P. gingivalis 에 대한 피톤치드의 항균효과
P. gingivalis 에 대한 피톤치드의 항균효과
P. gingivalis 에 대한 피톤치드의 항균효과
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P. <strong>gingivalis</strong> was grown in the presence of 0.005% phytoncide for 24 h and 100 ㎕ of<br />
the cultured cells was smeared on an blood agar plate and then subjected to antibiotic<br />
sensitivity test for 4〜5 days using different antibiotic discs. Diameter of the inhibition<br />
zone was measured and compared with that of the inhibition zone created on the plate<br />
of P. <strong>gingivalis</strong> that had been incubated in the absence of phytoncide. Change in<br />
antibiotic sensitivity of the bacterium was determined by measuring the inhibition zone<br />
created by discs containing different antibiotics.<br />
a ; diameter of the inhibition zone (㎜).<br />
피톤치드<strong>에</strong> 의한 P. <strong>gingivalis</strong>의 형 태 변 화<br />
피톤치드<strong>에</strong> 의한 P. <strong>gingivalis</strong>의 형태 변 화를 투 과전자 현미 경으로 관 찰하 였 다. 피톤치드<br />
를 첨가하지 않고 배양한 P. <strong>gingivalis</strong>는 뚜렷하게 내막과 외막이 관찰되고 리보솜이 세포<br />
막 쪽으로 편중된 상태로 균일한 밀도를 갖는 정상적인 형태를 보였다. 일부 균<strong>에</strong>서 세포분<br />
열이 진행되고 있고, 또 다른 균<strong>에</strong>서는 세포질 내<strong>에</strong> 전자밀도가 높은 과립이 관찰되었다. 그<br />
리고 외막<strong>에</strong>서 떨어져 나와 형성된 소수의 소포(vesicle, 또는 bleb)가 발견되었다(Fig. 1).<br />
피톤치드를 0.005% 첨 가하 고 배양한 P. <strong>gingivalis</strong>는 비정상적인 형태변화를 보였다. 많<br />
은 균들<strong>에</strong>서 핵의 위치를 분별할 수 있을 만큼 핵이 뚜렷해 졌고, 세포질 내 리보솜의 전자<br />
밀도가 더욱 뚜렷해지고 전자밀도가 높은 과립의 수도 증가하였다. 또한 소포의 수도 증가<br />
하였다. 세포질 내용물이 사라지거나 거의 사라진 상태<strong>에</strong>서 두개의 막만이 존재하는 유령세<br />
포(ghost cell)의 출현이 빈번해 졌다. 또한 정상 보다 작은 크기의 균도 많이 관찰되고 이<br />
들 균은 대부분 비정상적인 형태를 보였다(Fig. 2).<br />
피톤치드 첨가량이 0.01%로 증가되었을 때, P. <strong>gingivalis</strong>는 더욱 비정상적인 형태를 보<br />
였다. 유령세포의 수도 크게 증가하였고, 특징적으로 다양한 크기의 수많은 소포들이 밀집되<br />
어 나타나는 것이 관찰되었다(Fig. 3).<br />
4. RT-PCR<br />
RT-PCR로 superoxide dismutase mRNA의 발현정도를 관찰한 결과, 0.005% 피톤치드<br />
와 함께 배양했을 때 피톤치드를 첨가하지 않고 배양한 P. <strong>gingivalis</strong>보다 크게 감소하였다.<br />
5. SDS-PAGE<br />
P. <strong>gingivalis</strong>를 0.005% 피톤치드와 함께 배양하고 난 다음 단백질 양상의 변화를<br />
SDS-PAGE로 분석한 결과 단백질들의 발현정도는 피톤치드를 첨가하지 않고 배양한 P.<br />
<strong>gingivalis</strong>와 비교했을 때 큰 차이가 없는 것으로 나타났다.<br />
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