Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Konjugat:� ������� ����� ���� ��������� ���������� ��������������� ������ ����� ���<br />
����������������<br />
RNA Ekstraksiyon Kiti: ������� ������� ��������� ���� ��������� ������������ �����<br />
���������������<br />
Primerler: SJNN virusunun RNA2 geninin (kapsid protein geni) 427 bp’ lik bölümünü<br />
amplifiye eden R3 (5'-CGA-GTC-AAC-ACG-GGT-GAA-GA-3') ve F2 (5'-CGT-GTC-AGT-<br />
CAT-GTG-TCG-CT-��������������������������������<br />
Metot<br />
SSN-�����������������������������������������������������������������������-1<br />
�������������������������������������������������������������������������������������<br />
flasklarda 24ºC’ de monolayer hücre kültürü ���������������������������������<br />
������ ����������� ����� ����� ������������� �������������� �������� ��������� ������<br />
�������������������������� ��������������������� ��������������������������������������������<br />
���������������������������������������������������������������������������������������������<br />
������������������������������������������������-antimikotik) ile homojenize edilecek ve<br />
0,2 µm filtreden geçirilecek. Daha sonra monolayer olan SSN-1 hücre kültürüne 1/10 ve 1/100<br />
����������� ����� ���������� ��� �� ����� ���� ������������� ������������� ������������� ������ ������<br />
����������������������������������������������-antimikotik) ilave edilerek 25 ºC’de inkube<br />
edilecek. Sitopatik etki (CPE) yönünden 10 gün gözlenecek. Sitopatik etki görülmesi<br />
durumunda identifikasyon t���������� ����������� ����� ���� ����������� �������� ������� �������<br />
����������������������������������������������������������������������������<br />
�������� ��������� �������� ������� Hücre kültüründe izole edilen virusun<br />
��������������������������������������������������������������������-1 hücre kültürüne (% 70<br />
�������������������������������������������������������������������������������������������<br />
de 48-��� ����� ������� ���������� ���� ���� ������� �������� �������� ���� ��������� ������� ����������<br />
Daha sonra monoklonal antibetanodavrus antikor ile 37ºC’de inkube edilecek. Sonra PBS-T ile<br />
���������������������������������������������������������������������������������������������<br />
���������������������������������������������������������<br />
���� ������������ Sitopatik etki görülen hücre kültürü örneklerinden ����� ����<br />
�������������������������������������������������������������<br />
RT-PCR: RT-���� ����������� ���������� ��� ����� ����������� ����������� ������� ����<br />
�������������������������������������������������������������������������������� izole edilen<br />
���������������������������������������������������������������������������������������������-<br />
����������������������������������������������������������������������������������������������<br />
���������������������������������������������������������������������������������������������<br />
cycler’ da 1 siklus 72ºC’ de 10 dk ve 95ºC’ de 2 dk., 25 siklus 95ºC’ de 40 sn, 55ºC’ de 40 sn<br />
��� ������ ��� ��� ��� ��� ���� ��������� ������ ��� �� ��� �������� �������� �������� ����������������<br />
Amplifiye edilen c DNA % 2’ lik ag���������������������������������������������������������<br />
������������������������������������������������<br />
8.4. ������������������������������������������������������<br />
���������� ��� �������� ������������������� ���������� ���������� �������� ������� ����� ������ �lan<br />
������������ ����� �������� ���� ������������� �������� ��������� ��������� ���� ��������<br />
��������������� ��� �������� ���� ����������� �������� ������������� ����������� ����������� ���������<br />
��������������� ��������������� ����� ������������ ����������� ��������� ���������������<br />
�����������������������������������������������������������������������������������������<br />
�����������������������������������������������������������������������������������������<br />
�����������������������������������<br />
9.1. �����������������-��������������� : Dr. Buket ÖZKAN ÖZYER<br />
Veteriner Hekim- Viroloji Bölümü<br />
9.2. ������������������������-����������������������������<br />
Uzman Veteriner Hekim-��������������������<br />
163