Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
��������������������������������������������������������������������������������������������<br />
�������������������������������������������������������������������������������������������<br />
��������������� ��������� ������� ���� ���������������� �������� ����������� ������ ����������<br />
�������������������������������������������������������������������������������������������<br />
���������������������������������������������������������������������������������������������<br />
���� ������� ���� ���������� ���������� �������������� ����������� ������������������ �����������<br />
ArcView-�� ������� ������������ ��� �������� ����������������� ��������� ������� �������� ��������<br />
������������������������������������������������������������������������������������������������<br />
laboratuvara g��������������� �������������� ������� ���������� �������� ���������� ���� �����������<br />
���������� �������� ������ ����������� -�������� ���� ��� ���� ������������ ������������ ������<br />
��������������<br />
2. DNA Ekstraksiyonu:��������������������������������������������������������e bölgeden<br />
toplanan keneler 5-�������������������������������������������������������������������������<br />
����� ������ ����� ����� ������������ ����� ����������������� ����� ������� ����� ���� ���������<br />
���������������������-����������������������<br />
3. PCR Testi: Reaksiyonda primer olarak Borrelia� ������������� �������������� 23S ve B-5S<br />
rRNA ���������������������������������������������������������������������������������������<br />
�������� ���������� ����� ������ ���������� ���������� ��������� ���������� ��������-<br />
GAGTTCGCGGGAGAGTAGGTTATT, TACGGGTACTTAGATGGTTCACTT Ehrlichia<br />
spesifik primerler 5’biotin-CGGGATCCCGAGTTTGCCGGGACTTCTTCT,<br />
������������������������������ ����������������� ���������� ��������� ��� ���<br />
��������������������������������������������������������������������������������������������<br />
�����������������������������������������������������������������2,����������������������<br />
dCTP, dGTP), 100 mM (dTTP, dUTP) deoxynucleotiden, 80 pmol herbir primerden , 1,25 U<br />
Taq� ���� ������������ ����� �� ������� ���� ������������� �� ��� ���� ������� �������e<br />
������������������������������������������������������������������������������������������������<br />
�������������������������������������������������������������������������������������������<br />
�������������������������������������������������������������������������������������������<br />
��������������������������������������������������������������� 94°C’de 20 saniye, 65°C’de<br />
��� �������� �������� ��� ������� ��������� ������������ ���� �������� �������� ���������� ������<br />
devam edecek ve 20 siklus 94°C’de 20 saniye, 55°C’de 30 saniye, sonra 72°C’de 7 dakika<br />
�����������������������������������������������������������������������������������������<br />
���������������������������������������<br />
4. RLB Testi: �����������������������������������B. burgdorferi sensu lato 5’amino-<br />
CTTTGACCATATTTTTATCTTCCA, B.burgdorferi sensu stricto 5’amino-<br />
AACACCAATATTTAAAAAACATAA, B.garinii 5’amino-<br />
AACATGAACATCTAAAAACATAAA, B.afzelii 5’amino-<br />
AACATTTAAAAAAATAAATTCAAGG, B.valaisiana 5’amino-<br />
CATTAAAAAAATATAAAAAATAAATTTAAGG, B.lusitaniae probu sentezlettirilecektir)<br />
(Ehrlichia soyu 5’amino-TTATCGCTATTAGATGAGCC, HGE 5’amino-<br />
GCTATAAAGAATAGTTAGTGG, E.phagocytophila 5’amino-<br />
TTGCTATAAAGAATAATTAGTGG, HGE agent variant 5’amino-<br />
GCTATGAAGAATAGTTAGTG, E.phagocytophila variant 5’amino-<br />
TTGCTATGAAGAATAATTAGTG, E.canis 5’amino-TCTGGCTATAGGAAATTGTTA,<br />
E.chaffeensis 5’amino-ACCTTTTGGTTATAAATAATTGTTA, E.muris C variant 5’amino-<br />
GCTATAGGTTCGCTATTAG, E.muris T variant 5’amino-<br />
AGCTATAGGTTTGCTATTAGT)<br />
������� �������� ������ �������� �� ��������� ��������� ������� ����������������� ���������� ��terminallerinde<br />
amino grubu (N-terminal N-(trifluoracetamidohexyl-cyanoethyl,N,Ndiisopropyl<br />
phosphoramidite [TFA])-C6 amino linker)� ������� ������� ��������<br />
sentezlettirilecektir. Membran Georges ve ark. (2001) ile Gubbels ve ark.(1999)����������������<br />
������������������������������������������������������������������������������������������������<br />
45