10.02.2015 Views

69-72 - Polskie Stowarzyszenie Biomateriałów

69-72 - Polskie Stowarzyszenie Biomateriałów

69-72 - Polskie Stowarzyszenie Biomateriałów

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

98<br />

RYS.1. Wpływ temperatury na ilość przyłączonego<br />

antybiotyku do nośnika.<br />

FIG.1. Influence of temperature on amount of<br />

antibiotic attached to carrier.<br />

na działaniu tej temperatury przez 18 godzin, a następnie<br />

sprawdzono jej działanie bakteriobójcze wobec S. aureus.<br />

Zarówno próbki amikacyny (10μl) pobrane z roztworu<br />

przed jak i po immobilizacji wykazywały działanie bójcze<br />

w stosunku do testowanego szczepu (RYSUNEK 2). Strefa<br />

zahamowania wzrostu bakterii S. aureus powstała wokół<br />

próbki b (pula amikacyny niezwiązanej do niemodyfikowanego<br />

HAP) jest zbliżona rozmiarem do strefy wokół próbki<br />

e (kontrola – lek przed immobilizacją). Dowodzi to, że w<br />

przypadku HAP niemodyfikowanego, ilość związanego leku<br />

jest niewielka. Jednocześnie zauważono, że strefy wokół<br />

próbek a, c i d są znacząco mniejsze z powodu niskiego<br />

stężenia amikacyny w próbkach, co świadczy o związaniu<br />

leku do modyfikowanych nośników.<br />

W ostatnim etapie badań sprawdzono wpływ otrzymanych<br />

biomateriałów na wzrost i podział osteoblastów ludzkich.<br />

Podczas eksperymentu liczba komórek rosła osiągając<br />

najwyższy poziom w 312 godzinie prowadzonej hodowli.<br />

Przeżywalność komórek wyniosła 95%, co wskazuje że<br />

modyfikowane chemicznie materiały HAP nie są toksyczne<br />

w stosunku do osteoblastów.<br />

Wnioski<br />

1. Istotny wpływ na zwiększenie wydajności procesu immobilizacji<br />

amikacyny na testowanym materiale HAP ma<br />

zasadowe środowisko reakcji.<br />

2. Ilość związanej na biomateriale amikacyny zależy od stężenia<br />

testowanego leku, temperatury w jakiej prowadzony<br />

jest proces immobilizacji oraz czas immobilizacji.<br />

3. Hybrydowe biomateriały (HAP-amikacyna) wykazują<br />

działanie bakteriobójcze, natomiast nie wykazują działania<br />

toksycznego w stosunku do osteoblastów ludzkich.<br />

Piśmiennictwo<br />

[1] Klemm K. Antibiotic bead chains. Clin. Orthop. 295 (1993),<br />

63-76<br />

[2] Padilla S., Real del R.P., Vallet-Regi M. In vitro release of gentamicin<br />

from OHAp/PMMA<br />

Journal of Controlled Release 83 (2002), 343-352<br />

[3] Niedźwiedzki T., Kuryszko J.J. Biologia kości (2007), 23-27<br />

[4] Ginebra M.P., Traykova T., Planell J.A. Calcium phosphate cements<br />

as bone drug delivery systems: A review. Journal of controlled<br />

release 113 (2006), 102-110<br />

[5] Ginebra M.P., Traykova T., Planell J.A. Calcium phosphate cements:<br />

Competitve drug carrriers for the musculoskeletal system<br />

Biomaterials 27 (2006), 2171-2177<br />

RYS.2. Stabilność amikacyny niezwiązanej podczas<br />

procesu immobilizacji prowadzonego w<br />

temperaturze 60 0 C.<br />

Próbka leku niezwiązanego, pozostała po immobilizacji<br />

na: a) HAP silanizowanym; b) HAP<br />

niemodyfikowanym; c) HAP keratynowanym; d)<br />

HAP żelatynowanym; e) lek przed immobilizacją<br />

przechowywany w temperaturz pokojowej; f) lek<br />

przed immobilizacją inkubowany w 60 0 C.<br />

FIG.2. Stability of amikacin non-bound during<br />

immobilization process performed at 60 0 C temperature.<br />

Sample of drug remaining after immobilization on:<br />

a) silanized HAP; b) non-modified HAP;<br />

c) keratin-sealed; d) gelatin-sealed; e) drug before<br />

immobilization stored at RT; f) drug before immobilization<br />

incubated at 60 0 C.<br />

The last step of this research concerned checking of the<br />

influence of modified biomaterials on growth and division<br />

of human osteoblasts. During the experiment, cell number<br />

increased with time reaching the highest value at 312 h. Cell<br />

viability exceeded 95% what indicates that modified carriers<br />

were non toxic to osteoblasts.<br />

Conclusions<br />

1. Alkaline medium of reaction has relevant influence on<br />

increase of amikacin immobilization efficiency.<br />

2. Concentration of tested drug, temperature and time of<br />

immobilization process influence on amount of amikacin<br />

bound to biomaterial.<br />

3. Hybrid biomaterials (HAP–amikacin) reveal high antimicrobial<br />

activity against S. aureus and they are not cytotoxic<br />

towards human osteoblasts.<br />

References<br />

[6] Weethal H. Covalent coupling methods for inorganic support<br />

materials. Methods Enzymol., 44 (1976), 134-148<br />

[7] Ginalska G. Uryniak A., Łobarzewski J., Osińska M., A metod of<br />

antibiotic immobilization. Polish Patent no P-358934, 2003. Biuletyn<br />

Urzędu Patentowego 18 (2004), 801, s.124.<br />

[8] Ginalska G., Kowalczuk D., Osińska M. Amikacin-loaded vascular<br />

prothesis as an effective drug carrier. Int. J. Pharmaceut.<br />

(2007), doi: 1.1016/j.ipharm.2007.02.016<br />

[9] Zalewska J., Ginalska G., Ślósarczyk A., Godlewski P. The<br />

influence of protein modification on hydroxyapatite properties<br />

as gentamicin carrier. Engineering of biomaterials 58-60 (2006),<br />

214-216.

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!