P. gingivalis 에 대한 피톤치드의 항균효과

P. gingivalis was grown in the presence of 0.005% phytoncide for 24 h and 100 ㎕ of
the cultured cells was smeared on an blood agar plate and then subjected to antibiotic
sensitivity test for 4〜5 days using different antibiotic discs. Diameter of the inhibition
zone was measured and compared with that of the inhibition zone created on the plate
of P. gingivalis that had been incubated in the absence of phytoncide. Change in
antibiotic sensitivity of the bacterium was determined by measuring the inhibition zone
created by discs containing different antibiotics.
a ; diameter of the inhibition zone (㎜).
피톤치드에 의한 P. gingivalis의 형 태 변 화
피톤치드에 의한 P. gingivalis의 형태 변 화를 투 과전자 현미 경으로 관 찰하 였 다. 피톤치드
를 첨가하지 않고 배양한 P. gingivalis는 뚜렷하게 내막과 외막이 관찰되고 리보솜이 세포
막 쪽으로 편중된 상태로 균일한 밀도를 갖는 정상적인 형태를 보였다. 일부 균에서 세포분
열이 진행되고 있고, 또 다른 균에서는 세포질 내에 전자밀도가 높은 과립이 관찰되었다. 그
리고 외막에서 떨어져 나와 형성된 소수의 소포(vesicle, 또는 bleb)가 발견되었다(Fig. 1).
피톤치드를 0.005% 첨 가하 고 배양한 P. gingivalis는 비정상적인 형태변화를 보였다. 많
은 균들에서 핵의 위치를 분별할 수 있을 만큼 핵이 뚜렷해 졌고, 세포질 내 리보솜의 전자
밀도가 더욱 뚜렷해지고 전자밀도가 높은 과립의 수도 증가하였다. 또한 소포의 수도 증가
하였다. 세포질 내용물이 사라지거나 거의 사라진 상태에서 두개의 막만이 존재하는 유령세
포(ghost cell)의 출현이 빈번해 졌다. 또한 정상 보다 작은 크기의 균도 많이 관찰되고 이
들 균은 대부분 비정상적인 형태를 보였다(Fig. 2).
피톤치드 첨가량이 0.01%로 증가되었을 때, P. gingivalis는 더욱 비정상적인 형태를 보
였다. 유령세포의 수도 크게 증가하였고, 특징적으로 다양한 크기의 수많은 소포들이 밀집되
어 나타나는 것이 관찰되었다(Fig. 3).
4. RT-PCR
RT-PCR로 superoxide dismutase mRNA의 발현정도를 관찰한 결과, 0.005% 피톤치드
와 함께 배양했을 때 피톤치드를 첨가하지 않고 배양한 P. gingivalis보다 크게 감소하였다.
5. SDS-PAGE
P. gingivalis를 0.005% 피톤치드와 함께 배양하고 난 다음 단백질 양상의 변화를
SDS-PAGE로 분석한 결과 단백질들의 발현정도는 피톤치드를 첨가하지 않고 배양한 P.
gingivalis와 비교했을 때 큰 차이가 없는 것으로 나타났다.
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