Genetische Untersuchung der Populationsstruktur ... - Die Schmellers
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6 MATERIAL UND METHODEN<br />
6.3.6 Versuchsablauf<br />
Einweichen <strong>der</strong> CA-Platten in<br />
Einweichpuffer (=Laufpuffer)<br />
Abtropfen und Abtrocknen<br />
<strong>der</strong> benötigten Platte mittels<br />
Filterpapier<br />
Auflegen <strong>der</strong> Platte auf<br />
angefeuchteten<br />
Applikatorhalter<br />
Abpräparieren eines<br />
Hinterbeines<br />
Halbieren des Femurs<br />
Homogenisieren in<br />
Homogenisationspuffer<br />
Zerkleinern <strong>der</strong> Proben<br />
mit 3 - 4 starken, kurzen<br />
Ultraschallstößen<br />
Zentrifugieren (4 min bei<br />
14000 u/min)<br />
Pipettieren <strong>der</strong> Proben in<br />
die Kammern <strong>der</strong><br />
Probenplatte<br />
Aufbringen <strong>der</strong> Proben<br />
auf CA-Platten mit<br />
Applikator "Super Z"<br />
Auflegen <strong>der</strong> CA-Platte auf<br />
Laufkammersteg<br />
Spannung anlegen und<br />
bestimmte Zeit laufen lassen<br />
Platten herunternehmen und<br />
sofort anfärben<br />
Nach erfolgter Anfärbung <strong>der</strong> Banden<br />
Agar abspülen und Platten wässern<br />
Trocknen <strong>der</strong> Platten für zwei Stunden<br />
bei 40°C im Trockenschrank<br />
Auswertung <strong>der</strong><br />
Bandenmuster<br />
53<br />
Färbereagenz<br />
vorbereiten<br />
Abbildung 6.3-6: Darstellung des Versuchsablaufs von <strong>der</strong> Probenvorbereitung bis zur Bandenmusterauswertung.
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