Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
Hayvan Sağlığı Araştırmaları 2009 Yılı Program - Tagem
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
������������� ��� ����� ����� ����� ���������� ��������������� �� ������� ������������� ����<br />
ekstraksiyonu için kimyasal ve dondurup-������������������������������������������������ iki<br />
�����������������������������������������������������������<br />
Sang-Hoon ve ark. (16), ����� �������� ����������� ���������� P. larvae için Real-Time<br />
���� ���������� ���������� ��� ���������� ���������� ��� �������������� ������ ���������<br />
���������������.<br />
8.3. Materyal ve Metot:<br />
Materyal:<br />
�����������������������������������������������������������������������������������������<br />
������������������������������������������������������������������������������� Pozitif kontrol örnek<br />
ülkemiz referens enstitüsü olan Etlik Merkez Vet�������������������������������������������<br />
temin edilecektir. ����������������������������������������������������������������������������<br />
������������������������������������������������������������������������������ 0 C’de muhafaza<br />
edilecektir.<br />
Metot:<br />
Besi yerleri: Etken izolasyonu için Brain Heart Infusion Agar (BHIA), BHITA,<br />
Nutrient Agar (NA), Nutrient Brouth����������������������������������������<br />
Etken izolasyonu ve identifikasyonu: Steril tüpe steril distile sudan 9 ml konularak<br />
���������������������������������������������������������������������������������������������<br />
���� ������������� ��� ������� ������������ ������ ��������� ��-15 dakika benmaride tutularak<br />
������������� Paenibacillus larvae ve kontamine bakteriler öldürülecektir. 200 µl<br />
süspansiyondan a�������� ������� �������� ������� ��������� ����������� ��������� ���������<br />
�������������������������������������������������������������������������������������-37°C’de 7<br />
��������������������������������������������������������������������������������������������i<br />
asit Paenibacillus alvei’nin üremesini engelleyecektir. Koloniler; Gram, Giemsa, Metilen blue<br />
ve Karbon fuksin ile boyanarak bakteriyoskopik ��������������������������������������������������<br />
����������������������������������������������������flagella te��������������������<br />
��������������������������������������������������������� ���������������������������<br />
��������������������������������������������������������������������������������������������<br />
�����������������������������������������������������������������������������<br />
Peletler; 20 mg/ml lizozim, 20 milimol Tris-HCL (pH:8.0), 2 milimol EDTA ve %1.2<br />
Triton içeren 200 mikrolitre enzim süspansiyonu ile süspanse edilip, 37 0 C’de 1 saat inkübe<br />
�����������������������������������������������������������������re AL tampon ( Qiagen) ilave<br />
edilecek, 56 0 C’de 30 dk veya 96 0 ��������������������������������������������������������������<br />
����������� ������ ������� ������ ������������� ����� ������ ���� ����������� ������� �������� ����<br />
�������������-20 0 C’de muhafaza edilecektir.<br />
E������������������������������������������������������������������������������������<br />
�������������������������������������������������������������������������������������������������<br />
edilecek ve 95 0 ������������������������� 0 C – 20sn, 50 0 C - 20sn, 72 0 C – 1 dk������������������<br />
72 0 ����� �� ������� �������������� ������������ ������ ��������� ������� ���� ������� ������� ������<br />
������������������������������������������������������������������������������������<br />
Real-���������������������������������������������������������������������������������<br />
mix edilerek incelenecektir.<br />
�������������� ����������� ������� ������� ��� ������������� ��������� �������� �������<br />
������� ���� ���������� ������� ���������� ������������������ ��� ���������� ������� ������������� ������<br />
�������������������������������������������������������������������������<br />
8.4. ������������������������������������������������������<br />
������������������������������������������������������������������������������������������������<br />
���������������������������������������������������������������������������������������������<br />
���� ������ ������������� ������������ ������� ���� ������ ������ ��������������� ������� �������<br />
����������� ������������ ���������� ����� ������������ ������ ���������������� �������� ��������<br />
119
Change language