89-91 - Polskie Stowarzyszenie Biomateriałów

48 ten sam ubytek uzupełniono przy pomocy PLG-Hyal.
Badając proces gojenia przeprowadzono ocenę makroskopową
i histologiczną po 26 i 52 tygodniach obserwacji.
Oceniono zarówno biomateriały, jak i otaczającą tkankę
chrzęstną małżowiny usznej. Analiza statystyczna zmian
mikroskopowych obejmowała ocenę półilościową, rangową
obfitości nacieku zapalnego, obecności komórek resorpcyjnych
wielojądrowych, włóknienia oraz waskularyzacji.
Wyniki i ich omówienie
Ocena makroskopowa biomateriału
We wszystkich przypadkach zwierząt stwierdzono
makroskopowo prawidłowy proces wgajania obu biomateriałów
polimerowych w tkankę chrzęstną małżowiny
usznej królików. W przypadku PLG obserwowano większą
chropowatość i nierówność powierzchni materiału oraz
zmianę zabarwienia z białej na szarożółtą w odróżnieniu
od gładkiej i białej powierzchni PLG-Hyal, wykazującego
makroskopowo o wiele większe podobieństwo do tkanki
chrzęstnej. Stwierdzono całkowite wypełnienie ubytku tkanki
chrzęstnej przez oba biomateriały polimerowe, brak cech
stanu zapalnego i martwicy wokół rany pooperacyjnej przez
cały okres obserwacji zwierząt.
Badania histologiczne implantu
Dwudziesty szósty tydzień po implantacji
Półroczny okres poimplantacyjny charakteryzował się
zmniejszeniem nasilenia odczynu zapalnego. W grupie po
implantacji PLG ilość i wielkość ziarniniaków zmniejszała
się - na obwodzie przybywało komórek tkanki łącznej przy
zmniejszaniu się ilości komórek zapalnych, zwłaszcza limfocytów
(RYS.1a). Chrząstka nie wykazywała zmian mikroskopowych,
ochrzęstna ulegała włóknieniu, a pod ochrzęstną
spotykano grupki komórek tkanki tłuszczowej żółtej (RYS.1b).
W dwudziestym szóstym tygodniu po implantacji PLG-Hyal
również dostrzegano włókniejące obwodowo ziarniniaki
resorpcyjne z obecnością komórek wielojądrzastych, ze
spadającą ilością limfocytów RYS.1c).
Pięćdziesiąty drugi tydzień po implantacji
Roczny okres obserwacyjny w przypadku polimeru
PLG wykazywał wyraźnie postępujące włóknienie obrzeża
ziarniniaków resorpcyjnych, ciągły spadek ilości limfocytów
oraz obkurczanie się komórek wielojądrzastych (RYS.2a).
Komórki te ulegały zmniejszeniu - wykazywały wzrost
zasadochłonności cytoplazmy i obkurczenie się licznych
jąder komórkowych. Wewnątrz ziarniniaków dostrzegano
resztki bezpostaciowej cytoplazmy oraz fragmenty chromatyny.
Powyższe obrazy sugerowały
proces rozpadu komórek wielojądrowych
na komórki mniejsze (RYS.2b). W
przypadku rocznej obserwacji implantowanego
polimeru PLG-Hyal podobnie
pojawiało się włóknienie obwodowe
ziarniniaków, podział komórek wielojądrzastych
na mniejsze komórki z utratą
i zagęszczeniem ich cytoplazmy. W odróżnieniu
od grupy rocznej obserwacji
PLG komórki olbrzymie posiadały więcej
jąder komórkowych. Znacznemu zmniejszeniu
uległa też liczba limfocytów - do
pojedynczych komórek dostrzegalnych
pod dużym powiększeniem (RYS.2c).
Wyniki badań histologicznych w
przypadku PLG oraz PLG-Hyal wykazywały
jednakowy przebieg wypełniania
Results and discussion
Macroscopic evaluation of biomaterials
In all the animals the proper macroscopic process of
healing both biomaterials in to the auricle cartilage tissue
were observed. In the case of PLG more roughness and
unevenness surface as well as the changing of color from
white to yellow-grey were stated in comparison to white
and smooth surface of PLH-Hyal. The PLG-Hyal was
macroscopically more similar to cartilage tissue then PLG.
Although in all the cases total filling of cartilage defects,
lack of strong inflammatory process and necrosis around
the postoperative wound were found.
Histological evaluation of implants
26th week after implantation of biomaterials
Six months of observation after biomaterial implantation
was characterized by the decreasing of inflammatory process.
In the group of PLG the amount and size of granulation
was decreased – on the periphery the amount of connective
tissue cells increased and the inflammatory cells decreased,
especially lymphocytes (fIG.1a). In the cartilage
we didn’t find the pathological microscopic changes, the
perichondrium was still fibrosis and in the subperichondrium
layer the yellow fat cells were observed (FIG.1b). In 26th
week PLG-Hyal observation period granulation tissue with
periphery fibrosis and decreasing number of lymphocytes
also were found (FIG.1c).
52th week after implantation of biomaterials
52th week after implantation of PLG was characterized by
the periphery granulation progressive fibrosis, lymphocytes
amount decreasing and multinucleated cells contraction
(FIG.2a). Inside the granulation cytoplasm remnants and
fragments of chromatin were observed. These findings suggested
degranulation of multinucleated cells on the smaller
one (FIG.2b). In the case of PLG-Hyal the similar observation
were stated – the periphery fibrosis of granulation and
division of multinucleated cells. Unlike PLG, in the group
with PLH-Hyal the multinucleated cells had more amount
of nuclei. The distinct decreasing of lymphocytes amounts
were also observed (FIG.2c).
The histological results in case of PLG as well as PLG-
Hyal revealed the similar healing process and cartilage
defects filling by both biomaterials. The tissues surround
the biomaterials were characterized by the typical healing
process with inflammatory reactions. The PLG-Hyal clearly
accelerated resorption process and scar formation (especially
in 26th week of observation).
RYS.1. Obraz histologiczny PLG (a, b) i PLG-Hyal (c) oraz tkanek otaczających
w 26 tygodniu po implantacji. Barwienie H&E, powiększenie 200x
(a,c), 50x (b).
FIG.1. PLG (a, b), PLG-Hyal (c) and surrounding tissues histological samples
in 26th week after implantation. H&E staining. Magnification 200x
(a,c), 50x (b).