Papel de las actividades superóxido dismutasa y catalasa en la ...

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RESULTADO S Y DISCUSIÓN Estos resultados sugieren que la estimulación observada tras la administración por vía oral del alga completa liofilizada sería debida a otro de los componentes del alga, con propiedades inmunoestimulantes. Por otro lado, la acción inmunoestimulante del polisacárido puede estar dirigida a otro parámetro inmunológico, no necesariamente al estallido respiratorio, así existen numerosos trabajos que describen la capacidad inmunoestimulante de polisacáridos en peces, incrementando la actividad lisozima en el suero, la actividad del complemento, la actividad citotóxica de fagocitos o la actividad fagocítica, entre otras (Santarém et al., 1997; Esteban et al., 2001; Chang et al., 2003; Bagni et al., 2005; Kumari y Sahoo, 2006). Otra de las estrategias desarrolladas en esta Memoria para el tratamiento de la pseudotuberculosis fue el empleo de bacterias potencialmente probióticas. En el trabajo realizado (artículo 2.3., Sección de artículos) las bacterias potencialmente probióticas fueron administradas por vía oral, suplementándose el pienso con el que eran alimentados los lenguados. En este caso, además de evaluar el estallido respiratorio de fagocitos de riñón, se llevó a cabo una infección experimental con P. damselae subsp. piscicida, para determinar el grado de protección que pudieran aportar los probióticos. Al mismo tiempo, se estudió la microbiota intestinal, con objeto de detectar posibles cambios que produjeran los probióticos incorporados en la dieta. Las bacterias seleccionadas para este experimento fueron las cepas Pdp11 y Pdp13, aisladas de piel de dorada (Chabrillón, 2003). Su identificación nos lleva a situarlas dentro de la familia Alteromonadaceae, género Shewanella. Es el primer ensayo in vivo que se realiza con Pdp13, en cambio con la cepa Pdp11 ya existen varios trabajos publicados, así Chabrillón et al. (2005a) estudiaron la interacción con el patógeno Vibrio harveyi, mostrando la capacidad de Pdp11 de adherirse al mucus intestinal de dorada, el efecto antagonista frente a una cepa patógena de V. harveyi, la capacidad de inhibir la unión del patógeno y, por último, de conferir protección frente una infección experimental. También se han publicado resultados obtenidos con Pdp11 y la bacteria patógena P. damselae subsp. piscicida, así Chabrillón et al. (2005b) demostraron el efecto antagonista de Pdp11 frente a una cepa de P. damselae subsp. piscicida y la inhibición de la unión de dicho patógeno al mucus intestinal. Estos resultados obtenidos 54
RESULTADO S Y DISCUSIÓN permiten considerar a la cepa Pdp11 como una buena candidata para ser usada como probiótico. En cuanto a la posible estimulación del estallido respiratorio se ha observado que mientras la producción de anión superóxido por parte de los fagocitos aislados de peces alimentados con la cepa Pdp11 se ve incrementada significativamente transcurridos dos meses desde el inicio del experimento, los peces alimentados con la cepa Pdp13 no muestran esta respuesta. El efecto de la cepa Pdp13 se observa tras la infección experimental, ya que el grupo de peces alimentados con esta cepa alcanza un porcentaje de supervivencia más elevado tras la inoculación del patógeno P. damselae subsp. piscicida. Aunque existen numerosos trabajos en los que se muestra la inducción del estallido respiratorio por probióticos (Nikoskelainen et al., 2003; Gullian et al., 2004; Aubin et al., 2005; Brunt y Austin, 2005), el que el potencial probiótico Pdp13 no haya incrementado la producción de anión superóxido, no significa que no sea capaz de inducir algún otro parámetro inmunológico. De hecho, el porcentaje de supervivencia, tras la infección experimental, sí se ve incrementado. Varios autores han mostrado el efecto de probióticos sobre parámetros inmunológicos diferentes al estallido respiratorio, como las actividades fagocítica (Irianto y Austin, 2003; Panigrahi et al., 2004; Brunt y Austin, 2005; Salinas et al., 2005; Díaz-Rosales et al., 2006), del complemento (Panigrahi et al., 2004; Díaz-Rosales et al., 2006), de la lisozima (Irianto y Austin, 2003; Panigrahi et al., 2004) o la citotóxica (Salinas et al., 2005; Díaz-Rosales et al., 2006). Además ha sido descrito el efecto de los probióticos no sólo sobre la respuesta inmune inespecífica, sino también sobre la específica, incrementando los niveles de inmunoglobulinas en el suero (Nikoskelainen et al., 2003; Aubin et al., 2005). Por estas razones, la cepa Pdp13 puede ser considerado también como probiótico, aunque sería necesaria la evaluación de otros parámetros inmunológicos. Por otro lado, las bacterias probióticas tienen que ser administradas a una dosis óptima, que dependerá del tamaño del pez y de la cepa (Nikoskelainen et al., 2003), por esta razón puede que el efecto de la cepa Pdp11 sea diferente al de Pdp13, y que los 55
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