Surface Modification of Cellulose Acetate with Cutinase and ...

das fibras sintéticas referidas (Subcapítulos 2.3 e 2.4, respectivamente). A cutinase
nativa foi ainda utilizada para a modificação da superfície da fibra acetato de celulose.
Foram efectuadas duas construções quiméricas pela fusão do gene da cutinase com o
módulo de ligação a carbohidratos (CBM) de origem fúngica, presente na enzima
Cellobiohydrolase I e com o CBM de origem bacteriana, presente na enzima
Endoglucanase C. Verificou-se que a enzima recombinante, fundida com o CBM de
origem fúngica, apresentou maior actividade hidrolítica sobre o diacetato de celulose e
aumentou os níveis de tingimento das fibras (Subchapter 2.5).
O Capítulo 3 descreve o desenho de tecnologias baseadas em processos enzimáticos
para aplicação industrial do acabamento da lã. A tendência da lã para feltrar e encolher é
devida principalmente à sua estrutura em forma de escamas. O tratamento antifeltragem,
normalmente utilizado para modificar as escamas das fibras de lã, utiliza
cloro, pelo que, têm sido conduzidas abordagens para substituir este processo por uma
alternativa mais ecológica, nomeadamente pelo recurso a proteases. Contudo, devido ao
seu tamanho, as proteases difundem-se no interior da fibra, atacando não só a cutícula
mas também o córtex, o que provoca danos inaceitáveis do ponto de vista comercial. Os
Subcapítulos 3.2 e 3.3 descrevem as estratégias utilizadas para aumentar o peso
molecular da protease subtilisina E através de técnicas de engenharia genética. Foram
construídas duas poli-enzimas compostas por duas e por quatro repetições da unidade
codificante, clonadas na mesma fase de leitura. Além disso, construiu-se ainda uma
fusão da sequência nucleotídica da subtilisina E com a sequência codificante do
neckdomain da proteína humana surfactante D. Todas as proteínas recombinantes
referidas foram sobre-expressas mas, independentemente do sistema de expressão ou da
estirpe usada, não foi conseguida a sua recuperação na forma solúvel e activa nas
condições testadas (Subcapítulo 3.2). No Subcapítulo 3.3 descreve-se a fusão da
sequência codificante da subtilisina E com a sequência nucleotídica que codifica um
polímero elastomérico contendo 220 repetições do monómero VPAVG. A enzima
quimérica obtida apresentou um peso molecular superior a 116 kDa. Quando comparada
com uma protease comercial constatou-se que a difusão das enzimas no interior da lã
era dependente do peso molecular das mesmas: a de origem comercial, de baixo peso
molecular, penetrou no córtex, por outro lado a enzima quimérica, de elevado peso
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