ABSTRACTS â ORAL PRESENTATIONS - AMCA, spol. s r.o.
ABSTRACTS â ORAL PRESENTATIONS - AMCA, spol. s r.o.
ABSTRACTS â ORAL PRESENTATIONS - AMCA, spol. s r.o.
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
52. PRŮKAZ REGULAČNÍCH T LYMFOCYTŮ – METODICKÉ ASPEKTY<br />
Jitka Pohořská 1 , Jan Laštovička 2 , Vlastimil Král 1<br />
1<br />
Zdravotní ústav se sídlem v Ústí nad Labem, Centrum imunologie a mikrobiologie, Ústí<br />
nad Labem, jitka.pohorska@zuusti.cz<br />
2<br />
Fakultní nemocnice Motol, Ústav imunologie, 2. Lékařská fakulta UK, Praha<br />
Snaha o identifikaci populace buněk se „supresorovou“ aktivitou se datuje již do<br />
počátku 90. let minulého století. Významným průlomem byl průkaz supresivní aktivity<br />
populace CD4 + CD25 ++ T buněk v myším systému Sakaguchim a <strong>spol</strong>. v r. 1995. Identifikace<br />
regulačních T lymfocytů jako CD4 + CD25 ++ lymfocytů se v lidském systému brzy ukazovala<br />
jako nedostatečná a byly hledány další diferenciační/aktivační znaky T buněk pro přesnější<br />
identifikaci Treg. Rozvoj poznatků o úloze transkripčních faktorů a výsledky experimentů<br />
v myším systému znamenaly zásadní posun pro identifikaci Treg. Byl objeven diferenciační<br />
znak myších Treg - transkripční faktor FoxP3 s výraznou expresí v populaci CD4 + CD25 hi ,<br />
který byl díky analogii u myší považovaný za jednoznačně určující i pro člověka. Přibližně<br />
ve stejné době byly prováděny experimenty s průkazem Treg in situ v nádorové tkáni,<br />
kde byla zaměřována pozornost na molekuly ICOS (inducibilní kostimulátor indukující<br />
syntézu IL10) a GITR (receptor pro TNF indukovaný glukokortikoidy, jehož exprese se<br />
zvyšuje u aktivovaných T lymfocytů). Pokroky ve výzkumu Treg v lidském systému utlumily<br />
počáteční optimismus spojovaný s FoxP3 jako jednoznačným diferenciačním znakem této<br />
subpopulace T lymfocytů u lidí. Exprese FoxP3 není u člověka omezena pouze na Treg –<br />
tento transkripční faktor není (na rozdíl od myší) markerem konečného diferenciačního<br />
stadia. Důležitým krokem k přesnější identifikaci Treg u člověka bylo poznání fyziologické<br />
funkce receptoru pro IL7 (molekula CD127, alfa řetězec IL-7R). V práci Mazzucchelliho a<br />
<strong>spol</strong>. (2007) byla prokázána nepřímá závislost exprese CD127 a FoxP3 u aktivovaných a<br />
regulačních T lymfocytů.<br />
Dalšími slibnými kandidáty pro průkaz tlumivé funkce Treg se jeví CD152 (indukce CTLA-<br />
4 u revmatoidní artritidy obnovuje supresivní kapacitu Treg). V současnosti nachází<br />
využití v klinické praxi sledování exprese CTLA-4/CD152 v diagnostice imunologicky<br />
podmíněných neplodností. Pro rozlišení přirozených a indukovaných Treg subpopulací<br />
byl v posledních letech zmiňován transkripční faktor Helios (odlišení přirozených a<br />
indukovaných Treg), jehož nevýhodou je podobně jako u FoxP3 intracelulární značení.<br />
V současnosti se ale objevují práce, které prokazují i přirozené Treg s negativitou Helios.<br />
Podobně jako CD127 je zvažován další „negativní“ marker pro Treg - extracelulární<br />
serinová protéza s dipeptidyl-peptidázovou aktivitou (CD26). Exprese CD26 identifikuje<br />
Th1 efektorovou odpověď (rozdíly v expresi mezi Treg a efektorovými T lymfocyty jsou<br />
stabilní).<br />
Komplikace v metodických přístupech mohou do značné míry souviset s aktuálně<br />
uznávaným konceptem „diferenciační plasticity“ populace CD4+ T lymfocytů u člověka,<br />
která předpokládá určitou reversibilitu diferenciačních stupňů v závislosti na cytokinovém<br />
prostředí a expresi transkripčních faktorů.<br />
Budou zmíněny základní metodické přístupy stanovení Treg a jejich vliv na získaná data,<br />
modifikace vhodné pro detekci Treg v rutinním provozu klinické laboratoře (porovnání<br />
66 Analytical Cytometry VII
Change language