part.6 - CRDC
part.6 - CRDC
part.6 - CRDC
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
่<br />
ว. วิทยาศาสตรเกษตร ปที่ 40 ฉบับที่ 1 (พิเศษ) มกราคม-เมษายน 2552 สารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากหญาดอกขาว 119<br />
ทางชีวภาพ จากหญาดอกขาวในการควบคุมวัชพืช โดยในการทดลองนี้ มีวัตถุประสงคเพื่อศึกษาประสิทธิภาพของสารสกัด<br />
จากหญาดอกขาวในการยับยั้งการงอกและการเจริญของปลายยอดและรากของไมยราบยักษ<br />
อุปกรณและวิธีการ<br />
วิธีการสกัดสารจากหญาดอกขาวดวยตัวทําละลาย<br />
นําตนหญาดอกขาวตากแหงจํานวน 1 กิโลกรัม มาบดดวยเครื่องบด จากนั้นนําไปแชในเอทานอลความเขมขนรอยละ<br />
95 นาน 3 วัน ทําการกรองเพื่อแยกกากหญาดอกขาวออก นําสารละลายที่ไดมาระเหยใหแหงดวยเครื่องระเหยแบบลดความ<br />
ดัน ไดสารสกัดหญาดอกขาวดวยเอทานอลน้ําหนัก 7.01 กรัม จากนั้นนําไปเติมน้ํากลั่นปริมาตร 2 เทาของสารสกัดที่ได (14.02<br />
มิลลิลิตร) แลวสกัดตอดวยเอทิลแอซีเตต โดยเติมเอทิลแอซีเตตปริมาตร 15.0 มิลลิลิตรลงในสารสกัดที่ได แลวนําไประเหยดวย<br />
เครื่องระเหยแบบลดความดัน จะไดสารสกัดหญาดอกขาวดวยเอทิลแอซีเตต น้ําหนัก 4.96 กรัม<br />
ทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพเบื้องตน<br />
การทดสอบฤทธิ์ของสารสกัดจากหญาดอกขาวในการยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษ ใชตามวิธีของ จํานงค<br />
และคณะ (2542) โดยเตรียมสารสกัดจากหญาดอกขาวใน โดยละลายในแอซิโตน ที่ความเขมขน 1 10 50 และ 100 mg/mL<br />
นํากระดาษเพาะ 2 แผนวางในจานแกว (petri dish) ขนาดเสนผานศูนยกลาง 9 เซนติเมตร นําเมล็ดไมยราบยักษที่ทําการขลิบ<br />
ปลายเมล็ด (cutting) มาวางบนกระดาษเพาะ จํานวน 20 เมล็ดตอจานแกว เติมสารละลายความเขมขนตางๆ ที่เตรียมไว<br />
ขางตนปริมาตร 8 มิลลิลิตรตอจานแกว ปลอยใหอะซิโตนระเหยออก นําจานแกวดังกลาวไปบมที่อุณหภูมิหองและในตูเพาะที<br />
อุณหภูมิที่ 25 o C ความชื้นสัมพัทธรอยละ 95 เปนเวลา 3 วัน ทําการบันทึกผลดังนี้ จํานวนเมล็ดที่งอก รอยละการยับยั้งการ<br />
เจริญของยอดและราก โดยวัดความยาวยอดและรากดวยเวอรเนียรคารลิบเปอร และเปรียบเทียบกับชุดที่เติมน้ํากลั่น (ชุด<br />
ควบคุม) ทุกกรรมวิธีทําซ้ํา 3 ครั ้ง (Rimando, 2001)<br />
การแยกสารและการวิเคราะหสูตรโครงสราง<br />
ทําการแยกสารออกฤทธิ์ยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษดวยคอลัมนโครมาโทกราฟ โดยใชซิลิกาเจลเปนตัวดูด<br />
ซับ และใชเฮกเซน เอทิลแอซีเตต และเมทานอลเปนตัวชะ จากนั้นนําแตละสวนไปทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพกับเมล็ดไมยราบ<br />
ยักษ นําสวนที่สกัดแยกไดและมีฤทธิ์ในการยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษที่ดีที่สุดไปทําใหบริสุทธิ์ จากนั้นนําไปวิเคราะห<br />
สูตรโครงสรางของสาร โดยการทดสอบสมบัติทางกายภาพ ไดแก การละลาย จุดหลอมเหลว และการใชเทคนิคอินฟราเรดสเปก<br />
โทรสโกป รวมทั้งวิธีทินแลรเยอรโครมาโทกราฟเปรียบเทียบกับสารมาตรฐาน (authentic sample) โดยใชแผนโครมาโทกราฟ<br />
สําเร็จเคลือบ (coat) ดวย ซิลิกาเจล และใชตัวทําละลายอินทรียเปนวัฏภาคเคลื่อนที่ ตามวิธีของ วิมลพรรณ และสุปราณี<br />
(2550)<br />
ผลและวิจารณ<br />
ผลการทดสอบฤทธิ์ในการยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษ<br />
จากการทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพในการยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษ พบวา สารสกัดจากหญาดอกขาวดวย<br />
เอทิลแอซีเตต ที่ความเขมขน 10 mg/mL แสดงผลการยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษไดดี โดยมีการยับยั้งการงอกรอยละ<br />
70 และแสดงการยับยั้งการเจริญของสวนรากและยอดของไมยราบยักษไดรอยละ 60 เมื่อเปรียบเทียบกับชุดควบคุมซึ่งไม<br />
สามารถยับยั้งการงอกของเมล็ดได<br />
การแยกสารและวิเคราะหสูตรโครงสรางของสารยับยั้งการงอกของเมล็ดวัชพืชจากหญาดอกขาว<br />
จากการแยกสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่สกัดดวยเอทิลแอซีเตต ดวยวิธีคอลัมนโครมาโทรกราฟ โดยใชซิลิกาเจลเปนตัว<br />
ดูดซับและใชเฮกเซน เอทิลแอซีเตตและเมทานอล เปนตัวชะ ไดสารออกมา 6 สวน ไดแก A B C D E และ F พบวาสารจาก<br />
สวน D แสดงฤทธิ์ในการยับยั้งการงอกของเมล็ดไมยราบยักษไดดี จึงนํามาทําใหบริสุทธิ์ดวยการตกผลึก จะไดผลึกสีขาว (สาร<br />
1) ที่จุดหลอมเหลว 62-63°C จากนั้นนําไปการวิเคราะหหมูฟงกชันดวยเครื่องอินฟราเรดสเปกโทรมิเตอร แสดงผลใน Table 1