Rezumatul tezei de doctorat - USAMV Cluj-Napoca
Rezumatul tezei de doctorat - USAMV Cluj-Napoca
Rezumatul tezei de doctorat - USAMV Cluj-Napoca
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
Sabouraud Dextrose Broth (SDB-bulion Sabouraud cu <strong>de</strong>xtroză) (Fluka)<br />
Toate coloniile <strong>de</strong> fungi saprolegnieni <strong>de</strong> pe mediile soli<strong>de</strong> au fost pasate în pahare<br />
Erlenmeyer cu 100 ml mediu lichid cu adaos <strong>de</strong> antibiotic şi menŃinute într-un incubator cu<br />
agitator, la temperatura <strong>de</strong> 22°C ± 2°C, timp <strong>de</strong> 5-7 zile, în funcŃie <strong>de</strong> gradul <strong>de</strong> <strong>de</strong>zvoltare.<br />
Peletele miceliale au fost apoi filtrate, spălate cu apă distilată şi menŃinute la temperatura <strong>de</strong><br />
-20°C până la extracŃia ADN (metodă adaptată după Leclerc şi col., 2000).<br />
MenŃionez faptul că la această procedură au fost supuse probele <strong>de</strong> fungi obŃinuŃi din<br />
apa recoltată în cursul lunii iunie 2009, un număr total <strong>de</strong> 138 probe, din care 69 probe pe<br />
combinaŃia <strong>de</strong> mediu solid-lichid Potato Dextrose Agar (PDA-agar cu cartof-<strong>de</strong>xtroză)-<br />
Potato Dextrose Broth (PDB-bulion cu cartof-<strong>de</strong>xtroză) şi 69 probe combinaŃia <strong>de</strong> mediu<br />
solid-lichid Sabouraud 2% Glucose Agar (SGA-agar Sabouraud cu glucoză) - Sabouraud<br />
Dextrose Broth (SDB-bulion Sabouraud cu <strong>de</strong>xtroză).<br />
I.3.3.3. Antibioticele utilizate în experiment<br />
Pentru a preîntâmpina <strong>de</strong>zvoltarea şi contaminarea bacteriană, în mediile <strong>de</strong> cultură<br />
pentru fungi se utilizează mai multe tipuri <strong>de</strong> antibiotice (Lategan şi col., 2003, 2004). În<br />
experienŃa noastră, am optat pentru: Penicillin G potassium salt (sare <strong>de</strong> potasiu cu<br />
penicilină G) (Sigma). ConcentraŃia <strong>de</strong> lucru utilizată <strong>de</strong> noi pe mediile soli<strong>de</strong>, cât şi lichi<strong>de</strong><br />
a fost <strong>de</strong> 100 mg L -1 Penicilină G cu sare <strong>de</strong> potasiu.<br />
I.3.4. Caracterizarea morfologică a tulpinilor <strong>de</strong> Saprolegnia<br />
Pentru caracterizarea mofologică a tulpinilor <strong>de</strong> Saprolegnia <strong>de</strong>zvoltate pe mediile <strong>de</strong><br />
cultură, s-a urmărit pe cele 69 probe următoarele aspecte: tipurile <strong>de</strong> hife caracteristice<br />
genului Saprolegnia, reproducerea asexuată (prezenŃa flagelilor pe zoosporii primari) şi<br />
formarea structurilor sexuale (anteridiile şi oogoanele).<br />
Tulpinile fungice din fiecare bazin, la 72 ore <strong>de</strong> creştere pe mediul solid PDA, au fost<br />
reînsămânŃate în plăci Petri <strong>de</strong> plastic cu diamentrul <strong>de</strong> 9 cm, pe acelaşi mediu PDA, la<br />
temperatura <strong>de</strong> 22ºC, pH 5,5. Creşterea Saprolegniei a fost examinată periodic la microscop<br />
11