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102 Kapitel 5: Ergebnisse
kegel am Neuritenende zu erkennen. Die Vergrößerung in Abb. 5.25(d) zeigt deutlich, wie
stark dieser Kegel auf planarem Gold ausgeprägt ist. Sogar an kleineren Neuritenausläufern
sind noch Fortsätze sichtbar. Die Unterschiede, die an RCN auf MML-Beschichtung
beobachtet wurden, konnten ebenso für NH2 nachgewiesen werden. Diese Beobachtung
lässt vermuten, dass die nanostrukturierten Substrate starken Einfluss nehmen auf die
Vorgänge im Zytoskelett, wodurch sich die Zell-Adhäsionsmechanismen ändern.
Eine weitere Hypothese für die niedrige Vitalität von Rattenneuronen auf Gold-Nanopillar-
Oberflächen bestand in der Vermutung, dass sich in den Zwischenräumen der Nanopillars
noch Reste von Chemikalien aus dem Herstellungsprozess befanden. Da bei der Fabrikation
neben verschiedenen Säuren ebenfalls Laugen und Cyanide zum Einsatz kamen,
könnten die Neuronen auf diese Substanzen mit einem vermehrten Absterben reagiert
haben. Um diesen Aspekt näher zu untersuchen, wurden Rattenneuronen auf planaren
Goldreferenzen mit pECM-Beschichtung kultiviert, die zuvor verschieden behandelt
wurden. In zwei Referenzgruppen wurde die planare Goldoberfläche 120 s lang in einem
(K[Au(CN)2])-Bad galvanisch mit Gold beschichtet. Die Zeit der elektrochemischen Abscheidung
wurde gemäß dem Herstellungsprozess der Nanopillars gewählt. In einer der
beiden galvanischen Referenzgruppen wurden die Proben anschließend ca. 60 min lang
in 20 wt% KOH inkubiert, wie es sonst für die Entfernung der Al2O3-Porenwände erforderlich
war. Die dritte Gruppe bildeten planare Goldreferenzen ohne weitere Behandlung.
Alle drei Gruppen wurden - wie auch in den vorangegangenen Versuchen die Nanopillars -
vor der Proteinbeschichtung mehrere Stunden lang in ultrareinem Wasser gespült und mit
UV-Licht sterilisiert. Die Ergebnisse dieser Untersuchung an Goldreferenzen mit pECM-
Beschichtung sind in Abb. 5.26 zu sehen. Sowohl auf den unbehandelten Au-Schichten als
auch auf den galvanischen Filmen mit und ohne KOH-Behandlung wurden vitale Rattenneuronen
beobachtet. Überdies wurden auf allen drei Substrattypen vergleichbar hohe
Zelldichten verzeichnet. Demnach kam es auf planaren Goldproben zu keiner Beeinträchtigung
des Neuronenwachstums durch verbleibende Kontaminationen von Cyanid oder
KOH.
Auch ein weiterer Behandlungsversuch von Nanopillar-Proben in hochkonzentrierter KCl-
Lösung zur Entfernung adhärierter Cyanidkomplexe führte bei anschließender Beschichtung
der Pillars mit pECM nur zu nicht-vitalen Neuronenkulturen auf den Nanostrukturen.
Damit scheinen Geometrie und Topographie der Nanopillars ausschlaggebend zu sein
für die Entwicklung der Neuronen.