69-72 - Polskie Stowarzyszenie BiomateriaÅów
69-72 - Polskie Stowarzyszenie BiomateriaÅów
69-72 - Polskie Stowarzyszenie BiomateriaÅów
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
98<br />
RYS.1. Wpływ temperatury na ilość przyłączonego<br />
antybiotyku do nośnika.<br />
FIG.1. Influence of temperature on amount of<br />
antibiotic attached to carrier.<br />
na działaniu tej temperatury przez 18 godzin, a następnie<br />
sprawdzono jej działanie bakteriobójcze wobec S. aureus.<br />
Zarówno próbki amikacyny (10μl) pobrane z roztworu<br />
przed jak i po immobilizacji wykazywały działanie bójcze<br />
w stosunku do testowanego szczepu (RYSUNEK 2). Strefa<br />
zahamowania wzrostu bakterii S. aureus powstała wokół<br />
próbki b (pula amikacyny niezwiązanej do niemodyfikowanego<br />
HAP) jest zbliżona rozmiarem do strefy wokół próbki<br />
e (kontrola – lek przed immobilizacją). Dowodzi to, że w<br />
przypadku HAP niemodyfikowanego, ilość związanego leku<br />
jest niewielka. Jednocześnie zauważono, że strefy wokół<br />
próbek a, c i d są znacząco mniejsze z powodu niskiego<br />
stężenia amikacyny w próbkach, co świadczy o związaniu<br />
leku do modyfikowanych nośników.<br />
W ostatnim etapie badań sprawdzono wpływ otrzymanych<br />
biomateriałów na wzrost i podział osteoblastów ludzkich.<br />
Podczas eksperymentu liczba komórek rosła osiągając<br />
najwyższy poziom w 312 godzinie prowadzonej hodowli.<br />
Przeżywalność komórek wyniosła 95%, co wskazuje że<br />
modyfikowane chemicznie materiały HAP nie są toksyczne<br />
w stosunku do osteoblastów.<br />
Wnioski<br />
1. Istotny wpływ na zwiększenie wydajności procesu immobilizacji<br />
amikacyny na testowanym materiale HAP ma<br />
zasadowe środowisko reakcji.<br />
2. Ilość związanej na biomateriale amikacyny zależy od stężenia<br />
testowanego leku, temperatury w jakiej prowadzony<br />
jest proces immobilizacji oraz czas immobilizacji.<br />
3. Hybrydowe biomateriały (HAP-amikacyna) wykazują<br />
działanie bakteriobójcze, natomiast nie wykazują działania<br />
toksycznego w stosunku do osteoblastów ludzkich.<br />
Piśmiennictwo<br />
[1] Klemm K. Antibiotic bead chains. Clin. Orthop. 295 (1993),<br />
63-76<br />
[2] Padilla S., Real del R.P., Vallet-Regi M. In vitro release of gentamicin<br />
from OHAp/PMMA<br />
Journal of Controlled Release 83 (2002), 343-352<br />
[3] Niedźwiedzki T., Kuryszko J.J. Biologia kości (2007), 23-27<br />
[4] Ginebra M.P., Traykova T., Planell J.A. Calcium phosphate cements<br />
as bone drug delivery systems: A review. Journal of controlled<br />
release 113 (2006), 102-110<br />
[5] Ginebra M.P., Traykova T., Planell J.A. Calcium phosphate cements:<br />
Competitve drug carrriers for the musculoskeletal system<br />
Biomaterials 27 (2006), 2171-2177<br />
RYS.2. Stabilność amikacyny niezwiązanej podczas<br />
procesu immobilizacji prowadzonego w<br />
temperaturze 60 0 C.<br />
Próbka leku niezwiązanego, pozostała po immobilizacji<br />
na: a) HAP silanizowanym; b) HAP<br />
niemodyfikowanym; c) HAP keratynowanym; d)<br />
HAP żelatynowanym; e) lek przed immobilizacją<br />
przechowywany w temperaturz pokojowej; f) lek<br />
przed immobilizacją inkubowany w 60 0 C.<br />
FIG.2. Stability of amikacin non-bound during<br />
immobilization process performed at 60 0 C temperature.<br />
Sample of drug remaining after immobilization on:<br />
a) silanized HAP; b) non-modified HAP;<br />
c) keratin-sealed; d) gelatin-sealed; e) drug before<br />
immobilization stored at RT; f) drug before immobilization<br />
incubated at 60 0 C.<br />
The last step of this research concerned checking of the<br />
influence of modified biomaterials on growth and division<br />
of human osteoblasts. During the experiment, cell number<br />
increased with time reaching the highest value at 312 h. Cell<br />
viability exceeded 95% what indicates that modified carriers<br />
were non toxic to osteoblasts.<br />
Conclusions<br />
1. Alkaline medium of reaction has relevant influence on<br />
increase of amikacin immobilization efficiency.<br />
2. Concentration of tested drug, temperature and time of<br />
immobilization process influence on amount of amikacin<br />
bound to biomaterial.<br />
3. Hybrid biomaterials (HAP–amikacin) reveal high antimicrobial<br />
activity against S. aureus and they are not cytotoxic<br />
towards human osteoblasts.<br />
References<br />
[6] Weethal H. Covalent coupling methods for inorganic support<br />
materials. Methods Enzymol., 44 (1976), 134-148<br />
[7] Ginalska G. Uryniak A., Łobarzewski J., Osińska M., A metod of<br />
antibiotic immobilization. Polish Patent no P-358934, 2003. Biuletyn<br />
Urzędu Patentowego 18 (2004), 801, s.124.<br />
[8] Ginalska G., Kowalczuk D., Osińska M. Amikacin-loaded vascular<br />
prothesis as an effective drug carrier. Int. J. Pharmaceut.<br />
(2007), doi: 1.1016/j.ipharm.2007.02.016<br />
[9] Zalewska J., Ginalska G., Ślósarczyk A., Godlewski P. The<br />
influence of protein modification on hydroxyapatite properties<br />
as gentamicin carrier. Engineering of biomaterials 58-60 (2006),<br />
214-216.