Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
����������� ���������� ��������������� ���������������� ���������� �������� ���� ���������<br />
������������������������������������������������������������������������������������������������<br />
��������������������������������������������������������erlendirilecektir.<br />
8.3. Materyal ve Metot:<br />
���������������������������������������������������������������������������������<br />
���������������������������������������������������������������������������������������������<br />
tonsiller, tükrük bezi örnekleri %10’luk tamponlu formalin solusyonunda 24 saat tespit<br />
������������������������������������������������������������������������������������������������<br />
���� �� ������� ������������� ����� ������ �������� ������� ���������� ������ ���������������<br />
����������������� ����� �����oksilen-������ ���� �������������� ���� ���������� �������� ��������<br />
�������������������������������������������������������������������<br />
������������������������������������������-��������������������������������������<br />
uygun olarak takip edilecektir. Deparafinize �����������������������������������������������������<br />
tris-���������������������������������������������������������������������������������������������<br />
maskeleyici etkisini gidermek için sitrat tamponlu antijen retrieval solüsyonunda 20 dakika<br />
������������� ��� ������� ������� �� ������� ����������������� ������� ����������� ������� ����������<br />
��������������������2O2 ile 5 dakika inkübe edilerek, dokudaki endojen peroksidaz aktivitesi<br />
���������������� ��������� �������� ���������� ������������� ����������� ����� ������� ������ keçi<br />
������������������������������������������������-PrPc antikorlar ile +4°C’de bir gece inkübe<br />
������������� ����� ������ ���������� ��������� ��������� ��������� ���������� ��� �������������<br />
����������������������������������������������������������������������olarak kesitler 3-Amino-<br />
9-���������������������������������������������������������������������������������������<br />
��� ������� �������� ������������ ������� ������� ������������ ���� ������� ����������� ����������� ���<br />
���������������������������������������������������<br />
����������������������������������������������������������������������������������������<br />
���������������� ���-A için F1 5�-GTGTACTACAGACCCGTGGA-3�� ��� ��� ��-CATTT<br />
GCTCCACCACTCGCT-3������-B için F2 5�-GGCCTTGGTGGCTACATGCT-3����������-<br />
TGCACAAAGTTGTTCTGGTTAGTA-3�� ������� ������� �������������������� ��� ������ �����<br />
her bir primerden 0.1 µM, 0.15 µM dNTP’ler ve 1 ünite Taq DNA polimeraz enzimi ile<br />
����������� ���� ���������� �������� �� ������� ���������� ��������������� �������� ��� �������<br />
denatürasyon, 57ºC’de 30 saniye annea�����������������������������������������������������<br />
������� ��� ������ �������������� ����������� ����������� ������ �������� ���� ��� ��� ���� ������� ����<br />
ürünleri elde edilecektir (5).<br />
���������������������������������������������������������������������������������,<br />
RFLP) yöntemi ile 136 ve 154. kodonlardaki polimorfizmi tespit için BspHI (PagI, RcaI)<br />
(T���������� ����� ������ ����� BslI (BsiYI, BslI) (CCNNNNN������� ��� AccI (XmiI)<br />
(GT������������������������Bsp������������������������������������������������������������<br />
kesmemektedir. 154. kodonda ise histidini (H) keserken, arginini (R) kesmemektedir. BslI 171.<br />
kodonda Glutamin (Q) ve H’yi kesmezken R’yi kesmektedir. AccI ise 171. kodonda R ve Q’yu<br />
keserken H’yi kesmemektedir (1,7).<br />
Örnekler %3’lük agaroz jel elektrofor������� ������������ ���������������������� ���<br />
amaçla 3 gr agaroz 100 ml tris-borik asit-����� ������ �������� ����������� ���������������<br />
������� ��������� ������� �������� ��������� �������� ���������� ��� ���� ������� ���������������<br />
Elektroforez 125 volt’da 2.5-3 saat sü����������������������������������������������������������<br />
�������������������������������������������������������<br />
�����������������������������������������������������������<br />
���������������������������������������������������������������������������������<br />
üyelik sürecinde bulunan ülkelerin, PrP geni polimorfizmlerini belirlemesini zorunlu hale<br />
�����������������������������������������������������������������������������������������������<br />
����� ����������� ���� �������� ������������� ������� ��������� ������ ������������ ����������� ����<br />
65
Change language