Untersuchungen zu extrazellulären Enzymen bei marinen ...

Ergebnisse 25
Wie man in Abb. 3.3. sieht, konnten in dem dunkel angefärbten SDS-Gel keine hellen
Hydrolyse-Zonen festgestellt werden. Somit konnte bei keiner der Proben Amylaseaktivität
nachgewiesen werden. Das gilt auch für den Überstand der Bacillus subtilis-Kultur (Spur 15),
der als Positivkontrolle dienen sollte.
3.2.4. Silbernitratfärbung der Proteine
Nach der Amylase-Aktivitätsfärbung wurden die Proteine im Gel mittels der
Silbernitratfärbung visualisiert. Das Gel ist in Abb. 3.4. dargestellt.
kDa
170
130
100
72
55
40
33
24
17
11
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
Abb.3.4.: SDS-Gel nach Silbernitratfärbung der Proteine. Die Molekulargewichte der Markerproteine
befinden sich links in der Abbildung. Auftragsschema der Proben im Gel ist in Tab. 3.3. dargestellt.
Die Dokumentation des Gelbildes erfolgte mittels eines Scanners (Canon CanoScan 3200 F).
Wie aus Abb. 3.4. ersichtlich, sind in den Spuren 4 und 10 zahlreiche Proteinbanden zu
erkennen. Das bedeutet, dass die Bakterien des Stamms Bo 10-09 in Anwesenheit von
Maltose (Spur 4) oder Stärke (Spur 10) Proteine ins Medium abgegeben haben. Aufgrund der
fehlenden Hydrolyse-Zonen bei der Amylase-Aktivitätsfärbung (siehe Kap. 3.2.3.) ist es
jedoch nicht möglich festzustellen, bei welchen Banden es sich um Amylasen handelt. Es ist
jedoch deutlich zu erkennen, dass in Spur 10 mehr Proteinbanden sind als in Spur 4. Im
Überstand der Bacillus subtilis-Kultur konnten keine Proteinbanden nachgewiesen werden
(Spur 15), was die nicht vorhandene Amylaseaktivität (siehe Kap. 3.2.3.) erklärt.