27.02.2013 Views

Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem

Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem

Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

Konjugat:� ������� ����� ���� ��������� ���������� ��������������� ������ ����� ���<br />

����������������<br />

RNA Ekstraksiyon Kiti: ������� ������� ��������� ���� ��������� ������������ �����<br />

���������������<br />

Primerler: SJNN virusunun RNA2 geninin (kapsid protein geni) 427 bp’ lik bölümünü<br />

amplifiye eden R3 (5'-CGA-GTC-AAC-ACG-GGT-GAA-GA-3') ve F2 (5'-CGT-GTC-AGT-<br />

CAT-GTG-TCG-CT-��������������������������������<br />

Metot<br />

SSN-�����������������������������������������������������������������������-1<br />

�������������������������������������������������������������������������������������<br />

flasklarda 24ºC’ de monolayer hücre kültürü ���������������������������������<br />

������ ����������� ����� ����� ������������� �������������� �������� ��������� ������<br />

�������������������������� ��������������������� ��������������������������������������������<br />

���������������������������������������������������������������������������������������������<br />

������������������������������������������������-antimikotik) ile homojenize edilecek ve<br />

0,2 µm filtreden geçirilecek. Daha sonra monolayer olan SSN-1 hücre kültürüne 1/10 ve 1/100<br />

����������� ����� ���������� ��� �� ����� ���� ������������� ������������� ������������� ������ ������<br />

����������������������������������������������-antimikotik) ilave edilerek 25 ºC’de inkube<br />

edilecek. Sitopatik etki (CPE) yönünden 10 gün gözlenecek. Sitopatik etki görülmesi<br />

durumunda identifikasyon t���������� ����������� ����� ���� ����������� �������� ������� �������<br />

����������������������������������������������������������������������������<br />

�������� ��������� �������� ������� Hücre kültüründe izole edilen virusun<br />

��������������������������������������������������������������������-1 hücre kültürüne (% 70<br />

�������������������������������������������������������������������������������������������<br />

de 48-��� ����� ������� ���������� ���� ���� ������� �������� �������� ���� ��������� ������� ����������<br />

Daha sonra monoklonal antibetanodavrus antikor ile 37ºC’de inkube edilecek. Sonra PBS-T ile<br />

���������������������������������������������������������������������������������������������<br />

���������������������������������������������������������<br />

���� ������������ Sitopatik etki görülen hücre kültürü örneklerinden ����� ����<br />

�������������������������������������������������������������<br />

RT-PCR: RT-���� ����������� ���������� ��� ����� ����������� ����������� ������� ����<br />

�������������������������������������������������������������������������������� izole edilen<br />

���������������������������������������������������������������������������������������������-<br />

����������������������������������������������������������������������������������������������<br />

���������������������������������������������������������������������������������������������<br />

cycler’ da 1 siklus 72ºC’ de 10 dk ve 95ºC’ de 2 dk., 25 siklus 95ºC’ de 40 sn, 55ºC’ de 40 sn<br />

��� ������ ��� ��� ��� ��� ���� ��������� ������ ��� �� ��� �������� �������� �������� ����������������<br />

Amplifiye edilen c DNA % 2’ lik ag���������������������������������������������������������<br />

������������������������������������������������<br />

8.4. ������������������������������������������������������<br />

���������� ��� �������� ������������������� ���������� ���������� �������� ������� ����� ������ �lan<br />

������������ ����� �������� ���� ������������� �������� ��������� ��������� ���� ��������<br />

��������������� ��� �������� ���� ����������� �������� ������������� ����������� ����������� ���������<br />

��������������� ��������������� ����� ������������ ����������� ��������� ���������������<br />

�����������������������������������������������������������������������������������������<br />

�����������������������������������������������������������������������������������������<br />

�����������������������������������<br />

9.1. �����������������-��������������� : Dr. Buket ÖZKAN ÖZYER<br />

Veteriner Hekim- Viroloji Bölümü<br />

9.2. ������������������������-����������������������������<br />

Uzman Veteriner Hekim-��������������������<br />

163

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!