Untersuchungen zu extrazellulären Enzymen bei marinen ...

Inhaltsverzeichnis I
Inhaltsverzeichnis
ABKÜRZUBGSVERZEICHNIS ........................................................................................ IV
1. EINLEITUNG ........................................................................................................... ......... 1
1.1. Herkunft und Funktion von Enzymen ...........................................................................................1
1.2. Enzyme in der Industrie .................................................................................................................1
1.2.1. Eignung der Enzymquellen für biotechnischen Einsatz ..........................................................2
1.3. Amylasen .......................................................................................................................................3
1.4. Peptidasen ..................................................................................................................................... 3
1.5. Lipasen ...........................................................................................................................................4
1.6. DNasen ...........................................................................................................................................5
1.7. Ziel und Vorgehensweise der vorliegenden Arbeit .......................................................................5
2. MATERIAL UND METHODEN....................................................................................... 6
2.1. Material .........................................................................................................................................6
2.1.1. Herkunft der marinen heterotrophen Bakterien ......................................................................6
2.1.2. Bacillus subtilis ………...........................................................................................................6
2.2. Medien, Lösungen und Puffer ......................................................................................................7
2.2.1. M1 (Medium 1)-Medium (modifiziert nach Widdel & Bak, 1992) .......................................7
2.2.2. ASN (Artificial Seawater Nutrients)-Medium (Rippka et al., 1979,
modifiziert nach Rethmeier, 1995) ........................................................................................9
2.2.3. LB (Luria-Bertani)-Medium (Sambrook et al., 1989) ...........................................................10
2.2.4. Feste Medien für den Nachweis extrazellulärer Enzyme ......................................................10
2.2.4.1. Stärke-Agar für den Amylase-Nachweis (modifiziert nach Gerhard
et al., 1994) .......................................................................................................................11
2.2.4.2. DNA-Toluidinblau-Agar für den DNase-Nachweis (modifiziert nach
Schreier, 1969) ..................................................................................................................11
2.2.4.3. Magermilch-Agar für den Peptidase-Nachweis (modifiziert nach
Gerhard et al., 1994) ........................................................................................................11
2.2.4.4. Olivenöl-Rhodamin-B-Agar für den Lipase-Nachweis (modifiziert
nach Kouker & Jaeger, 1987) ..........................................................................................11
2.2.5. DNA-Stammlösung für den DNase-Nachweis ......................................................................11
2.2.6. Magermilchpulver-Lösung für den Peptidase-Nachweis ......................................................11