Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
TDH ve TRH genlerinin Multiplex�������������������������������<br />
��� ��������� ������������� ������� TDH, TRH�� ������� ���� V. parahaemolyticus<br />
������������������������������������������itif kontrol için V. parahaemolyticus ATCC 17802<br />
�������������, negatif kontrol içinse V. alginolyticus ATCC 17749 ��������������ve no-template<br />
�������������������������������������������������������������<br />
DNA ekstraksiyonu��������������������������� koloni içinde 100 µl siteril nuclease-<br />
���������������������������������������������������������������������������������������������������<br />
����� ������ ���� ��� ������� ����� ������ ��������������� ������ ����� ����� ���� �������<br />
������������������ -�������� ������������ ���� ������ ����� ���� ������� ������������ ��������<br />
muhafaza etmek yeterlidir.<br />
PCR������������<br />
����������������������������<br />
������� ��������������� ������������<br />
ADI<br />
�����������<br />
TDH-L 5’GTAAAGGTCTCTGACTTTTGGAC3’<br />
270<br />
TDH-R 5’TGGAATAGAACCTTCATCTTCACC3’<br />
TDH-L 5’TTGGCTTCGATATTTTCAGTATCT3’<br />
486<br />
TRH-R<br />
VP-32<br />
VP-33<br />
(R72H<br />
(TARGET)<br />
5’CATAACAAACATATGCCCATTTCC3’<br />
5’TGCGAATTCGATAGGGTGTTAACC3’<br />
5’CGAATCCTTGAACATACGCAGC3’<br />
��������������������-Mix<br />
Ultra nukleas-free steril su 7.22 ul<br />
10X PCR Buffer 2.50 ul<br />
50 mM MgCl2 1.25 ul<br />
10 m M dNTP (dCTP, dATP, dTTP, d GTP) 0.63 ul<br />
5 uM VP-32 Primer 2.50 ul<br />
5 uM VP-33 Primer 2.50 ul<br />
5 uM TRH-L Primer 2.00 ul<br />
5 uM TRH-R Primer 2.00 ul<br />
5 uM TDH-L Primer 1.00 ul<br />
5 uM TDH-R Primer 1.00 ul<br />
Taq DNA polymerase ( 5 units/ul) 0.40 ul<br />
154<br />
387 ya da 320<br />
�������������������-����������������<br />
Ön Denaturasyon 5 dakika 94 oC<br />
PCR<br />
Denaturasyon 30 saniye 94 o C<br />
Amplikasyon 40 siklus �������� 45 saniye 58 oC<br />
Uzama 75 saniye 68 oC<br />
Final uzama 7 dakika 68 o C<br />
���������������������������������������������������<br />
1X TPE (Tris- Phospohate- EDTA), 1 XTBE (Tris-Borate- ADTA) ya da 1X TAE (Tris-<br />
Acete-���������������������������������������������������������-����������������������������<br />
������������ �������� ������������ ������ ��������������� ���� ������ ������� �������� Ethidium<br />
�������� ������ �������� �������� ��������������� ���� �������� �������� �������� ��� ������ ���������������<br />
��������������������������������������������������������������������������������������������<br />
�������� �������� ���������� ��� ��� ���� ���� ������� ��� ���������������� ������������ ���������<br />
������������ ������������������ ������ ��� ������� �� ����� ����� ���� ����������� ���� ��������� �������
Change language