Untersuchungen zu extrazellulären Enzymen bei marinen ...

Material und Methoden 7
wurde dieser Stamm als Positivkontrolle im Amylaseaktivitätstest nach der SDS-PAGE
eingesetzt.
2.2. Medien, Lösungen und Puffer
2.2.1. M1 (Medium 1)-Medium (modifiziert nach Widdel & Bak, 1992)
Die Komponenten des M1-Mediums sind in den Tabellen 2.2.-2.7. aufgeführt. Die KH2PO4-,
Spurenelement-, Se-W- und NH4Cl-Lösungen wurden als Stammlösungen angesetzt und
getrennt autoklaviert. Die 7-Vitamin-, Vitamin B12-, Riboflavin- und Thiamin-Lösungen
wurden ebenfalls als Stammlösungen angesetzt und sterilfiltriert (Minisart®-Filter,
Porengröße 0,2 µm, Sartourius). Diese Lösungen wurden dem Medium nach dem
Autoklavieren steril zugesetzt. Als Kohlenstoffquellen dienten Stärke oder Maltose. Stärke
wurde vor dem Autoklavieren dem Medium zugesetzt. Maltose wurde in Aqua dest. gelöst,
sterilfiltriert (Minisart®-Filter, Porengröße 0,2 µm, Sartourius) und dem Medium nach dem
Autoklavieren hinzugefügt.
Tab. 2.2.: Zusammensetzung des M1-Mediums
Komponenten g/l oder ml/l
NaCl 13,19
MgCl2 x 6 H2O 2,84 g
KCl 0,36 g
MgSO4 x 7 H2O 3,4 g
CaCl2 x 2 H2O 0,74 g
NaHCO3 0,095 g
Aqua dest. ad 1000 ml
KH2PO4-Lösung (50 g/l) 10 ml
NH4Cl-Lösung (50 g/l) 10 ml
Spurenelementlösung 2 ml
Se-W-Lösung 1 ml
7-Vitamin-Lösung 1 ml
Vitamin B12-Lösung (50 mg/l) l 1 ml
Vitamin B2-Lösung 1 ml
Vitamin B1-Lösung 1 ml