Untersuchungen zu extrazellulären Enzymen bei marinen ...

Material und Methoden 12
2.2.7. Lugolsche Lösung
Bei der Lugolschen Lösung handelt es sich um eine 1 %ige Iod-Kaliumjodid-Lösung. Dazu
wurden Iod und Kaliumjodid im Verhältnis 1:2 in Aqua dest. gelöst.
2.2.8. Bradford-Reagenz (Bradford, 1976)
Für die Herstellung des Bradford-Reagenz wurden 40 mg des Farbstoffes Serva Blau G-250
in 50 ml Ethanol (absolut) und 100 ml 85 % iger Orthophosphorsäure gelöst und anschließend
mit Aqua dest. auf 1 l aufgefüllt. Das Bradford-Reagenz wurde dreimal durch Papierfilter
(Schleicher & Schuell 595 1 /2 Faltenfilter) filtriert und in einer dunklen Flasche bei 4 °C
gelagert.
2.2.9. 0,1 M Natriumphosphat-Puffer (pH 7,5)
Lösung A : Natriumdihydrogenphosphat-Monohydrat [0,2 mol/l]: 27,6 g/l
Lösung B: di-Natriumhydrogenphosphat-Dihydrat [0,2 mol/l]: 35,6 g/l
Für die Herstellung von 0,1 M Natriumphosphatpuffer (pH 7,5) wurden 8 ml Lösung A, 42 ml
Lösung B und 50 ml Aqua dest. miteinander vermischt.
2.2.10. 0,15 M Zitronensäurephosphat-Puffer (pH 7,5)
Lösung A: di-Natriumhydrogenphosphat-Dihydrat [0,2 mol/l]: 35,6 g/l
Lösung B: Zitronensäure-Monohydrat [0,1 mol/l]: 21 g/l
Für den gewünschten pH-Wert von 7,5 wurden 88,7 ml Lösung A und 11,3 ml Lösung B
miteinander vermischt.
2.2.11. Stärkepuffer für die Amylase-Aktivitätsfärbung
Für die Herstellung des Stärkepuffers wurde der Zitronensäurephosphat-Puffer (siehe Kap.
2.2.10.) mit 10 g/l löslicher Stärke versetzt und anschließend aufgekocht, um die Stärke zu
lösen.
2.2.12. 2 x SDS-Probenpuffer (modifiziert nach Laemmli, 1970)
Die Zusammensetzung des 2x SDS-Probenpuffers, sowie die Endkonzentrationen der
verschiedenen Substanzen im Puffer sind in Tab. 2.11. dargestellt.