Papel de las actividades superóxido dismutasa y catalasa en la ...

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RESULTADO S Y DISCUSIÓN resultados obtenidos con Pdp11 y lenguado sean diferentes a los obtenidos previamente con Pdp11 y dorada (Díaz-Rosales et al., 2006). Por último, además del efecto inmunológico de los probióticos sobre la respuesta inmune de lenguado, se han evaluado posibles cambios en la microbiota intestinal provocados por los probióticos adicionados a la dieta. A pesar del gran número de trabajos publicados que estudian las comunidades microbianas de peces (Spanggaard et al., 2000; Holben et al., 2002; Sandaa et al., 2003; Al-Harbi y Naim Uddin, 2004; Hjelm et al., 2004; Huber et al., 2004; Jensen et al., 2004), ninguno evalúa los posibles cambios en esa microbiota tras la administración de probióticos. En este trabajo se ha empleado la técnica de electroforesis en geles de gradiente desnaturalizante (DGGE) (Muyzer et al., 1993) para estudiar la microbiota intestinal de lenguados alimentados con probióticos. Se ensayaron dos pares de cebadores universales (Nübel et al., 1996; Jensen et al., 2004), y tras el análisis del patrón de bandas por el coeficiente de Pearson, el de Nübel et al. (1996) fue seleccionado como el mejor para el estudio de las comunidades con las que se estaba trabajando. El patrón de bandas obtenido fue muy simple, con pocas bandas predominantes, lo que podría concordar con lo descrito por Muyzer et al. (1993) quienes afirman que comunidades con pocas especies dominantes producirán patrones más simples y que las especies menos abundantes no estarán representadas adecuadamente en dicho patrón. Además la técnica presenta limitaciones, y es posible que algunas bandas no representen especies individuales, como sería en teoría, sino que grupos de especies pueden tener el mismo contenido relativo de G+C, comigrando (Simpson et al., 1999; Temmerman et al., 2003). Estas limitaciones conducirían a un descenso en el número de bandas presentes, pudiendo tener una influencia en la aparente diversidad, así como en los valores de similitud (McCraken et al., 2001). Los resultados obtenidos no demuestran que los probióticos induzcan cambios significativos en la microbiota intestinal, ya que las bandas que aparecen en los grupos que reciben el probiótico también están presentes en los grupos control. Por otro lado, no puede confirmarse que las bandas presentes correspondan a la cepa Pdp11 o a Pdp13, atendiendo simplemente a la movilidad electroforética, por tanto, 56
RESULTADO S Y DISCUSIÓN harían falta estudios de identificación filogenética, secuenciación de los productos de PCR. Lo que sí podemos afirmar es que ninguna de las cepas es capaz, a la dosis (10 9 ufc g -1 ) y tiempo ensayados (dos meses), de inducir cambios significativos en la microbiota intestinal. De acuerdo con Ouwehand et al. (2002), para considerar una bacteria como probiótico no es necesario que induzca cambios en la microbiota intestinal, para ejercer un efecto local o durante el tránsito a través del sistema gastrointestinal, de hecho, la variación en la microbiota en peces es sustancial y fluctúa diariamente (Spanggaard et al., 2000; Al-Harbi y Naim Uddin, 2004; Panigrahi et al., 2004). 57
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