24. Ulusal Biyokimya Kongresi - Türk Biyokimya Dergisi

XXIV. ULUSAL B‹YOK‹MYA KONGRES‹
25 - 28 Eylül 2012
Dedeman Otel - Konya
24. Ulusal Biyokimya Kongresi, Konya [24 th National Biochemistry Congress, Konya / TURKEY]
İÇİNDEKİLER
DAVETLİ KONUŞMACI ÖZETLERİ
ANTİOKSİDAN AKTİVİTE/KAPASİTE TAYİN YÖNTEMLERİ,
CUPRAC YÖNTEMİ VE İNSAN SAĞLIĞINDAKİ ÖNEMİ
Reşat APAK, Kubilay GÜÇLÜ, Mustafa ÖZYÜREK, Burcu BEKDEŞER,
Sema ÇEKİÇ, Mustafa BENER, Esin ÇELİK
İstanbul Üniversitesi/Mühendislik Fakültesi, Kimya Bölümü/Analitik Kimya
Anabilim Dalı, Istanbul
Gıda maddelerinin antioksidan içeriklerinin anlamlı olarak karşılaştırılması ve
klinik biyokimyada oksidatif stres kaynaklı (hücre yaşlanması, kanser, koroner ve
nörodejeneratif) hastalıkların tanı ve tedavisi için gıdaların ve (insan serumu vb.)
biyolojik sıvıların antioksidan aktivite/kapasite düzeyleri ölçülmektedir. Farklı
antioksidanlar arasındaki işbirliği, reaktif oksijen ve azot türleri (ROS/RNS)
saldırısına karşı tek tek antioksidan bileşiklerden daha fazla koruma sağladığı
için toplam antioksidan kapasite (TAC)’nin belirlenmesi anlamlıdır. Biyolojik
sıvılar, gıda ve bitki özütlerinde bulunan lipofilik ve hidrofilik antioksidanların
antioksidan kapasitesinin belirlenmesi için daha önce geliştirilmiş olan pek
çok yöntemin dezavantaj ve kısıtlamaları zamanla ortaya çıkmıştır. CUPRAC
[bakır(II) indirgeyici antioksidan kapasite] yöntemi bir TAC ölçüm yöntemi
olarak gıda bitkilerine (bitki çayları, yenilebilir yabani bitkiler, otlu peynir
vb.), insan serumuna (lipofilik ve hidrofilik antioksidanlar birlikte veya ayrı
fraksiyonlarda) başarılı bir şekilde uygulanmıştır. Orijinal CUPRAC yöntemi;
suda çözünebilen bazı antioksidanların ve polifenolik bileşiklerin hidroksil
radikal süpürme aktivitelerinin tayini, aynı bir çözücü ortamında lipofilik ve
hidrofilik antioksidanların (metil-b-siklodekstrin inklüzyon kompleksleri halinde)
yanyana tayini, flavonoidler yanında askorbik asit tayini, polifenolik bileşiklerin
ksantin oksidaz inhibisyon aktivitelerinin ve Cu(II) katalizörü varlığında hidrojen
peroksit süpürme aktivitelerinin tayini, biyolojik örneklerin süperoksit anyon
radikali süpürme aktivitelerinin tayini, üre tamponlu ortamda protein tiyollerinin
TAC ölçümleri, CUPRAC-esaslı antioksidan sensörünün geliştirilmesi ve son
olarak antioksidanların hat-üstü (on-line) HPLC-CUPRAC yöntemiyle tayini için
modifiye edilmiştir ve ana yöntem yanında pek çok türev yöntem literatürde yerini
bulmuştur. Sonuç olarak CUPRAC metodolojisi biyokimya ve gıda kimyasında
birçok yöntemi içeren bir “antioksidan ölçüm paketi” olarak evrilmekte ve valide
edilmiş sonuçlara göre bu yöntemlerin varolan bazı yöntemlere göre belirgin
avantajlara sahip olduğu görülmektedir.
ANTIOXIDANT ACTIVITY/CAPACITY ASSAYS, CUPRAC ASSAY
AND ITS IMPORTANCE TO HUMAN HEALTH
Reşat APAK, Kubilay GÜÇLÜ, Mustafa ÖZYÜREK, Burcu BEKDEŞER,
Sema ÇEKİÇ, Mustafa BENER, Esin ÇELİK
Department Of Chemistry/Divison Of Analytical Chemistry, Istanbul University/
Engineering Faculty, Istanbul
Measuring the antioxidant activity/capacity levels of food and biological
fluids (e.g., human serum) is carried out for the meaningful comparison of the
antioxidant content of foodstuffs and for the diagnosis and treatment of oxidative
stress-associated (cell ageing, cancer, coronary and neurodegenerative) diseases
in clinical biochemistry. The cooperation among different antioxidants provides
greater protection against ROS/RNS attack than any compound alone and makes
total antioxidant capacity (TAC) determination relevant. The numerous methods
previously established for TAC determination of lipophilic and hydrophilic
antioxidants in biological fluids, food and plant extracts have been shown to suffer
from various disadvantages and constraints. The CUPRAC (CUPric Reducing
Antioxidant Capacity) method of TAC assay has been successfully applied to
antioxidants in food plants (herbal teas, wild edible plants, herby cheese, etc.)
and human serum (as hydrophilic and lipophilic antioxidants together or in
separate fractions). Main CUPRAC method was modified for measuring hydroxyl
radical scavenging activity of water-soluble antioxidants and polyphenolics,
simultaneous determination of lipophilic and hydrophilic antioxidants in the
same solution containing methyl-b-cyclodextrin, determination of ascorbic acid
in the presence of flavonoids, xanthine oxidase inhibition activity and Cu(II)-
catalyzed hydrogen peroxide scavenging activity of polyphenolics, superoxide
anion radical scavenging activity of biological samples, TAC measurement of
protein thiols in urea buffer, development of CUPRAC-based antioxidant sensor,
and finally the on-line HPLC-CUPRAC assay of antioxidants. In conclusion, the
CUPRAC methodology has evolved into an “antioxidant measurement package’’
in biochemistry and food chemistry comprising many assays, and the validated
methods seem to have distinct advantages over certain established methods.
CONTENTS
ABSTRACTS OF INVITED LECTURES
Turk J Biochem, 2012; 37 (S1)
http://www.TurkJBiochem.com