ProNews-12-Q3 - 波仕特生物科技股份有限公司
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只 需 一 組 kit, 就 可 讓 你 得 到 total cDNA!!<br />
By Tiffany Lin<br />
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All in One 組 合 , 省 去 分 項 添 購 的 麻 煩<br />
Oligo dT 適 用 於 具 有 poly A tail 的 RNA, 例 如 哺 乳 類 動 物 , 可 以 轉 錄 出 基 因 的 全 長<br />
Random Hexmer 適 用 於 具 有 hairpin 的 RNA, 可 以 轉 錄 出 大 量 的 cDNA<br />
RNase inhibitor 可 以 保 護 RNA, 避 免 RNA 在 轉 錄 的 過 程 中 分 解<br />
高 靈 敏 度 與 高 效 率 MMLV, 不 須 大 量 的 RNA, 即 使 微 量 的 RNA 亦 可 轉 錄 出 cDNA<br />
轉 錄 出 的 cDNA 可 以 應 用 於 real-time PCR, microarray 的 實 驗<br />
MMLV Reverse Transcription Kit 實 測 結 果<br />
使 用 zebra fish RNA 用 oligo dT 轉 錄 出 cDNA --> 將 cDNA 做 10X 稀 釋 後 用 bb3 primer set 上 real-time PCR<br />
Lane 1 : 100 ng<br />
Lane 2 : 10 ng<br />
Lane 3: 1 ng<br />
Lane 4 : 0.1 ng<br />
Lane 5 : 0.01 ng<br />
[ 圖 一 ] [ 圖 二 ] [ 圖 三 ]<br />
1 2 3 4 5<br />
[ 圖 一 ] real time PCR 後 的 產 物 跑 膠 結 果<br />
--> 產 物 隨 著 template 量 遞 減<br />
[ 圖 二 ] melting curve<br />
--> 產 物 專 一<br />
[ 圖 三 ] Cq 圖<br />
--> Cq 值 隨 著 10X 稀 釋 而 有 3 的 差 異<br />
Component Name Volumn Cap Color<br />
產 品 編 號 PT-RT-KIT SA-RT-KIT<br />
反 應 數 100 rxns 10 rxns<br />
1 M-MuLV Reverse Transcriptase 50 μ L 5 μ L White Cap<br />
2 5x Reaction Buffer 1 mL 100 μ L White Cap<br />
3 10mM dNTP 250 μ L 25 μ L Grey Cap<br />
4 Oligo (dT) 18 (1 μ g/μ L) 50 μ L 5 μ L Clear Cap<br />
5 Random Hexamers (1 μ g/μ L) 50 μ L 5 μ L Violet Cap<br />
6 DEPC Water 2mL 500 μ L Orange Cap<br />
7 RNase Inhibitor 50 μ L (40U/μ L) 50 μ L 5 μ L Green Cap<br />
波 仕 特 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司<br />
Protech Technology Enterprise Co., Ltd.<br />
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