Papel de las actividades superóxido dismutasa y catalasa en la ...

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INTRODUCCIÓN Para esclarecer este último punto es imprescindible profundizar en el estudio de las actividades superóxido dismutasa y catalasa manifestadas por P. damselae subsp. piscicida. Una mayor información sobre el papel de dichas actividades en la virulencia del patógeno podría contribuir a entender las interacciones entre P. damselae subsp. piscicida y su hospedador. Barnes et al. (1999a) determinaron la existencia en P. damselae subsp. piscicida de una SOD con hierro en su centro activo, localizada en el espacio periplásmico, y de una catalasa, sin determinar, localizada en el citoplasma. La actividad SOD se veía reducida por el crecimiento en condiciones restrictivas de hierro, así como en bajas concentraciones de oxígeno, mientras que la catalasa era expresada constitutivamente, aunque en los geles se apreciaron diferencias en los niveles de la actividad de las diferentes cepas analizadas. 4. ESTIMULACIÓN DEL ESTALLIDO RESPIRATORIO POR DIFERENTES MICROORGANISMOS FRENTE A LA INFECCIÓN POR Photobacterium damselae subsp. piscicida 4.1. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO DE LA PSEUDOTUBERCULOSIS El principal método utilizado en las piscifactorías para el control de la enfermedad son los agentes quimioterapéuticos: los antibióticos. Hasta finales de los ochenta eran muy efectivos en el tratamiento de esta infección, pero la aparición de cepas resistentes (Aoki et al., 1981; Miranda y Zemelman, 2002; Radu et al., 2003; Zorrilla et al., 2003) y la contaminación del medio acuático (Kautsky et al., 2000; Sivaram et al., 2004) han llegado a constituir un grave problema en la acuicultura. La prevención de las enfermedades infecciosas es una alternativa conveniente, de ahí que el desarrollo de sustancias inmunoestimulantes, capaces de activar el sistema inmune del pez e inducir una mejor respuesta frente a los patógenos, suponga una buena alternativa al uso de antibióticos en acuicultura (Sakai, 1999). Además de la posible aparición de resistencias, otro inconveniente que explica la ineficacia del tratamiento con antibióticos es el hecho de que P. damselae subsp. piscicida puede pasar por un periodo intracelular 22
INTRODUCCIÓN de parasitismo en el interior del macrófago durante la infección (Kusuda y Salati, 1993), lo que le evitaría estar en contacto con el antibiótico. Se comprueba, por tanto, que la inmunoprofilaxis sería la mejor vía para prevenir la pseudotuberculosis. A lo largo de los últimos veinte años, ha salido a la luz una gran variedad de estudios que han analizado la eficacia de la inmunización mediante vacunación a la hora de prevenir la pseudotuberculosis (Romalde y Magariños, 1997). La mayoría de las vacunas probadas consistieron en células inactivadas por calor o por formalina (Fukuda y Kusuda, 1981; Kusuda y Hamaguchi, 1987; Kusuda y Hamaguchi, 1988; Hamaguchi y Kusuda, 1989). Aunque se alcanzó un cierto grado de protección, los mejores resultados fueron obtenidos empleando formulaciones basadas en los lipopolisacáridos y en las fracciones ribosomales de las bacterias (Fukuda y Kusuda, 1985; Kusuda et al., 1988; Kawakami et al., 1997). Sin embargo, estas formulaciones presentaron no sólo problemas de reproducibilidad, sino también dificultades en su producción a gran escala. La inmunización pasiva también ha sido evaluada (Fukuda y Kusuda, 1981), pero los resultados mostraron un tiempo muy corto de protección. Uno de los porcentajes de protección más altos frente a la pseudotuberculosis se obtuvo con una bacterina enriquecida con productos extracelulares (ECPs) (Magariños et al., 1994, 1997, 1999). Esta vacuna en la actualidad está disponible comercialmente y ha sido empleada con éxito en varios países europeos, incluyendo España, Portugal y Grecia. La investigación en busca de vacunas más efectivas se ha dirigido también hacia el uso de bacterias vivas atenuadas (Kusuda y Hamaguchi, 1988), cuya utilización todavía no está permitida, y el uso de proteínas de la envuelta celular (Magariños et al., 1994) como antígenos protectores. Tal y como mencionamos anteriormente, Magariños et al. (2000) demostraron por medio de la técnica RAPD la existencia de dos linajes clonales según su procedencia: uno que incluiría a las cepas de origen europeo y otro que englobaría a las de procedencia japonesa y norteamericana. Más recientemente, Juíz-Río et al. (2005), aplicando la técnica de hibridación subtractiva, concluyeron que este patógeno presenta una alta heterogeneidad genética. Sin embargo, P. damselae subsp. piscicida ha mostrado ser un microorganismo bioquímica y antigénicamente homogéneo, incluyendo 23
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