Untersuchungen zu extrazellulären Enzymen bei marinen ...

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4.1. Extrazelluläre Enzyme aus marinen heterotrophen Bakterien
Die in der vorliegenden Arbeit untersuchten 12 Stämme sind heterotrophe Begleitbakterien
mariner filamentöser Cyanobakterien. Diese heterotrophen Bakterien beziehen ihre Nährstoffe
wahrscheinlich aus der Biomasse der Cyanobakterien. Daher wurde angenommen, dass diese
Bakterien viele extrazelluläre Enzyme produzieren müssen, um Substrate wie Glykogen,
Membranlipide, Proteine, DNA u.a. spalten zu können.
In dieser Arbeit konnte gezeigt werden, dass die meisten der 12 getesteten marinen
heterotrophen Bakterienstämme zur Produktion von extrazellulären Enzymen fähig sind.
Dabei konnte nur bei einem Stamm extrazelluläre Peptidase nachgewiesen werden.
Lipaseaktivität konnte bei zwei Stämmen auf den Olivenöl-Rhodamin-B-Agarplatten
festgestellt werden. Beim Lipase-Nachweis erwies sich die Detektion mit UV-Licht als
problematisch, weil nur geringe Fluoreszenz am Kolonienrand zu sehen war. Zudem konnte
die Fluoreszenz nur in einem begrenzten Zeitraum der Inkubation detektiert werden.
Nach Benedik & Strych (1998) kommen extrazelluläre Nukleasen selten bei Bakterien vor. In
dieser Arbeit wurden bei drei von zwölf getesteten Stämmen extrazelluläre DNasen
nachgewiesen.
Es wurde festgestellt, dass extrazelluläre Amylasen weit verbreitet bei den cyanobakteriellen
Begleitbakterien sind. Cyanobakterien können Glykogen speichern. Vermutlich nutzen viele
Begleitbakterien Glykogen aus der partiell zersetzten cyanobakteriellen Biomasse als Energie-
und Kohlenstoffquelle, was die vermehrte Produktion von Amylasen erklären würde.
4.2. Untersuchungen zur Expression Amylase codierender Gene
In dieser Arbeit ist es nicht gelungen, die Amylaseaktivität im Gel nach der SDS-PAGE
nachzuweisen. Somit konnte nicht festgestellt werden, ob es sich bei den extrazellulären
Amylasen des Stamms Bo 10-09 (Muricauda aquimarina) um konstitutive oder induzierbare
Enzyme handelt. Vermutlich wurde keine ausreichende Menge an Amylasen ins Medium
abgegeben, denn die Proteinkonzentrationen in den zellfreien Kulturüberständen waren unter
der Detektionsgrenze. Auch nach der Fällung der Proteine mit Ammoniumsulfat waren die
Proteinkonzentrationen mit 1,74 µg/ml im Ansatz mit Stärke und 0,6 µg/ml im Ansatz mit
Maltose sehr niedrig. Dies könnte auf Verdünnungseffekte im Flüssigmedium zurück zu
führen sein, weil auf festen Medien dieser Stamm im Vergleich zu anderen in dieser Arbeit
untersuchten Stämmen die höchste Amylaseaktivität aufwies. Good und Hartman (1970)