ΕΘΝΙΚΟ ΜΕΤΣΟΒΙΟ ΠΟΛΥΤΕΧΝΕΙΟ
ΕΘΝΙΚΟ ΜΕΤΣΟΒΙΟ ΠΟΛΥΤΕΧΝΕΙΟ
ΕΘΝΙΚΟ ΜΕΤΣΟΒΙΟ ΠΟΛΥΤΕΧΝΕΙΟ
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
4.5.3. Εκχύλιση<br />
~ 123 ~<br />
4. Πειραματική διαδικασία<br />
Μετά την προεπεξεργασία των δειγμάτων ακολουθούσε το στάδιο της<br />
εκχύλισης σε στερεή φάση. Η εκχύλιση σε στερεή φάση γινόταν για την απομόνωση<br />
των ουσιών από το νερό και για την αύξηση της συγκέντρωσής τους (πύκνωση), ώστε<br />
να είναι ανιχνεύσιμες από το GC/MS.<br />
Η εκχύλιση σε στερεή φάση πραγματοποιείται περνώντας σχετικά μεγάλο<br />
όγκο του υδατικού δείγματος σε ειδικά στηλάκια που περιέχουν κατάλληλα ροφητικά<br />
υλικά. Θεωρητικά οι ουσίες ροφώνται εξ’ ολοκλήρου στο υλικό (όλη η μάζα του<br />
δείγματος) και οι υπόλοιπες ενώσεις διαπερνούν τα στηλάκια χωρίς να επηρεάζονται.<br />
Στη συνέχεια οι ουσίες που ροφήθηκαν απομακρύνονται από το υλικό με τη χρήση<br />
μικρού όγκου κατάλληλων διαλυτών. Συχνά το τελικό διάλυμα εξατμίζεται, ώστε να<br />
προκύψουν ακόμη μικρότεροι όγκοι, ή ώστε να αντικατασταθεί ο διαλύτης με άλλον<br />
που είναι κατάλληλος για την ανάλυση. Η εκχύλιση σε στερεή φάση μπορεί να<br />
χρησιμοποιηθεί και αντίστροφα, όπου το ροφητικό υλικό απομακρύνει ανεπιθύμητες<br />
ουσίες από το δείγμα (Aga, 2008).<br />
Η εκχύλιση σε στερεή φάση περιλαμβάνει τέσσερα στάδια. Το πρώτο στάδιο<br />
είναι το στάδιο της ενεργοποίηση (conditioning), όπου το υλικό έρχεται σε επαφή με<br />
διαλύτες, καθαρίζεται και προετοιμάζεται για να δεσμεύσει τις επιθυμητές ουσίες. Το<br />
δεύτερο στάδιο περιλαμβάνει το πέρασμα του δείγματος από το υλικό (loading) και<br />
τη ρόφηση των ουσιών σε αυτό. Στο τρίτο στάδιο το υλικό ξεπλένεται και στεγνώνει,<br />
ώστε να απομακρυνθούν τυχόν εναπομείναντες ουσίες που έχουν παρακρατηθεί.<br />
Τέλος, στο τέταρτο στάδιο οι ροφημένες ουσίες αποδεσμεύονται από το υλικό με τη<br />
χρήση κατάλληλου διαλύτη. Το τελικό διάλυμα συλλέγεται για περεταίρω ανάλυση<br />
(Aga, 2008).<br />
Η εκχύλιση σε στερεή φάση μπορεί να πραγματοποιηθεί για ένα μεγάλο<br />
αριθμό ουσιών και μπορεί να περιλαμβάνει στηλάκια με περισσότερα από ένα υλικά<br />
ρόφησης, ή στηλάκια διαφορετικού υλικού συνδεδεμένα σε σειρά (Aga, 2008). Στη<br />
συγκεκριμένη μέθοδο η εκχύλιση σε στερεή φάση γινόταν με υλικό από στηλάκια<br />
των 6 mL τύπου Isolute C18 της εταιρείας Biotage (εικόνα 4.10) τα οποία<br />
προσαρμόζονταν σε κατάλληλη συσκευή εκχύλισης κενού τη εταιρείας Agilent<br />
Technologies (εικόνα 4.11).