Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem

SUMMARY:
The detection and inhibiton of proteolytic enzyme activity in concentrated solutions of
inactivated foot and mouth virus antigens
Foot and mouth virus antigen is produced in suspension culture of BHK cells for
vaccine production. It might be influenced by proteolytic enzymes originated from BHK cells.
When they stored 4 o C VP1 of FMDV, the mojor antigenic component of VP1 might be
degraded because of the proteolytic activity.
There are significant increase in proteolytic activity depends on the concentration
factor in antigen preperations concentrated both either cross flow ultrafiltration and PEG 6000
precipitation. In this case, some techniques are used for the inhibition of proteolytic enzymes
during the storage of this antigens.
One of this methods is to keep produced antigens at ultra low temperatures. Thus these
antigens might be stored for years. But this approach is not useful for routine use because of
volume problems caused large scale production.
Another method, as a practical way in routine use, is to inhibit proteolytic activity by
using some protease inhibitors. In this way, it is thought that large scale antigens might be
stored up to two years at 4 o C.
In this study, presence of proteolytic enzymes will be investigated in concentrated
antigens treated with PEG 6000 after cross-flow ultrafiltration by protease detection,
monitoring VP1 degradation, total protein content and antigen quantity. Also, aprotinin and
bovine serum will be used as inhibitors to check the degradations due to protease activity or
any other reason.
Key words: Concentrated-inactivated fmdv, VP1 protein, proteolytic enzyme,protease inhibitors, SDS
PAGE, Western Blot
8. ���������������������������������������
8.1 ��������������������������������
������������������������������������������������������������� o �������������������������������
proteinlerind�� ������� ���������������� ���������� ��� ������ ������������ ����������� ������ �����
������������ ������ �������������������� ����� ������� ��������� ��������� �������� ��������������
������������� ������ ������ ����������� ���������� ��������� �������� ��������������� ����������
durum takip edilebilecektir.
8.2 Literatür Özeti:
���� ���������� ������ ��� ������� ����� ��������� ������������ �������� ������ ���� ��������� ������ ����
��������������� �������������� ���������� �� �-�� ��������� ����� ����� ������������ ������������
������ ������� ��� ����� �� ��-60’�� ������ ���������������� ��� ������������ ������� ���������
�������������������������������������������������������������������������������������
��������������������������������������������������������������������������������������������������
�������� �������������� �������� ������������ ������������� ������������� ����������� ���
enterovirus’dur (3).
���� ������� �������� ���� ������������ ���� ��� ������������ �������� ����������� �������� ���� �������
ikozahedral simetrili bir virustur. Kapsit 42 kapsomer içermekte olup virion y����������-30 nm
����������� ������� ������ ���������� ������������� ����� ��� �������� ���������� ������� �������
mRNA olarak görev yapar (6).
�����������������������������������������������������������������������������-1, SAT-1, SAT-
2, SAT-���������������������������������������������������������������������������������������
serotipinin 5, SAT-1 serotipinin 1, SAT-2 serotipinin 3, SAT-�� ������������ �� ��� ����-1
������������ �� ���� ����� �������� ���� ���� ������� ������� ��������������� ���� ����������� ������������
antijenik f��������������������������������������������������
���� �������� �������� �������������� ����� ��� �������������� ����� ������� �������� �� ����� ����������
������������������������������������
143