89-91 - Polskie Stowarzyszenie Biomateriałów

ys.1. mapa rozkładu pierwiastków dla kompozytu
pom/0,5wt.%ag.
fig.1. distribution of chemical elements for pom/
0,5wt.%ag composite.
podłoża inkubowano w temperaturze 37°C przez 24 godziny.
Testy przeprowadzono dla 2 próbek z każdej grupy materiałowej.
Skuteczność antybakteryjną badanych materiałów
określano według Xiaoyi Xu i wsp.[4].
Badania komórkowe zostały wykonane w Pracowni
hodowli komórkowych, katedry i Zakładu histologii
i Embriologii AM we Wrocławiu zgodnie z normą PN-EN ISO
10993-5 metodą bezpośredniego kontaktu. Wykorzystano
referencyjną linię komórkową - fibroblasty mysie 3T3/Balb
otrzymane z Banku Tkanek Instytutu Immunologii i Terapii
Doświadczalnej PAN we Wrocławiu. komórki fibroblastów
mysich zostały założone na 12-dołkowych płytkach w ilości
0,5x10 6 każda. Po zasiedleniu około 60% powierzchni na
hodowle komórkowe nałożono próbki materiałów tak aby
pokrywały około 30% powierzchni hodowli i inkubowano
je w temperaturze 37°C w atmosferze 5% CO 2. Zmiany
ilościowe i morfologiczne, po kontakcie z badanymi materiałami
oceniono po okresie 24, 48 i 72 godzin w odwróconym
mikroskopie kontrastowo-fazowym. W celu określenia ilości
komórek martwych zastosowano barwienie błękitem trypanu.
Stopień toksyczności materiałów został oceniony na
podstawie zmian w morfologii komórek, ich przeżywalności
i zdolności do proliferacji. każdy materiał oceniano na 9
hodowlach komórek po 3 na każdy dzień badania.
wyniki i dyskusja
rys.2. 48h hodowla (kontrolna)
fibroblastów mysich 3t3 balb/c,
pow. 100x.
fig.2. mouse fibroblasts 3t3/balb
cells culture (control group), mag.
100x.
materiał
material
rys.3. 48h hodowla fibroblastów
mysich 3t3 balb/c po kontakcie
z próbką pom, pow. 100x.
fig.3. 48h mouse fibroblasts 3t3/balb
cells culture after contact with pom
sample. mag. 100x.
in Wroclaw.
Mouse fibroblast cells were arranged on 12-hole plates,
0.5 x 106 each. After approximately 60% of the surface has
been colonized with cell cultures, specimens of materials
were applied to cover ca. 30% of the culture surface, to be
incubated at 37°C in 5% CO 2. Quantitative and morphological
changes on contact with the tested materials were
examined in 24, 48 and 72 h in an inverted phase-contract
microscope. Number of dead cells were estimated by staining
with tryphan blue. Material toxicity was evaluated on
the basis of changes in cell morphology, survivability and
proliferation rates. Each material was tested in 9 bacterial
cultures, 3 per each testing day.
results and discussions
Staphylococcus aureus aTcc 25923
(początkowa gęstość 0,75x10 5 Cu/ml)
(initial density 0,75x10 5 CFu/ml)
liczba cfu/ml
po 17h inkubacji
z kompozytem
number of cfu/
ml after 17h
of incubation
with composite
skuteczność
bakteriobójcza
antibacterial efficacy
( abe %)
POM 4,8 x 104 0 %
POM /
0,5wt%Ag
4,0 x 104 16,7 %
BLANk 4,8 x 104 ---
tab.1 skuteczność bakteriobójcza dla materiałów
pom i pom/ag przeciw staphylococcus ureus.
tab.1 antibacterial efficacy of pom and pom/ag
materials against staphylococcus aureus .
Studies of composite microstructures confirmed that the
nanocomposite production method (extrusion and injection)
was acceptable and that nanosilver could be uniformly homogenized
throughout the entire volume of nanomaterials
(ryS.1).
Bactericidal activity tests revealed that after addition of
nanosilver at 0.5% by weight, POM polymer showed slight
antibacterial efficacy (16,7%) against Gram-positive and
Gram-negative bacteria (TAB.1)
The results of cytotoxicity tests for polyoxymethylene and
polyoxymethylene momdified with nanosilver were similar.
rys.4. 48h hodowla fibroblastów
mysich 3t3 balb/c po kontakcie
z próbką pom/0,5wt%ag, pow. 100x
.fig.4. 48h mouse fibroblasts 3t3/
balb cells culture after contact with
pom/0,5wt%ag sample, mag. 100x.
In cultures with specimens, cells adhered to the surface and
199