15. Workshop AK Respiratorisches System - Deutsche Gesellschaft ...

15. Workshop des Arbeitskreises Respiratorisches System
der Deutschen Veterinärmedizinischen Cesellschaft (DVG) in Kooperation mit der
Deutschen Cesellschaft für Pneumologie und Beatmungsmedizin (DPC)
DatumfOrt:
Orqanisation:
29. März 2012, Nürnberg
PD Dr. mecl. vet. Petra Reinhold, Jena
Prof. Dr. med. vet. Martin Rosenbruch, Wuppertal
Das bronchus-assoziierte Gewebe (BALT) ist auch
beim Kaninchen kein sekundär tymphatisches
Organ, sondern durch Umwelteinflüsse indiziert
Pabst R
Institut für Immunmorphologie, Medizinische Hochschule
Hannover
DOI: 1 0.1 055/s-0032-1 31 3579
J. Bienenstock publizierte 7973 Daten über lymphatisches Cewebe der
Bronchien (BALT). Er extrapolierte von Befunden von ,,normalrabbits"
auf alle Säugetiere. Bald wurde BAL| als weiteres sekundär lymphatisches
Organ wie Tonsillen, Lymphknoten und Milz in die Lehrbücher
übernommen. Eigene Daten zeigten eine große Variabilität: So fanden
wir in der Lunge von gesunden Erwachsenen kein BAUL In den Lungen
von erwachsenen l(aninchen, die als SPF Tiere geliefert und in Barrierehaitung
überführt wurden, waren nur wenige kleine BALf Strukturen zu
finden. Bei erwachsenen l(aninchen (ca. 2 kg Gewicht), die direkt nach
der Entnahme aus dem aus dem abgeschirmten Transportkarton entnommen
wurden und nicht aufgestalli waren, war kein BALT in den
Lungen zu finden. Diese Daten belegen, dass BAU| selbst beim I(aninchen,
das bisher als repräsentative Spezies für BALT dargestellt wurde,
die Entwicklung von BALT von der exogenen mikrobiellen Stimulation
abhängt. BALT ist demnach kein sekundäres sondern tertiäres lvmphatisches
Organ.
Mikroskopische Beobachtung von Alveolen der
Mauslunge in vivo
Veith NTl, Bischoff Xß, MüIIer L von2, Laschke MW,
Schramm R4, Roller 13, Herrmann M2, Menger MD3,
Tschernig T1
l
lnstitut für Anatomie, tJniversitdt des Saarlandes,
Homburg; 2tnstitut für Medizinische Mikrobiologie und,
Hygiene, Universität des Saarlandes, Homburg; 3lnstitut für
Iilinisch-Experimentelle Chirurgie, Universität des
S aarlandes, H omburg; a H erzchirur gis che l(Iinik und
Polikinik, Ludwig-Maximilian-Univ ersitöt München
DOI: 1 0.1 055/s-0032-1313580
Einleitung: Die intravital-mikroskopische Analyse von Alveolen ist relevant
für Pathomechanismen bei Partikelbelastung (Staub, Nano) und
Infektionen. In der Maus bereiten die Aiemexkursionen bei schneller
Frequenz Probleme. Hier wird eine Technik vorgestellt, die es erlaubt,
Alveolen größerer Lungenabschnitte nach Instillation von Partikeln oder
Bakterien zu beobachten. Methoden: C57BL/6Mäuse wurden in Narkose
intubiert und fluoreszenzmarkierte Partikel oder Bakterien wurden
intratracheal instilliert. Danach erfolgte eine rechtsseitige Thorakotomie
und die Beobachtung der Lungen unter einem Auflicht-Fluoreszenzmikroskop
(siehe Abb.1). Das gewonnene Biidmaterial wurde mit Computer-gestützter
Bildanalyse ausgewertet.
Pneumologie 2012:66:442-444 Ceorg Thieme Verlag KC Stuttgart . New Yorl<
.ofl,i..HF-J
Abb. 1 : Sclrenratischer Versr-rchsaufbat r
Legerrde:
A CCD-Kamera
B Auflichtmil

Pulmonale und systemische Effekte von
Kohlenstoff-Nanoröhrchen nach pharyngealer
Aspiration in die Mauslunge
Albrechi Cl, Boats AVr/1,2, Vlilhelmi v1, Kailing i1 ,
Huämann I't\l, Hellsck Bt , van Eeria D1, Bast A2, Schins RPFi
1
Leib niz - l n stitut für' U mw e ltm e dizini s ch e F a r s cLt.tng,
Düsseldorf; 2Department of Plrcrr"acaiagy ü Toxicology,
Ma astri cht Univ er sity, The N e th er I art ds
DOi: .l
C.1 055/s-0032-1 3.1 3581
Einleitung: Die spezifischen Oberflächeneigenschaften von Nanomaterialien
werden im Zusammenhang init einer erhöirten Pathogenltät fLir
verschieciene Organsysteme beschrieben. Insbesondere die Wirkungen
von l(ohlenstoffröhrchen (engl. carbon nanotubes, CNT) wercien ais kritisch
angesehen. Ziel der gegenwärtigerr Studie ist ciie Unielsuchung voii
CNT-induzierten pulmonaien und systemischen Veränderungen in Abhängigkeit
ihrer chemisch-ph-vsikaiis,clren Eigenschaften. Methoden:
Dazu wurden weibliche C57Bl/5j-Mär-ise mii zwei CNT-Proben unterschiectriicher
chemisch-physikaiischer Eigenschaften (4C Vgl 2.A g l(örpergewicht)
pharyngeai aspiriert. Die Vehikeikoniroligruppe erhielt nur die
zur CNT-Suspension verwandte Lös',:ng (0,6 nig/ml Bovines Serum Albn,
n-rin/10pLg/nl Dipalnitoyiphosphatrdylcholin/PBS). Nach B Vr/ochen
wurde Blutplasma für die Uritersuchung mitieis Zytat

spirationstrakt durch Bindung an carcinaembryonic ceII adhesion molecules
(CEACAM) 1, 5 und 6, die in humanem pulmonalem Epithel exprimiert
werden. Mäuse besitzen diese CEACAMs nicht und sind nicht
suszeptibel gegenüber M. cat. Anhand von Wiidtyp (Wf)- und transgenen,
humanes CEACAM 1, 5 oder 6 exprimierenden Mäusen, die mit
M. cat. infiziert wurden, kann erstmals die Rolle dieser Rezeptoren für
die l(olonisation sowie die pulmonale und systemische Inflammation in
vdyo untersucht werden. Methoden: Für einen Zelladhäsionassay erfolgte
in vitro eine M. caf.-lnfektion von CEACAM 5 oder 6 exprimierenden
Hela-Zellen. WT und CEACAM 1, 5, und 6 transgene Mäuse wurden mit
M. cat. intratracheal infiziert und der Verlauf der Infektion anhand von
I(örpergewicht und Temperatur ermittelt. Ferner erfolgte die l(eimzahlbestimmung
in Lunge, Blut und Milz, sowie die histologische Untersuchung
der Lunge und die Beurteilung des Entzündungsgeschehens.
Ergebnisse: In in-vitro Versuchen konnte die Bindung von M. caf. an
CEACAM 5 und 6 bestätigt werden. Die Expression von humanem CEA-
CAM 1, 5 und 6 in den entsprechenden transgenen Mäusen konnte immunhistologisch
belegt werden, Nach Infektion der WT- und CEACAM 1,
5 oder 6 transgenen Mäuse kam es zwar kurzfristig zu einem Anstieg
der proinflammatorischen Zytokine im Serum. Es zeigte sich jedoch
nach 24 h eine fast vollständige pulmonale Clearance der Erreger, und
im weiteren Verlauf war bei den WT-Mäusen ebenso wie bei den CEA-
CAM 1, 5 und 6 exprimierenden Tieren weder eine pulmonale I(olonisierung
mit M. caf, noch ein Persistieren der systemischen Inflammation
zu beobachten. Fazit und Ausblick Bei intakter mukoziliärer Clearance
hat die Expression der humanen Adhäsionsmoleküle CEACAM 1, 5 und 6
in transgenen Mäusen keinen Einfluss auf die I(olonisierung des Respirationstraldes
mit M. cat. Da eine l(olonisierung des unteren Respirationstraktes
beim Menschen durch M. cat. erst nach einer- meist durch
das Rauchen hervorgerufenen - Störung der mukoziliären Clearance
auftritt, planen wir die transgenen Mäuse zunächst über 6 Monate gegenüber
Zigarettenrauch zu exponieren, um anschließend die CEACAM -
M. cat. Bindung und die l(olonisierung dieses Pathogens in den Atemwegen
erneut zu untersuchen.
Pneumologie 2012;66: 442-444 Georg Thieme Verlag l(C Stuttgart . New york
Die Bedeutung der Sphingosinkinase-l und des
Sphingosin-l-Phosphats für die Entstehung des
akuten lungenveriagens bei Pneumokokken-
Pneumonie
Gutbier 81, Schönrock SM1, Haberberger R2, Hocke ACI,
Hippenstiel 51, Lüth A3, I(Ieuser 83, Bertrams Wd,
Szymanski I(, Reppe I(, MüIIer HC1, Schmeclc 84,
Andratsch Ms, Mitchell T16, Scltütte HI, Mayer I(,
Suttorp Nl, Witzenrath Mr, CAPNETZ Study Group
lMed. I(inik m. S, Infektiologie u. pneumalogie, Chait| -
IJniversitötsmedizin Berlin: 2 Anatomy and Histologr,
Flinder s IJniv ersity, Adelaide, Australia; 3 Institut für
Ernührungswissenschaft, IJniversität Potsdam ; aMolekulare
Pneumologie, D eutsches Zentrum f. Lungenforschung,
Philipps lJniversität Marburg; slnstitut für Physiologie u.
Medizinische Physik, Medizinis che lJniversitöt Innsbruck,
Ö sterreich : 6 Glasgow Biome dicol Res earch Centr e,
tJniversity of Glasgow, UIC TMedizinische lQinik II,
University of Giel3en Lung Center (UGLC), Gie!3en
DOI: 1 0.1 055/s-0032-1 31 3585
Einleitung: Die schwere Pneumonie kann zu akutem Lungenversagen
ftihren. Das bioaktive Sphingolipid Sphingosin-l-phosphat (S1p) wird
in der Lunge hauptsächlich von Sphingosinkinase-1 (Spht{1) gebildet,
deren Expression bei Infektionen gesteigert ist. S1P ist für zahlreiche
inflammatorische Signaltransduktionswege von Bedeutung. In der Lunge
reguliert S1P, durch Sphingosinkinase-1 (Sphl(1) synrhetisierr, Inflammation.
Die Rolle von Sphl(l und S 1P bei Pneumonie ist unbekannt.
Methoden: Um die Bedeutung von S 1P bei Pneumonie zu charakterisieren
wurde S 1P im Serum von Pneumoniepatienten quantifiziert und
humane Lungen wurden post mortem immunohistochemisch beurteilt.
Wildtyp-, SphKl-/- und S1P-behandelte, mit S. pneümoniae (S.pn.) infizierte
Mäuse, und isoliert perfundierte und ventilierte Mauslungen
(IPML) wurden untersucht. Morphologie und transzelluläre elektrische
Resistance (TER) humaner Endothelzellen (HUVEC) wurden analysiert.
Humanes Lungengewebe und periphere Blutmonozyten (PBMCs) wurden
ex vivo mit S.pn. infiziert und die S 1P-l(onzentration und
Sphl(1-Expression bestimmt. Ergebnisse S1P war im Serum von patienten
und Mäusen mit Pneumonie reduziert. Die S.pn.-lnfektion erhöhte
den pulmonalen S1P-Spiegel, sowie die mRNA-Expression von
Sphl(1 und S1P-Rezeptor2 (S1PR2) in WT-Mäusen. Pneumonie-induzierte
pulmonale Permeabilität war bei SphKtr- Mäusen reduziert und
bei S1P-behandelten Mäusen erhöht. S1P war in ex vivo S.pn.-infiziertem
humanem Lungengewebe reduziert. In humanen Lungen von pneumonie-Patienten
war Sphl(l in Makrophagen nachweisbar. S.pn.-infizierte
humane PBMCs wiesen erhöhte S 1P-l(onzentration und
Sphl(1-Expression im Vergleich zu uninfizierten auf. Geringe S1P-l(onzentrationen
reduzierten Thrombin-, aber nicht PLY-induzierte endotheliale
Permeabilität, und hohe I(onzentrationen zerstörten die Integrität
des HUVEC-Monolayers. In IPML erhöhten PLY und S 1P synergistisch die
Permeabilität, die durch Inhibition des S1PR2 und des abhängigen Signaiweges
(Rho-lünase) reduziert werden konnte. Schlussfolgerungf
Ausbliclc Die Ergebnisse weisen darauf hin, dass die Beeinflussung der
Sphl(l-S 1P-S 1PRz-Achse eine potentielle neue Therapieperspektive bei
schwerer Pneumonie bieten könnte. Unterstützung: SFB/TRB4, C6,