with visible polar body,(B) oocyte with intact plasma membrane,(C) degenerated oocyte with dissolved plasmamembraneA B C
Page 1 and 2: ACTA AGRONOMICAÓVÁRIENSISVOLUME 5
Page 3: 3Szerkesztõi levélAktuális lapsz
Page 6 and 7: 6MegemlékezésAkkor ez különböz
Page 9 and 10: 9ACTA AGRONOMICA ÓVÁRIENSIS VOL.
Page 11 and 12: In vitro vegetative micropropagatio
Page 17: In vitro vegetative micropropagatio
Page 20 and 21: 20Cs. Gombkötô - J. Iváncsics:Ta
Page 22 and 23: 22Cs. Gombkötô - J. Iváncsics:th
Page 24 and 25: 24Cs. Gombkötô - J. Iváncsics:Th
Page 26 and 27: 26Cs. Gombkötô - J. Iváncsics:In
Page 28 and 29: 28Cs. Gombkötô - J. Iváncsics:Fi
Page 31 and 32: ACTA AGRONOMICA ÓVÁRIENSIS VOL. 5
Page 33 and 34: Fehér busából (Hypophthalmichthy
Page 41 and 42: A zona pellucidában vitrifikáció
Page 43: A zona pellucidában vitrifikáció
Page 53 and 54: Most frequent bovine diseases in ca
Page 61 and 62: A versenyképesség fogalma és mé
Page 69: The main issues of land consolidati
Page 72 and 73: 72J. Alvincz - K. Kacz - J. P. Kolt
Page 75 and 76: The main issues of land consolidati
Page 79 and 80: Problems of milk quota management i
Page 85: Problems of milk quota management i
Page 88 and 89: 88Marosán M.:kodás során figyele
Page 90 and 91: 90Marosán M.:korú mezei és erdei
Page 92 and 93: 92Marosán M.:KorszerkezetAz ôzál
Page 94 and 95:
94Marosán M.:Szerzôk(1)Vemhes sut
Page 96 and 97:
96Marosán M.:1. ábra Az ôz elüt
Page 98 and 99:
98Marosán M.:Az ôzállományokban
Page 100 and 101:
100Marosán M.:8. táblázat Az ôz
Page 102 and 103:
102Marosán M.:Andersen, J. (1953):
Page 104 and 105:
104
Page 106 and 107:
106KöszöntésÉrdeklôdése egyre
Page 108 and 109:
108Köszöntés2001. július 1-jév
Page 110 and 111:
1102.3. Az Irodalom után kérjük
Page 112:
112ISSN 1416-647xKiadásért felel
show all

teljes anyag - Nyugat-Magyarországi Egyetem Mezőgazdaság

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?