21.11.2014 Views

Rezumatul tezei de doctorat - USAMV Cluj-Napoca

Rezumatul tezei de doctorat - USAMV Cluj-Napoca

Rezumatul tezei de doctorat - USAMV Cluj-Napoca

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

Sabouraud Dextrose Broth (SDB-bulion Sabouraud cu <strong>de</strong>xtroză) (Fluka)<br />

Toate coloniile <strong>de</strong> fungi saprolegnieni <strong>de</strong> pe mediile soli<strong>de</strong> au fost pasate în pahare<br />

Erlenmeyer cu 100 ml mediu lichid cu adaos <strong>de</strong> antibiotic şi menŃinute într-un incubator cu<br />

agitator, la temperatura <strong>de</strong> 22°C ± 2°C, timp <strong>de</strong> 5-7 zile, în funcŃie <strong>de</strong> gradul <strong>de</strong> <strong>de</strong>zvoltare.<br />

Peletele miceliale au fost apoi filtrate, spălate cu apă distilată şi menŃinute la temperatura <strong>de</strong><br />

-20°C până la extracŃia ADN (metodă adaptată după Leclerc şi col., 2000).<br />

MenŃionez faptul că la această procedură au fost supuse probele <strong>de</strong> fungi obŃinuŃi din<br />

apa recoltată în cursul lunii iunie 2009, un număr total <strong>de</strong> 138 probe, din care 69 probe pe<br />

combinaŃia <strong>de</strong> mediu solid-lichid Potato Dextrose Agar (PDA-agar cu cartof-<strong>de</strong>xtroză)-<br />

Potato Dextrose Broth (PDB-bulion cu cartof-<strong>de</strong>xtroză) şi 69 probe combinaŃia <strong>de</strong> mediu<br />

solid-lichid Sabouraud 2% Glucose Agar (SGA-agar Sabouraud cu glucoză) - Sabouraud<br />

Dextrose Broth (SDB-bulion Sabouraud cu <strong>de</strong>xtroză).<br />

I.3.3.3. Antibioticele utilizate în experiment<br />

Pentru a preîntâmpina <strong>de</strong>zvoltarea şi contaminarea bacteriană, în mediile <strong>de</strong> cultură<br />

pentru fungi se utilizează mai multe tipuri <strong>de</strong> antibiotice (Lategan şi col., 2003, 2004). În<br />

experienŃa noastră, am optat pentru: Penicillin G potassium salt (sare <strong>de</strong> potasiu cu<br />

penicilină G) (Sigma). ConcentraŃia <strong>de</strong> lucru utilizată <strong>de</strong> noi pe mediile soli<strong>de</strong>, cât şi lichi<strong>de</strong><br />

a fost <strong>de</strong> 100 mg L -1 Penicilină G cu sare <strong>de</strong> potasiu.<br />

I.3.4. Caracterizarea morfologică a tulpinilor <strong>de</strong> Saprolegnia<br />

Pentru caracterizarea mofologică a tulpinilor <strong>de</strong> Saprolegnia <strong>de</strong>zvoltate pe mediile <strong>de</strong><br />

cultură, s-a urmărit pe cele 69 probe următoarele aspecte: tipurile <strong>de</strong> hife caracteristice<br />

genului Saprolegnia, reproducerea asexuată (prezenŃa flagelilor pe zoosporii primari) şi<br />

formarea structurilor sexuale (anteridiile şi oogoanele).<br />

Tulpinile fungice din fiecare bazin, la 72 ore <strong>de</strong> creştere pe mediul solid PDA, au fost<br />

reînsămânŃate în plăci Petri <strong>de</strong> plastic cu diamentrul <strong>de</strong> 9 cm, pe acelaşi mediu PDA, la<br />

temperatura <strong>de</strong> 22ºC, pH 5,5. Creşterea Saprolegniei a fost examinată periodic la microscop<br />

11

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!