24. Ulusal Biyokimya Kongresi - Türk Biyokimya Dergisi

XXIV. ULUSAL B‹YOK‹MYA KONGRES‹
25 - 28 Eylül 2012
Dedeman Otel - Konya
24. Ulusal Biyokimya Kongresi, Konya [24 th National Biochemistry Congress, Konya / TURKEY]
İÇİNDEKİLER
P123 - K562 HÜCRE HATTINDA METOTREKSAT VE HİSTON
DEASETİLAZ İNHİBİTÖR (SAHA) KOMBİNASYONUNUN
APOPTOTİK ETKİLERİNİN ARAŞTIRILMASI
Ergül Mutlu Altundağ 1 , Cenay Cihan 1 , Ahmet Cingoz 1 , Yavuz Taga 1 ,
Semra Koçtürk 1,2
1
Marmara Üniversitesi Tıp Fakültesi, Biyokimya Anabilim Dalı,Genetik ve
Metabolik Hastalıklar Araştırma ve Uygulama Merkezi-GEMHAM-İstanbul;
2
Dokuz Eylul Üniversitesi, Tıp Fakültesi Biyokimya Anabilim Dalı –İzmir-
Türkiye
Histonların asetilasyonu histon asetil transferaz (HAT) ve histon deasetilaz
(HDAC) enzim aileleri tarafından düzenlenmektedir. Kromatinin belli bir
bölgesinde histonların asetile olması, o bölgenin transkripsiyonel açıdan
aktif olduğunu gösterirken, deasetile olması transkripsiyonun baskılandığını
göstermektedir.Histon deasetilaz inhibitörleri histonların asetilasyonunu artırarak
gen ifadesini düzenlemektedir. Kemoterapötik ilaçların yeni bir sınıfı olan histon
deasetilaz(HDAC) inhibitörleri G1/S veya G2/M deki hücre döngü kontrol
noktalarını aktive ederek hücre proliferasyonunun baskılanması ve apoptozun
uyarılmasını sağlamaktadır.Metotreksat ise bir folat antimetabolitidir ve DNA
sentezini inhibe eder. Bu nedenle vücutta hızlı çoğalan, kanser hücreleri, kemik
iliği hücreleri gibi belirli hücrelerin çoğalmasını ve gelişmesini engeller. Temel
olarak kanser, hücrelerin çoğalması ve farklılaşmasının bozulması ile ortaya
çıkmaktadır. Kronik myeloid lösemi (KML) , primitif pluripotent kök hücrenin
klonal bir hastalığıdır. Bu çalışmada, metotreksat ile uyarılmış lösemi hücre hattında
histon deasetilaz inhibitörü SAHA’ nın apoptotik etkilerinin in vitro araştırılması
amaçlanmıştır. Çalışmada sitotoksite WST-1 metodu ile belirlenmiştir. Apoptoz
annexin–PI ve hücre döngüsü analizleri ile akım sitometride ölçülmüştür. Apoptotik
hücreler ise immünfloresan boyama ile gösterilmiştir. Bu çalışmada, K562 hücre
hattında metotreksat ve SAHA’ nın sitotoksik etkisinin doz bağımlı olduğu
gösterilmiştir. Bu bulgulara göre metotreksat ve SAHA’ nın, K562 hücre hattında
kombine olarak çalışıldığında apoptoz artışına neden olduğu gözlemlenmiştir.
P123 - INVESTIGATION ON APOPTOTIC EFFECTS OF
METHOTREXATE AND HISTONE DEACETYLASE INHIBITOR
(SAHA) COMBINATION IN K562-CHRONIC MYELOID LEUKEMIA
CELL LINE
Ergül Mutlu Altundağ 1 , Cenay Cihan 1 , Ahmet Cingoz 1 , Yavuz Taga 1 ,
Semra Koçtürk 1,2
1
Marmara University Medical Faculty Department of Biochemistry, Genetic and
Metabolic Diseases Research and Investigation Center-GEMHAM- İstanbul and
2
Dokuz Eylül University Medical Faculty Department of Biochemistry-İzmir-
Turkey
Histone deacetylase (HDACs) regulate histone acetylation by catalyzing the
removal of acetyl groups on the NH 2-
terminal lysine residues of the core nucleosomal
histones. Modulation of the acetylation status of core histones is involved in the
regulation of the transcriptional activity of certain genes. HDAC activity is generally
associated with transcriptional repression. Methotrexate is part of a general group
of chemotherapy drugs known as anti-metabolites. It prevents cells from using
folate to make DNA and RNA. Because cancer cells need these substances to make
new cells, methotrexate helps to stop the growth of cancer cells. K562, a human
chronic myelogenous leukaemia cell line that can differentiate into recognisable
progenitors of the erythrocyte, granulocyte and monocytic series. The histone
deacetylase (HDAC) inhibitor suberoylanilide hydroxamic acid (SAHA) is being
evaluated for methotrexate-induced chronic myelogenous leukemia (CML) and
has multiple cellular effects, including the induction of apoptosis. HDACi arrests
the cell cycle in rapidly proliferating tumor cells and promote their apoptosis. In
this study we have examined the apoptotic effects of SAHA and methotrexate
on K562 cell line. Cytotoxicity was determined by WST-1 assay. Apoptosis was
measured by Annexin-PI and cell cycle assay. We demonstrated apoptotic cells
by immunohistochemistry and immunofluorescence staining. The study clearly
showed the dose dependent cytotoxic effect of methotrexate and SAHA in K562
cells. These findings indicate that cotreatment with SAHA enhances the cytotoxic
effects of methotrexate-induced apoptosis of K562-chronic myeloid leukemia
cell line and may have activity against methotrexate refractory chronic myeloid
leukemia.
CONTENTS
Turk J Biochem, 2012; 37 (S1)
http://www.TurkJBiochem.com