27.02.2013 Views

Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem

Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem

Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

��������������������������������������������������������������������������������������������<br />

�������������������������������������������������������������������������������������������<br />

��������������� ��������� ������� ���� ���������������� �������� ����������� ������ ����������<br />

�������������������������������������������������������������������������������������������<br />

���������������������������������������������������������������������������������������������<br />

���� ������� ���� ���������� ���������� �������������� ����������� ������������������ �����������<br />

ArcView-�� ������� ������������ ��� �������� ����������������� ��������� ������� �������� ��������<br />

������������������������������������������������������������������������������������������������<br />

laboratuvara g��������������� �������������� ������� ���������� �������� ���������� ���� �����������<br />

���������� �������� ������ ����������� -�������� ���� ��� ���� ������������ ������������ ������<br />

��������������<br />

2. DNA Ekstraksiyonu:��������������������������������������������������������e bölgeden<br />

toplanan keneler 5-�������������������������������������������������������������������������<br />

����� ������ ����� ����� ������������ ����� ����������������� ����� ������� ����� ���� ���������<br />

���������������������-����������������������<br />

3. PCR Testi: Reaksiyonda primer olarak Borrelia� ������������� �������������� 23S ve B-5S<br />

rRNA ���������������������������������������������������������������������������������������<br />

�������� ���������� ����� ������ ���������� ���������� ��������� ���������� ��������-<br />

GAGTTCGCGGGAGAGTAGGTTATT, TACGGGTACTTAGATGGTTCACTT Ehrlichia<br />

spesifik primerler 5’biotin-CGGGATCCCGAGTTTGCCGGGACTTCTTCT,<br />

������������������������������ ����������������� ���������� ��������� ��� ���<br />

��������������������������������������������������������������������������������������������<br />

�����������������������������������������������������������������2,����������������������<br />

dCTP, dGTP), 100 mM (dTTP, dUTP) deoxynucleotiden, 80 pmol herbir primerden , 1,25 U<br />

Taq� ���� ������������ ����� �� ������� ���� ������������� �� ��� ���� ������� �������e<br />

������������������������������������������������������������������������������������������������<br />

�������������������������������������������������������������������������������������������<br />

�������������������������������������������������������������������������������������������<br />

��������������������������������������������������������������� 94°C’de 20 saniye, 65°C’de<br />

��� �������� �������� ��� ������� ��������� ������������ ���� �������� �������� ���������� ������<br />

devam edecek ve 20 siklus 94°C’de 20 saniye, 55°C’de 30 saniye, sonra 72°C’de 7 dakika<br />

�����������������������������������������������������������������������������������������<br />

���������������������������������������<br />

4. RLB Testi: �����������������������������������B. burgdorferi sensu lato 5’amino-<br />

CTTTGACCATATTTTTATCTTCCA, B.burgdorferi sensu stricto 5’amino-<br />

AACACCAATATTTAAAAAACATAA, B.garinii 5’amino-<br />

AACATGAACATCTAAAAACATAAA, B.afzelii 5’amino-<br />

AACATTTAAAAAAATAAATTCAAGG, B.valaisiana 5’amino-<br />

CATTAAAAAAATATAAAAAATAAATTTAAGG, B.lusitaniae probu sentezlettirilecektir)<br />

(Ehrlichia soyu 5’amino-TTATCGCTATTAGATGAGCC, HGE 5’amino-<br />

GCTATAAAGAATAGTTAGTGG, E.phagocytophila 5’amino-<br />

TTGCTATAAAGAATAATTAGTGG, HGE agent variant 5’amino-<br />

GCTATGAAGAATAGTTAGTG, E.phagocytophila variant 5’amino-<br />

TTGCTATGAAGAATAATTAGTG, E.canis 5’amino-TCTGGCTATAGGAAATTGTTA,<br />

E.chaffeensis 5’amino-ACCTTTTGGTTATAAATAATTGTTA, E.muris C variant 5’amino-<br />

GCTATAGGTTCGCTATTAG, E.muris T variant 5’amino-<br />

AGCTATAGGTTTGCTATTAGT)<br />

������� �������� ������ �������� �� ��������� ��������� ������� ����������������� ���������� ��terminallerinde<br />

amino grubu (N-terminal N-(trifluoracetamidohexyl-cyanoethyl,N,Ndiisopropyl<br />

phosphoramidite [TFA])-C6 amino linker)� ������� ������� ��������<br />

sentezlettirilecektir. Membran Georges ve ark. (2001) ile Gubbels ve ark.(1999)����������������<br />

������������������������������������������������������������������������������������������������<br />

45

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!