2009: 波仕特20 歲了，這一路走來感謝有您的支持!!! - 波仕特生物科技 ...

2009-Q1
生 物 科 技 大 事 記
1938: 分 子 生 物 學 (Molecular Biology) 名 詞 出 現 。
1983: Kary B. Mullis 發 明 聚 合 酶 連 鎖 反 應 技 術 Polymerase Chain Reaction ( PCR ), 可 以 快
速 且 大 量 的 複 製 DNA, 是 研 究 生 物 科 技 相 當 重 要 的 方 法 ; 獲 得 1993 年 諾 貝 爾 化 學 獎 。
1987: 人 體 基 因 體 計 畫 (Human Gemone Project, HGP) 基 金 成 立 。
1989: 波 仕 特 生 物 科 技 公 司 成 立 。
1993: 生 物 晶 片 (Biochip) 公 司 (Affymetrix) 首 度 成 立 。
1996: 陶 莉 羊 誕 生 。
1998: 人 類 胚 胎 幹 細 胞 (human embryonic stem cell) 成 功 被 培 養 出 來 。
1998: Celera Genomics 成 立 , 角 逐 基 因 圖 譜 定 序 , 誓 言 3 年 內 完 成 。
2000: Celera Genomics and HGP 共 同 宣 布 人 類 基 因 圖 譜 草 圖 完 成 。
2001: 人 類 基 因 圖 譜 完 成 , 分 別 發 表 在 Nature and Science, 基 因 研 究 從 此 熱 烈 展 開 。
2002: 稻 米 基 因 定 序 完 成 。 是 第 一 個 農 作 物 被 定 序 完 成 的 植 物 。
2003: 老 鼠 基 因 定 序 完 成 。
2006: Andrew Z. Fire and Craig C. Mello 由 於 RNAi 機 制 研 究 獲 得 諾 貝 爾 生 理 及 醫 學 獎 。
2007: Mario R. Capecchi, Oliver Smithies and Martin J. Evans 因 為 gene targeting and
Knock-out mice 技 術 獲 得 諾 貝 爾 生 理 及 醫 學 獎 , 剔 除 的 實 驗 闡 明 了 胚 胎 發 育 , 成 人 生 理 學 ,
衰 老 基 因 和 遺 傳 基 因 等 基 因 功 能 性 分 析 。
2009: 波 仕 特 20 歲 了 , 這 一 路 走 來 感 謝 有 您 的 支 持 !!!
波 仕 特 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司
Protech web site: http://www.bio-protech.com.tw
台 北 02-2655-7677 竹 南 037-680-138 新 竹 03-5753468
台 中 04-2262-4883 高 雄 07-342-5707 花 蓮 03-846-3953

電 穿 孔 法 (electroporation) 的 基 本 原 理 是 利 用 瞬 間 高 壓 使 細 胞 膜 形 成 可 恢 復 的 孔 洞 ,DNA 經 由 細 胞 膜 孔 而 進 入
cell 中 , 當 電 場 消 失 後 細 胞 膜 可 再 回 復 , 使 DNA 保 留 在 細 胞 內 。 一 般 而 言 , 細 胞 膜 或 是 平 面 的 lipid bilayer 膜 ,
在 極 短 時 間 內 通 以 高 電 場 , 會 造 成 細 胞 膜 的 導 電 性 和 滲 透 的 增 加 , 如 果 電 場 增 加 至 某 種 程 度 , 則 會 造 成 細 胞 形 成
孔 , 這 種 現 象 被 稱 為 電 性 破 裂 (electrical breakdown) 是 屬 於 可 恢 復 的 破 裂 。 電 穿 孔 適 用 於 所 有 細 胞 , 包 括 embryonic
stem cells、primary cell 等 。
Ingenio Electroporation Kits 的 特 點 :
Easy Protocol:
1. 收 集 細 胞 , 使 細 胞 懸 浮 在
Ingenio electroporation solution 內
(1-2 million cells/ml electroporation solution)
↓
2. 加 入 DNA 到 step1 的 master mix 中
(20ug DNA per ml of step 1 cell mix)
↓
3. 取 100 μl DNA/cell mix 到 0.2 cm cuvette
進 行 electroporation
↓
4. 將 電 好 的 細 胞 置 於 culture medium
↓
5. 培 養 12-72 小 時
↓
6. 收 細 胞 進 行 測 試
2

Figure 1. Ingenio Outperforms Other
Electroporation Solutions.
在 電 轉 殖 的 過 程 中 你 是 否 遇 到 :
轉 殖 細 胞 死 亡 率 居 高 不 下 、 發
生 爆 管 或 是 過 熱 的 現 象 ? 這 時 您
就 該 試 試 :
Ingenio
Electroporation Kits
B 牌 -electroporation solution
Figure 2. High Cell Viability with Ingenio.
在 作 電 穿 孔 時 最 怕 的 就 是 電 處 理 時 產
生 很 多 氣 泡 、 轉 殖 細 胞 死 亡 率 居 高 不
下 及 發 生 爆 管 現 象 。 Mirus 利 用 特 殊
配 方 提 高 細 胞 轉 殖 率 , 並 有 效 降 低 電
處 理 過 程 中 產 生 的 熱 能 , 大 幅 減 少 因
溫 度 過 熱 而 導 致 的 細 胞 死 亡 。 在
Figure 1 and 2 可 看 出 Ingenio TM electroporation
solution 無 論 在 轉 殖 效 率 或
細 胞 存 活 率 方 面 都 較 競 爭 廠 牌 高 2~3
倍 , 是 您 作 電 穿 孔 時 的 不 二 選 擇 。
B 牌 -electroporation solution
訂 購 資 訊 :
Ingenio Electroporation Kits
Product No.
Kit Components
Cuvettes Ingenio Cell Droppers
Solution
MIR 50112 25 of 0.2 cm 6.25 ml 25
MIR 50113 25 of 0.4 cm 6.25 ml 25
MIR 50115 50 of 0.2 cm 12.5 ml 50
MIR 50116 50 of 0.4 cm 12.5 ml 50
MIR 50118 100 of 0.2 cm 2 x 12.5 ml 100
MIR 50119 100 of 0.4 cm 2 x 12.5 ml 100
Ingenio Cuvettes, 0.2 cm
MIR 50120 25 pk, 0.2 cm cuvettes
MIR 50121 50 pk, 0.2 cm cuvettes
Ingenio Cuvettes, 0.4 cm
MIR 50122 25 pk, 0.4 cm cuvettes
MIR 50123 50 pk, 0.4 cm cuvettes
3
Ingenio Electroporation
Solution
Product No. Volume
MIR 50111 6.25 ml
MIR 50114 12.5 ml
MIR 50117 2 x 12.5 ml
特 別 注 意 :
Amaxa user 一 定 要 使 用 0.2 cm cuvette
非 Amaxa user, ex:Bio-Rad user 則 可 選
擇 0.2 or 0.4 cm cuvette

Platypus Technologies
Cell migration assay / Cell invasion assay
癌 細 胞 的 轉 移 擴 散 (metastasis) 往 往 是 癌 症 病 人 在 臨 床 治 療 上 癒 後 的 一 重 要 指 標 , 在 癌 症 的 分 期 上 , 癌 細
胞 的 轉 移 擴 散 與 否 也 是 一 個 重 要 的 分 界 , 當 腫 瘤 細 胞 僅 生 長 發 病 於 局 部 位 置 , 稱 為 局 部 或 原 位 癌 。 如 果
能 在 此 階 段 進 行 治 療 則 治 癒 率 最 高 。 當 腫 瘤 細 胞 藉 由 血 液 、 淋 巴 管 等 方 式 轉 移 到 人 體 其 他 部 位 生 長 程 續
發 性 惡 性 腫 瘤 , 就 稱 為 轉 移 性 癌 。 而 癌 細 胞 在 轉 移 擴 散 的 過 程 中 , 可 分 為 侵 襲 (invasion) 及 轉 移 (migration)
兩 個 階 段 , 其 中 腫 瘤 細 胞 破 壞 基 底 膜 (basal membrane) 侵 入 周 圍 組 織 , 便 稱 之 為 侵 襲 , 而 癌 細 胞 藉 由 侵 入
到 循 環 系 統 中 的 血 管 或 淋 巴 管 , 隨 著 循 環 的 體 液 而 移 動 , 便 稱 之 為 轉 移 。Oris 利 用 BME(basement
membrane extract) 真 實 模 擬 生 物 體 內 基 地 膜 狀 況 , 讓 貼 附 細 胞 進 行 細 胞 侵 犯 實 驗 。 以 stopper 創 造
migration zone, 讓 您 準 確 定 量 細 胞 遷 移 速 率 。
特 點 :
1. Membrane-free migration – 不 需 處 理 麻 煩 的 cell culture insert、 不 需 進 行 染 色
2. Preserve cell morphology – 可 在 同 一 個 well 內 即 時 觀 察 細 胞 型 態 的 改 變
3. Reproducible results – 特 殊 設 計 確 保 您 well 和 well 之 間 的 CV's < 12%.
4. Versatile – 後 續 可 利 用 fluorescent plate reader, microscope or digital imaging system 讀 取 data
5. Flexible – 不 需 特 殊 儀 器 即 可 作 kinetic or endpoint based cell migration assays
Easy Protocol:
細 胞 遷 移 實 驗
細 胞 侵 襲 實 驗
4

Figure 1: Cell migration data:
End point detection
(using Calcein AM)
(using Cell Tracker Green)
Figure 2: Cell invasion data:
Reference:
Oris cell migration kit 利 用 stopper 創 造 migration zone 讓
細 胞 作 水 平 式 遷 移 , 較 cell culture insert 方 式 更 貼 近 生 物
體 內 狀 況 , 讓 實 驗 更 準 確 。 並 可 在 任 何 時 間 點 使 用 顯 微
鏡 或 digital imaging system 觀 察 細 胞 狀 態 及 以
fluorescent plate reader 讀 取 進 入 migration zone 的 螢 光
值 作 kinetic detection (using Cell Tracker Green) or endpoint
detection (using Calcein AM) 。 獨 特 的 migration
zone 設 計 讓 您 在 單 一 well 內 即 可 得 到 多 種
data。( 請 見 Figure 1)
Oris cell invasion kit 同 樣 利 用 stopper 創 造
invasion zone, 不 同 的 是 利 用 腫 瘤 細 胞 會 破 壞
基 底 膜 (basal membrane) 侵 入 周 圍 組 織 的 特 性
所 以 特 別 在 well 內 添 加 BME(basement membrane
extract) ,BME 是 來 自 Murine Engelbreth
-Holm-Swarm (EHS) 小 鼠 肉 瘤 的 基 底 膜 (Basal
membrane) 萃 取 物 , 可 真 實 模 擬 生 物 體 內 狀 況
進 行 細 胞 侵 犯 實 驗
使 用 傳 統 法 (cell culture insert) 進 行 cell invasion
實 驗 時 , 需 要 將 BME 刮 下 才 能 進 行 細 胞 染
色 , 此 舉 不 僅 耗 時 且 讓 well 間 的 誤 差 變 大 。 現
在 利 用 Oris cell invasion kit 內 附 的 Calcein AM
即 可 輕 鬆 染 細 胞 , 不 需 刮 除 BME 讓 well 間 的
CV’s

讓 您 和 Isotope 說 拜 拜 !
TRANSMAX TRANSCRIPTION FACTOR ASSAY
凝 膠 遷 移 或 電 泳 遷 移 率 檢 測 (Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA) 是 一 種 檢 測 蛋 白 質 和 DNA 序
列 相 互 結 合 的 技 術 , 用 於 研 究 DNA 結 合 蛋 白 和 其 相 關 的 DNA 結 合 序 列 相 互 作 用 , 可 用 於 定 性 和 定 量 分
析 。 這 一 技 術 目 前 已 經 成 為 轉 錄 因 子 研 究 的 傳 統 方 法 。 而 電 泳 遷 移 率 檢 測 本 身 也 存 在 諸 多 缺 點 , 比 如 對
於 低 親 和 力 結 合 很 難 進 行 鑑 定 ; 難 以 比 較 不 同 片 斷 之 間 親 和 力 大 小 的 差 異 ; 操 作 過 程 繁 瑣 且 無 法 量
化 , 讓 人 非 常 困 擾 。 現 在 TransMax Transcription factor assay kit, 讓 您 不 需 跑 煩 人 的 gel 也 不
需 使 用 Isotope 即 可 以 量 化 DNA binding activity of transcription factor in nuclear extracts, 只
需 1~3ug/ul 的 核 蛋 白 即 可 讓 您 輕 輕 鬆 鬆 完 成 實 驗 。
Easy Protocol:
TransMax Transcription factor assay kit
的 特 點 :
●
●
●
●
●
●
可 量 化 轉 錄 因 子 對 DNA 的 結 合 能 力
只 要 1~3ug/ul 的 nuclear extract 即 可
作 實 驗
比 gel shift assay 靈 敏 100 倍
4 hr 即 可 完 成 實 驗
不 需 跑 煩 人 的 gel 或 Isotope
只 要 一 般 的 Luminometer 即 可 作 偵 測
NFκB binding activity
was detected in as little as
0.004 gel shift units
(GSU) of recombinant
p50. (1 GSU = amount of
purified NFκB protein
required to completely
shift 380 fmoles of NFκB
binding site in a standard
gel shift assay.)
訂 購 資 訊 :
Product No.
TM105096
TM101096
TM102096
TM103096
TM104096
TM100100
Product
TransMax AP-1 Assay Kit, 96 rxns
TransMax NFҟB Assay Kit, 96 rxns
TransMax EGR Assay Kit, 96 rxns
TransMax NF-1 Assay Kit, 96 rxns
TransMax PPAR Assay Kit, 96 rxns
TransMax Nuclear Extraction kit,
100 rxns
核 蛋 白
萃 取 試 劑
6

FLUORESCENT SPRINT NEXT GEL
A ready-to-Pour Acrylamide Gel Solution Containing a Fluorescent Stain for Rapid protein
Band Visulazation after Electrophoresis.
特 點 :
1. SDS-PAGE 從 做 膠 到 跑 膠 完 成 , 只 需 1 小 時 , 讓 您 的 Western 一 天 內 完 成 !!
2. 不 需 要 惱 人 的 Coomassie blue or Silver Staining 的 染 色 與 退 染 gel 可 直 接 在 UV lamp 上
觀 察 , 再 無 background 的 煩 惱 .
3. gel 後 續 直 接 應 用 在 1-D, 2-D, Western Blotting, Coomassie Blue, Silver Staining, zip staining
上
操 作 簡 單 : 4 大 步 驟
1. 10 ml Next gel sol. + 90 ul 10% Ammonium Persulfate + 12 ul TEMED.
2. 倒 入 , 插 comb, 靜 置 10-15 min 即 凝 固 !!
3. 跑 膠 , 275-300 V, 30 min
4. UV lamp 下 觀 察 complex protein bands, 不 需 要 任 何 染 色 .
Running 電 壓
Gel
%
MW
Range
包 裝
片 數 (10 cm x
10 cm x 0.75
mm)
編 號
產 品 名 稱
Sprint
(275-300 V, running
time 約 30 分 鐘 )
10%
12.5%
10-200
kDa
3.5-100
kDa
100 ml, 10 片
500 ml 50 片
100 ml, 10 片
500 ml 50 片
M317-100ML-
KIT
Fluorescent SPRINT
NEXT GEL 10 % Solution,
M317-500ML-
KIT
M318-100ML-
KIT
M318-500ML-
KIT
Fluorescent SPRINT
NEXT GEL 12.5 %
Solution,
(175-200 V, running
time 約 60 分 鐘 )
10%
12.5%
10-200
kDa
3.5-100
kDa
100 ml, 10 片
500 ml 50 片
100 ml, 10 片
500 ml 50 片
7
M290-KIT-
100ml
M290-KIT-
500ml
M291-KIT-
100ml
M291-KIT-
500ml
Fluorescent
NEXT GEL
10 % Solution,
Fluorescent NEXT
GEL 12.5 %
Solution,

Cytokinase ELISA Kits
Name Cat # Assay Range Sensitivity Name Cat # Assay Range Sensitivity
Mouse GM-CSF 2002 10-640 5 Human IL-6 2107 10-640 5
Mouse Granzyme B 2014 50-3200 25 Human IL-7 2118 0.25-16 0.125
Mouse IFN-y 2013 10-640 5 Human IL-10 2113 1.25-80 0.625
Mouse IL-1α 2003 10-640 5 Human IL-11 2119 30-1920 15
Mouse IL-1ß 2004 8-512 4 Human IL-12 2120 8-1024 4
Mouse IL-2 2005 16-1024 8 Human IL-13 2121 30-1920 15
Mouse IL-4 2006 12-768 6 Human IL-15 2122 4-512 2
Mouse IL-5 2007 16-1024 8 Human IL-16 2123 30-1920 15
Mouse IL-6 2008 10-640 5 Human IL-17 2124 30-1920 15
Mouse IL-12/IL-23 2015 10-640 5 Human IL-20 2125 60-3840 30
Mouse IL-12 p70 2009 40-2560 20 Human IL-22 2126 10-640 5
Mouse IL-13 2010 25-1600 12.5 Human IL-27 p28 2127 8-512 4
Mouse IL-15 2011 20-1280 10 Human IL-29 2128 30-1920 15
Mouse IL-17 2012 16-1024 8 Human Insulin 2111 100-6400 50
Mouse IL-23 2016 30-1920 15 Human Leptin 2112 15-960 7.5
Mouse MCP-1 (CCL2) 2017 20-1280 10 Human MCP-1 2101 16-1024 8
Mouse TGF-ß1 2018 60-3840 30 Human TGF-ß 2115 25-1600 12.5
Mouse TNF-α 2001 15-960 7.5 Human TGF-ß1 2129 30-1920 15
Human GM-CSF 2102 16-1024 8 Human TGF-ß2 2130 30-1920 15
Human IFN-γ 2116 5-640 2.5 Human TNF-α 2105 8-512 4
Human IL-1 2103 16-1024 8 Human TNF-ß 2114 8-512 4
Human IL-1α 2109 1.6-102.4 0.8 Rat GM-CSF 2201 16-1024 8
Human IL-1ß 2110 1.2-76.8 0.6 Rat IFN-γ 2204 16-1024 8
Human IL-2 2104 40-2560 20 Rat IL-1ß 2205 30-1920 15
Human IL-3 2117 20-1280 10 Rat IL-6 2202 16-1024 8
Human IL-4 2108 4-256 2 Rat IL-10 2206 60-3840 30
Human IL-5 2106 16-1024 8 Rat TNF-α 2203 20-1280 10
Easy, Fast Protocol :4 step, 3.5 hrs, give you accurate results
1 2 3 4
Add Sample
(100ul)
Wash 3 times Detection
Antibody
Wash 3 times Avidin-HRP Wash 3 times TMB substrate Stop buffer
2
1
3
4
操 作 更 簡 單
反 應 更 靈 敏
產 品 特 點 :
實 驗 更 快 速 , 只 需 3.5 hrs.
檢 體 更 廣 泛 : Serum, Plasma, Cell Culture Supernatant
波 長 : 450nm
8

Protein Quantification Assay
特 點 :
你 還 在 使 用 Bradford Protein Assay 嗎 ?
照 過 來 照 過 來 !!
1. 測 量 protein 濃 度 的 利 器 .
2. Protein 能 溶 解 在 Protein solving buffer PSB or Protein
Loading buffer PLB or Laemmli buffer… 一 切 相 似 的 buffer 皆 能 測 量 濃
度 , 不 會 因 為 buffer 衝 突 或 nucleic acid 干 擾 而 影 響 濃 度 準 確 性 !
3. 測 量 靈 敏 度 最 強 : 10-20,000 ng/ul (extended range) or 30-1000 ng/ul
(standard range)
4. 測 量 波 長 : 570 nm (530-700 nm 皆 可 )
5. 彈 性 廣 : Microplate, Semi-micro cuvette, Micro cuvette and NanoDrop 皆 可
測 量 !
最 強 靈 敏 度 !!
Type of assay
Protein
amount per
assay
Determinable
protein conc.
Microplate 0.6-20 ug 30-1,000 ng/ul
Semi-micro
Cuvette
6-200 ug 30-1,000 ng/ul
Micro cuvette 1.2-40 ug 30-1,000 ng/ul
NanoDrop 0.47-7.5 ug 60-1,000 ng/ul
9
訂 購 編 號
740967.50
Approx. 100
rxn
Approx. 10
rxn
Approx. 55
rxn
Approx. 1000
rxn
訂 購 編 號
740967.250
Approx. 450
rxn
Approx. 50
rxn
Approx. 235
rxn
Approx. 3500
rxn

ExactSTART Eukaryotic mRNA 5’- & 3’ - RACE
特 性 :
1. 由 1~10 ug total RNA 獲 得 full length double stand cDNA.
2. 利 用 5’ Race and 3’ Race 來 獲 得 full length cDNA, 完 整 保 留 mRNA 的 5` start
condon and 3’ poly (A)
3. 一 天 內 完 成 實 驗
4. 應 用 : next gene DNA seq., RACE, Cloning, RT-PCR, Microarray 甚 至 其 他 基 因 探
索 與 分 析 方 法 皆 可 適 用
Easy Protocol:
1
1
Total RNA input (1-10ug)
2
3
4
(TAP)
2
3
Alkaline Phosphatase Treatment:
水 解 uncapped mRNA , 使
uncapped mRNA 不 會 影 響 後 續 實
驗 . ( 花 費 時 間 : 15min)
TAP Treatment: 將 5’ cap 移 除 , 以
便 後 續 接 上 5’ RACE Acceptor ( 花
費 時 間 : 30 min)
5
4
5’ RACE Acceptor Oligo Ligation:
將 包 含 PCR primer 1 的 Oligo
Nucleotide 的 5’ RACE 接 上 5’
end ( 花 費 時 間 : 30 min)
6
5
第 一 股 cDNA 合 成 : 藉 由 MMLV
合 成 第 一 股 cDNA( 花 費 時 間 : 1 hr)
7
6
7
Remove RNA: 只 剩 single cDNA
( 花 費 時 間 : 5 min)
PCR: 獲 取 full length double
strand cDNA
訂 購 資 訊 :
10
Cat. No. ES80910
Cat. No. FSE51100
/ FSE5101K
ExactSTART Eukaryotic mRNA
5’- & 3’ - RACE kit (10 rxns)
FailSafe Enzyme Mix Only-
100 unit / 1000 unit

ExactSTART Full-Length cDNA Library Cloning Kit
特 性 :
1. 從 1ug total RNA 中 獲 得 full length double stand cDNA.
2. 保 留 了 最 完 整 的 mRNA 中 ,5’ start condon and 3’ poly (A).
3. 內 附 pre-cut pCDC-1 K vector, 使 用 NotI、AscI site 進 行 cloning 唯 有 full length
cDNA insert 才 能 construct.
4. 應 用 : Full length cDNA library cloning.
Easy Protocol:
1
1
Total RNA input (1-10ug)
2
(TAP)
2
TAP Treatment: 將 5’ cap 移 除 , 以
便 後 續 接 上 RNA Acceptor
3
( 花 費 時 間 : 30 min)
3
RNA Acceptor Oligo Ligation: 將 包
4
含 PCR primer site 及 Not I site 的
Oligo Nucleotide 接 上 5’ end
( 花 費 時 間 : 30 min)
5
4
第 一 股 cDNA 合 成 : 藉 由 MMLV 合 成
第 一 股 cDNA ( 花 費 時 間 : 1 hr)
6
5
Remove RNA: 只 剩 single cDNA
( 花 費 時 間 : 5 min)
7
6
PCR: 獲 取 full length double strand
cDNA
7
Modify ds cDNA 兩 端 : 以 Not I and
8
Asc I digest dscDNA
( 花 費 時 間 : 1 hr)
8
接 至 pCDC-1KL and Transformation
訂 購 資 訊 :
11
Cat. No. ES0907
Cat. No. EC10005
(5 x 100 ul )
ExactSTART Full-Length cDNA Library
Cloning Kit ( 10 rxns)
TransforMax EC100
Electrocompetent E. coli