22.02.2015 Views

part.6 - CRDC

part.6 - CRDC

part.6 - CRDC

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

่<br />

ว. วิทยาศาสตรเกษตร ปที่ 40 ฉบับที่ 1 (พิเศษ) มกราคม-เมษายน 2552 สารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากหญาดอกขาว 119<br />

ทางชีวภาพ จากหญาดอกขาวในการควบคุมวัชพืช โดยในการทดลองนี้ มีวัตถุประสงคเพื่อศึกษาประสิทธิภาพของสารสกัด<br />

จากหญาดอกขาวในการยับยั้งการงอกและการเจริญของปลายยอดและรากของไมยราบยักษ<br />

อุปกรณและวิธีการ<br />

วิธีการสกัดสารจากหญาดอกขาวดวยตัวทําละลาย<br />

นําตนหญาดอกขาวตากแหงจํานวน 1 กิโลกรัม มาบดดวยเครื่องบด จากนั้นนําไปแชในเอทานอลความเขมขนรอยละ<br />

95 นาน 3 วัน ทําการกรองเพื่อแยกกากหญาดอกขาวออก นําสารละลายที่ไดมาระเหยใหแหงดวยเครื่องระเหยแบบลดความ<br />

ดัน ไดสารสกัดหญาดอกขาวดวยเอทานอลน้ําหนัก 7.01 กรัม จากนั้นนําไปเติมน้ํากลั่นปริมาตร 2 เทาของสารสกัดที่ได (14.02<br />

มิลลิลิตร) แลวสกัดตอดวยเอทิลแอซีเตต โดยเติมเอทิลแอซีเตตปริมาตร 15.0 มิลลิลิตรลงในสารสกัดที่ได แลวนําไประเหยดวย<br />

เครื่องระเหยแบบลดความดัน จะไดสารสกัดหญาดอกขาวดวยเอทิลแอซีเตต น้ําหนัก 4.96 กรัม<br />

ทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพเบื้องตน<br />

การทดสอบฤทธิ์ของสารสกัดจากหญาดอกขาวในการยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษ ใชตามวิธีของ จํานงค<br />

และคณะ (2542) โดยเตรียมสารสกัดจากหญาดอกขาวใน โดยละลายในแอซิโตน ที่ความเขมขน 1 10 50 และ 100 mg/mL<br />

นํากระดาษเพาะ 2 แผนวางในจานแกว (petri dish) ขนาดเสนผานศูนยกลาง 9 เซนติเมตร นําเมล็ดไมยราบยักษที่ทําการขลิบ<br />

ปลายเมล็ด (cutting) มาวางบนกระดาษเพาะ จํานวน 20 เมล็ดตอจานแกว เติมสารละลายความเขมขนตางๆ ที่เตรียมไว<br />

ขางตนปริมาตร 8 มิลลิลิตรตอจานแกว ปลอยใหอะซิโตนระเหยออก นําจานแกวดังกลาวไปบมที่อุณหภูมิหองและในตูเพาะที<br />

อุณหภูมิที่ 25 o C ความชื้นสัมพัทธรอยละ 95 เปนเวลา 3 วัน ทําการบันทึกผลดังนี้ จํานวนเมล็ดที่งอก รอยละการยับยั้งการ<br />

เจริญของยอดและราก โดยวัดความยาวยอดและรากดวยเวอรเนียรคารลิบเปอร และเปรียบเทียบกับชุดที่เติมน้ํากลั่น (ชุด<br />

ควบคุม) ทุกกรรมวิธีทําซ้ํา 3 ครั ้ง (Rimando, 2001)<br />

การแยกสารและการวิเคราะหสูตรโครงสราง<br />

ทําการแยกสารออกฤทธิ์ยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษดวยคอลัมนโครมาโทกราฟ โดยใชซิลิกาเจลเปนตัวดูด<br />

ซับ และใชเฮกเซน เอทิลแอซีเตต และเมทานอลเปนตัวชะ จากนั้นนําแตละสวนไปทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพกับเมล็ดไมยราบ<br />

ยักษ นําสวนที่สกัดแยกไดและมีฤทธิ์ในการยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษที่ดีที่สุดไปทําใหบริสุทธิ์ จากนั้นนําไปวิเคราะห<br />

สูตรโครงสรางของสาร โดยการทดสอบสมบัติทางกายภาพ ไดแก การละลาย จุดหลอมเหลว และการใชเทคนิคอินฟราเรดสเปก<br />

โทรสโกป รวมทั้งวิธีทินแลรเยอรโครมาโทกราฟเปรียบเทียบกับสารมาตรฐาน (authentic sample) โดยใชแผนโครมาโทกราฟ<br />

สําเร็จเคลือบ (coat) ดวย ซิลิกาเจล และใชตัวทําละลายอินทรียเปนวัฏภาคเคลื่อนที่ ตามวิธีของ วิมลพรรณ และสุปราณี<br />

(2550)<br />

ผลและวิจารณ<br />

ผลการทดสอบฤทธิ์ในการยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษ<br />

จากการทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพในการยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษ พบวา สารสกัดจากหญาดอกขาวดวย<br />

เอทิลแอซีเตต ที่ความเขมขน 10 mg/mL แสดงผลการยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษไดดี โดยมีการยับยั้งการงอกรอยละ<br />

70 และแสดงการยับยั้งการเจริญของสวนรากและยอดของไมยราบยักษไดรอยละ 60 เมื่อเปรียบเทียบกับชุดควบคุมซึ่งไม<br />

สามารถยับยั้งการงอกของเมล็ดได<br />

การแยกสารและวิเคราะหสูตรโครงสรางของสารยับยั้งการงอกของเมล็ดวัชพืชจากหญาดอกขาว<br />

จากการแยกสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่สกัดดวยเอทิลแอซีเตต ดวยวิธีคอลัมนโครมาโทรกราฟ โดยใชซิลิกาเจลเปนตัว<br />

ดูดซับและใชเฮกเซน เอทิลแอซีเตตและเมทานอล เปนตัวชะ ไดสารออกมา 6 สวน ไดแก A B C D E และ F พบวาสารจาก<br />

สวน D แสดงฤทธิ์ในการยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษไดดี จึงนํามาทําใหบริสุทธิ์ดวยการตกผลึก จะไดผลึกสีขาว (สาร<br />

1) ที่จุดหลอมเหลว 62-63°C จากนั้นนําไปการวิเคราะหหมูฟงกชันดวยเครื่องอินฟราเรดสเปกโทรมิเตอร แสดงผลใน Table 1

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!