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Protein Purification and Analysis
產 品 目 錄 Product Catalog
螢 光 蛋 白 免 疫 沉 澱 實 驗 (Fluorescent protein IP assay)
Chromotek 這 間 公 司 在 2007 年 創 立 於 德 國 , 公 司 成 立 時 最 主 要 目 的 是 要 開 發 出 取 代 傳 統 抗 體 法 來 做 螢 光 蛋 白
免 疫 沉 澱 實 驗 的 工 具 , 依 據 此 原 則 而 開 發 出 的 技 術 稱 為 Chromobody®。Chromobody® 一 推 出 , 馬 上 將 螢 光 蛋 白
免 疫 沉 澱 實 驗 帶 向 另 一 種 全 新 的 境 界 , 除 了 縮 短 實 驗 的 流 程 與 時 間 外 , 更 大 幅 改 善 雜 訊 干 擾 影 響 實 驗 判 讀 的 問
題 。Chromotek 更 將 Chromobody® 技 術 做 為 一 種 平 台 , 進 而 開 發 出 一 系 列 的 相 關 產 品 。
蛋
白
質
純
化
與
分
析
Chromotek 產 品 線
GFP-Trap®
RFP-Trap®
Booster
Monoclonal-Ab
Binding control
何 謂 Chromobody®
一 般 抗 體 的 組 成 , 大 多 為 由 兩 個 heavy chain 和 兩 個 light chain 所 組 成 的 一 個 大 型 的 複 合 型 分 子 , 分 子 量 約
為 150kDa, 基 於 抗 原 辨 識 位 置 的 不 同 而 有 其 專 一 性 的 結 合 力 。 由 於 傳 統 的 抗 體 免 疫 沉 澱 法 需 要 使 用 到 大 量 的 抗
體 來 將 目 標 蛋 白 抓 下 , 在 抓 下 後 要 做 確 認 實 驗 時 , 往 往 都 會 在 SDS-PAGE 後 的 染 膠 結 果 發 現 嚴 重 的 heavy chain
和 light chian 的 干 擾 , 導 致 實 驗 結 果 判 讀 不 易 。
駱 駝 (Camelidae) 在 產 生 抗 體 的 過 程 很 特 殊 , 只 會 產 生 heavy chain 的 抗 體 , 不 會 有 light chain 的 部 分 , 所 以
由 駱 駝 生 產 的 抗 體 稱 為 hcAbs,hcAbs 的 抗 原 決 定 位 則 稱 為 single variable domain (VHH)。Chromotek 的 研 究 團 隊
發 現 此 抗 體 的 特 殊 性 , 利 用 此 特 殊 性 來 生 產 抗 體 (GFP 和 RFP 抗 體 ), 將 VHH 上 的 抗 原 辨 識 位 置 用 特 殊 方 法 分 離
出 來 , 分 離 成 分 子 量 只 有 約 13kDa 的 小 片 段 。 這 些 小 片 段 則 稱 為 Chromobody®。Chromobody® 可 以 和 多 種 物 質
結 合 而 產 生 不 同 功 用 , 例 如 和 agarose 或 magnetic beads 結 合 , 可 以 將 目 標 protein 抓 下 ; 若 是 和 螢 光 染 劑 結 合 ,
則 可 以 增 強 螢 光 的 強 度 , 如 此 可 以 應 用 在 多 種 實 驗 上 , 例 如 Pulldown assay、Immunoprecipitation (IP)、Co-IP、
Western Blot、Mass spec 和 Chromatin-IP (Ch-IP) 等 實 驗 。
Chromobody® 的 特 點 ( 和 傳 統 抗 體 法 相 比 )
- 無 lot 間 的 差 異 性 , 穩 定 性 與 實 驗 再 現 性 極 高
- 使 用 方 便
- 可 以 大 幅 縮 短 實 驗 時 間
- 至 今 已 有 多 篇 知 名 期 刊 發 表 使 用 Chromotek 產 品 來 研 究 螢 光 蛋 白
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